【正文】 在報告菌落數(shù)為“不可計”時，應(yīng)注明樣品的稀釋度。 菌落計數(shù)的報告，菌落數(shù)在10以內(nèi)時，按實有數(shù)值報告之，大于100時，采用二位有效數(shù)字，在二位有效數(shù)字后面的數(shù)值，應(yīng)以四舍五入法計算。 若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30～300之間，其中一個稀釋度大于300，而相鄰的另一稀釋度小于30時，則以接近30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之（見表1中例6）。 若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300，則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告之（見表1中例4）。當(dāng)只有一個稀釋度的平均菌落數(shù)符合此范圍時，即以該平皿菌落數(shù)乘其稀釋倍數(shù)報告之（見表1中例1）。若片狀菌落不到平皿中的一半，而其余一半中菌落數(shù)分布又很均勻，則可將此半個平皿菌落計數(shù)后乘以2，以代表全皿菌落數(shù)。記下各平皿的菌落數(shù)后，求出同一稀釋度各平皿生長的平均菌落數(shù)。 為便于區(qū)別化妝品中的顆粒與菌落，可在每100mL卵磷脂吐溫80營養(yǎng)瓊脂中加入1mL %的TTC溶液，如有細菌存在，培養(yǎng)后菌落呈紅色，而化妝品的顆粒顏色無變化。1℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h177。2h。 將融化并冷至45℃～50℃的卵磷脂吐溫80營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾注到平皿內(nèi)，每皿約15mL，隨即轉(zhuǎn)動平皿，使樣品與培養(yǎng)基充分混合均勻，待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平皿，置36℃177。吸取2mL，分別注入到兩個滅菌平皿內(nèi)，每皿1mL。 6 操作步驟 用滅菌吸管吸取1：10稀釋的檢液2mL，分別注入到兩個滅菌平皿內(nèi)，每皿1mL。加入已溶解的卵磷脂、吐溫80，混勻，～，加入瓊脂，121℃高壓滅菌20min，儲存于冷暗處備用。培養(yǎng)基和試劑 生理鹽水：。恒溫水浴箱，55℃177。1℃。酒精燈。滅菌平皿，直徑90mm。高壓滅菌器。量筒，200mL。 測定菌落總數(shù)便于判明樣品被細菌污染的程度，是對樣品進行衛(wèi)生學(xué)總評價的綜合依據(jù)。范圍：本規(guī)范規(guī)定了化妝品中菌落總數(shù)的檢驗方法；本規(guī)范適用于化妝品菌落總數(shù)的測定； 定義 菌落總數(shù) Aerobic bacterial count 化妝品檢樣經(jīng)過處理，在一定條件下培養(yǎng)后（如培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時間、pH值、需氧性質(zhì)等），1g（1mL）檢樣中所含菌落的總數(shù)。使用均質(zhì)器時，則采用滅菌均質(zhì)袋，將上述水溶性膏、霜、粉劑等，稱10g樣品加入90mL滅菌生理鹽水，均質(zhì)1min～2min；疏水性膏、霜及眉筆、口紅等，稱10g樣品，加10mL滅菌液體石蠟，10mL吐溫80，70mL滅菌生理鹽水，均質(zhì)3min～5min。 疏水性樣品：稱取10g，置于滅菌的研缽中，加10mL滅菌液體石蠟，研磨成粘稠狀，再加入10mL滅菌吐溫80，研磨待溶解后，加70mL滅菌生理鹽水，在40℃～44℃水浴中充分混合，制成1：10檢液。 膏、霜、乳劑半固體狀樣品 親水性的樣品：稱取10g，加到裝有玻璃珠及90mL滅菌生理鹽水的三角瓶中，充分振蕩混勻，靜置15min。6 供檢樣品的制備 液體樣品 水溶性的液體樣品，用滅菌吸管吸取10mL樣品加到90mL滅菌生理鹽水中，混勻后，制成1：10檢液。 若只有一個樣品而同時需做多種分析，如微生物、毒理、化學(xué)等，則宜先取出部分樣品做微生物檢驗，再將剩余樣品做其它分析。 接到樣品后，應(yīng)立即登記，編寫檢驗序號，并按檢驗要求盡快檢驗。 供檢樣品，應(yīng)嚴格保持原有的包裝狀態(tài)。檢驗時，應(yīng)從不少于2個包裝單位的取樣中共取10g或10mL。 制法：取吐溫80 50mL，121℃高壓滅菌20min。 制法：取液體石蠟50mL，121℃高壓滅菌20min。注：如無酪蛋白胨和大豆蛋白胨，也可用多胨代替。 SCDLP液體培養(yǎng)基 成分：酪蛋白胨 17g 大豆蛋白胨 3g 氯化鈉 5g 磷酸氫二鉀 葡萄糖 卵磷脂 1g 吐溫80 7g 蒸餾水 1000mL制法：先將卵磷脂在少量蒸餾水中加溫溶解后，再與其它成分混合，加熱溶解，～，每瓶90mL，121℃高壓滅菌20min。滅菌均質(zhì)袋。恒溫水浴箱。玻璃棒。三角瓶，250mL、150mL。高壓滅菌器。6分析結(jié)果的表述 PH值的測定結(jié)果以兩次測量的平均值表示， 批準 審核編制文件名稱微生物檢測方法樣品的制備版本文件編號ZJBZ0206制定部門質(zhì)檢部頁次目的：保證所的生產(chǎn)的產(chǎn)品符合公司規(guī)定，滿足客戶品質(zhì)要求，制定準確可行的試驗方法，真是有效的反應(yīng)出產(chǎn)品的各種檢測指標。范圍：公司所有生產(chǎn)產(chǎn)品； ：PH劑稱取試樣一份（），加入經(jīng)煮沸冷卻后的實驗室用水九分，加熱至40℃，并不斷攪拌至均勻，冷卻至規(guī)定溫度，待用。b）透明包裝產(chǎn)品取兩袋包裝完整的試樣，把一袋（瓶）試樣置于預(yù)先調(diào)好至（5～10）℃的恒溫培養(yǎng)箱中，24 h后取出，恢復(fù)至室溫后，與另外一瓶試樣進行目測比較。：儀器：a）試管：Φ20mm120mmb) 冰箱：溫控精度177。b）透明包裝產(chǎn)品取兩袋包裝完整的試樣，把一袋（瓶）試樣置于預(yù)先調(diào)好至（40177。2℃操作程序：a) 非透明包裝產(chǎn)品將試樣分別倒入2支Φ20mm120mm的試管內(nèi)，使液面高度約80mm，塞上干凈的塞子，把一致待驗的試管置于預(yù)先調(diào)節(jié)到（40177。1）℃保持24h，恢復(fù)至室溫后無分離析水現(xiàn)象耐寒（5～10）℃保持24h，恢復(fù)至室溫后無分層（5～10）℃保持24h，恢復(fù)至室溫后無分離析水現(xiàn)象pH（25℃）～（α、β羥基酸類產(chǎn)品可按企標執(zhí)行）兒童產(chǎn)品：～（α、β羥基酸類產(chǎn)品可按企標執(zhí)行）泡沫（40℃）透明型≥100非透明型≥50兒童產(chǎn)品≥40≥100有效物含量/%成人產(chǎn)品≥兒童產(chǎn)品≥活性物含量/%≥微生物指標細菌總數(shù)/(CFU/g)≤1000（兒童用產(chǎn)品≤500）霉菌和酵母菌總數(shù)/(CFU/g)≤