大腸桿菌生產(chǎn)制備重組人胰島素工藝(參考版)
2024-08-16 05:12本頁面
【正文】 。〖課后學(xué)習(xí)〗1．嘗試從植物組織中提取DNA分子。【活動(dòng)4】觀看視頻：觀看“多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段”視頻，學(xué)會(huì)相關(guān)技術(shù)方法。3．（記憶）將100?L反應(yīng)稀釋液倒入比色杯中，測(cè)定在260nm處的光吸收值。四、結(jié)果分析與評(píng)價(jià)【活動(dòng)4】閱讀教材P63“結(jié)果分析與評(píng)價(jià)”，討論并回答下列問題：1．（記憶）反應(yīng)液稀釋：取2?LPCR反應(yīng)液，添加98?L蒸餾水。3．（記憶）每添加一種反應(yīng)成分，更換一個(gè)移液器槍頭。三、操作提示【活動(dòng)4】閱讀教材P62“操作提示”，討論并回答下列問題：1．（記憶）避免外源DNA污染，所用儀器、緩沖液、蒸餾水等使用前高壓滅菌。2．（了解）實(shí)驗(yàn)操作步驟：按照PCR反應(yīng)體系配方配制反應(yīng)液；將PCR反應(yīng)體系50μL用微量移液器轉(zhuǎn)移到微量離心管（）中；將微量離心管放到PCR儀中；設(shè)置PCR儀的工作參數(shù)；DNA在PCR儀中大量擴(kuò)增。2．（理解）PCR反應(yīng)過程是：在升溫至90℃以上時(shí)DNA解旋；在降溫至50℃左右時(shí)引物與DNA單鏈結(jié)合；在升溫至72℃左右時(shí)合成DNA子鏈?！舅伎?】緩沖液相當(dāng)細(xì)胞內(nèi)的什么成分？核液。復(fù)制條件：緩沖液，DNA模板、四種脫氧核苷酸、熱穩(wěn)定DNA聚合酶、兩種引物。3．（記憶）DNA分子復(fù)制的人工控制解開螺旋：在80～100℃時(shí)，DNA雙螺旋打開，形成兩條DNA單鏈，稱為變性。再次，在DNA聚合酶的作用下，從引物的3’端開始合成DNA子鏈。（2）DNA的復(fù)制：首先，在解旋酶的作用下，由ATP供能，DNA發(fā)生解旋形成兩條DNA單鏈。一、基礎(chǔ)知識(shí)【活動(dòng)1】閱讀教材P58“PCR原理”，討論并回答下列問題：
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