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dna的粗提取與鑒定(參考版)

2025-07-18 18:25本頁面
  

【正文】 因此,通過反復(fù)溶解與析出 DNA,就能夠除去與 DNA溶解度不同的多種雜質(zhì) . 觀察你提取的 DNA顏色,如果不是白色絲狀物,說明 DNA中的雜質(zhì)較多;二苯胺鑒定出現(xiàn) 藍色 說明實驗基本成功,如果不呈現(xiàn)藍色,可能所提取的 DNA含量低,或是實驗操作中出現(xiàn)錯誤,需要重新制備 . 四、課題成果評價 (一)是否提取出了 DNA 本實驗提取的 DNA粗制品有可能仍然含有核蛋白、多糖等雜質(zhì) . (二)分析 DNA中的雜質(zhì) (三)不同實驗方法的比較 對于不同的實驗方法,本課題可以采用分組的方法進行研究?;旌暇鶆蚝?,將試管臵于沸水中加熱 5 min,待試管冷卻后,觀察并且比較兩支試管中溶液顏色的變化 ⑧ DNA的鑒定 討論: 答:有絲狀物的試管變成藍色,另一試管還是原來顏色 ( 2)這一鑒定結(jié)果說明什么問題? ( 1)比較兩個試管中溶液的顏色有什么不同? 答:提取出的絲狀物是 DNA ( 3) DNA的直徑約為 20 1010 m,實驗中出現(xiàn)的絲狀物的粗細是否表示 1個 DNA分子直徑的大小? 答: DNA分子直徑只有 2 nm。這種絲狀物的主要成分就是 DNA 答:因為 DNA不溶于冷酒精,而其他物質(zhì)可以溶解在酒精中,使含雜質(zhì)較少的DNA絲狀物可以析出 ,懸浮于溶液中 討論: ( 2)觀察絲狀物呈什么顏色? 答:白色 ( 1)為什么要加 50mL的冷酒精? 取兩支 20 mL的試管,各加入氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為 0. 015 mol/ L的溶液 5 mL,將絲狀物放入其中一支試管中, 用玻璃棒攪拌, 使絲狀物溶解。取其濾液, DNA溶于濾液中 . ⑦ 提取含雜質(zhì)較少的 DNA 在上述濾過的溶液中,加入 冷卻的、酒精的體積分數(shù)為 95% 的溶液 50mL(使用冷卻的酒精,對 DNA的凝集效果較佳),并用 玻璃棒攪拌, 溶液中會出現(xiàn)含雜質(zhì)較少的絲狀物。實驗中應(yīng)該緩慢貼壁加入蒸餾水,并輕輕地沿一個方向不停地均勻攪拌,以利于 DNA分子的附著和纏繞 注意事項: ④ 濾取含 DNA的粘稠物 用放有多層紗布 的漏斗,過濾步驟 3中的溶液至 500mL的燒杯中,含 DNA的 粘稠物被留在紗布上 ⑤ 將 DNA的粘稠物再溶解 取 1個 50 mL燒杯,向燒杯內(nèi)注入氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為 2 mol/ L的溶液 20mL。繼續(xù)加入蒸餾水,溶液中出現(xiàn)的粘稠物會越來越多。 ① 提取雞血細胞的細胞核物質(zhì) 討論: 答:讓細胞內(nèi)濃度大于周圍溶液的濃度,細胞會吸水以至脹破 ( 1)為什么要加入蒸餾水?加入蒸餾水后細胞會有什么變化? ( 2)用玻璃棒攪拌有什么意義? 答:用玻璃棒攪拌可以加速血細胞和細胞
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