dna重組技術(shù)的基本工具(參考版)
2025-07-17 14:33本頁(yè)面
【正文】 12 / 12。6.［2002上海高考］下列高科技成果中，根據(jù)基因重組原理進(jìn)行的是（ ）①我國(guó)科學(xué)家袁隆平利用雜交技術(shù)培育出超級(jí)水稻 ②我國(guó)科學(xué)家將素云金桿菌的某些基因移植到棉花體內(nèi)③我國(guó)科學(xué)家通過(guò)返回式衛(wèi)星搭載種子培育出太空椒④我國(guó)科學(xué)家通過(guò)體細(xì)胞克隆技術(shù)培養(yǎng)出克隆牛A、① B、①② C、②②③ D、②③④答案：B 解析：培育太空椒利用的原理是基因突變，體細(xì)胞克隆技術(shù)培養(yǎng)出克隆牛是利用了細(xì)胞的全能性。本題答案為A。因此，目的基因就不會(huì)因?yàn)橛行陨扯鴮?dǎo)致花粉把此性狀傳遞給近緣物種，從而避免了基因污染。（2）既然該植株可以看作是雜合子，我們假設(shè)該雜合子的基因類型為Aa，其中A為抗除草劑基因，a為不抗除草劑基因，則Aa自交后→1AA：2 Aa：1aa，故具有抗除草劑的植株占總數(shù)的3/4。如果把目的基因?qū)巳~綠體DNA中，就可以避免“基因污染”，原因是 。理論上，在該轉(zhuǎn)基因植株自交F1代中，仍具有抗除草劑特性的植株占總數(shù)的 ，原因是 。(2)將攜帶抗除草劑基因的重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入二倍體油菜細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)、篩選獲得一株有抗除草劑特性的轉(zhuǎn)基因植株。3．[2005江蘇高考]在植物基因工程中，用土壤農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒作為運(yùn)載體．把目的基因重組入Ti質(zhì)粒上的TDNA片段中，再將重組的TDNA插入植物細(xì)胞的染色體DNA中。抗蟲(chóng)基因能表達(dá)出致毒蛋白，導(dǎo)致害蟲(chóng)因食用抗蟲(chóng)棉后死亡 ，而不能產(chǎn)生對(duì)抗生素的抗性。2．［2006江蘇高考］我國(guó)科學(xué)家運(yùn)用基因工程技術(shù)，將蘇云金芽孢桿菌的抗蟲(chóng)基因?qū)朊藁?xì)胞并成功表達(dá)，培育出了抗蟲(chóng)棉?！疚迥旮呖蓟胤拧?．［2006四川高考］用基因工程技術(shù)可使大腸桿菌合成人的蛋白質(zhì)。有些限制酶在消化它們自己的處于不同部位的限制位點(diǎn)，其效率也有明顯差異。多數(shù)限制內(nèi)切酶的最適反應(yīng)溫度是37℃，少數(shù)限制性內(nèi)切酶的最適反應(yīng)溫度高于或低于37℃。（3）酶切消化反應(yīng)的溫度DNA消化反應(yīng)的溫度，是影響限制內(nèi)切酶活性的一個(gè)重要因素。不同限制性內(nèi)切酶對(duì)NaCl濃度的要求不同，這是不同限制酶緩沖液組成上的一個(gè)主要的不同。（2）核酸內(nèi)切限制酶的緩沖液核酸內(nèi)切限制酶的標(biāo)準(zhǔn)緩沖液包括氯化鎂、氯化鈉或氯化鉀、TrisHCL、巰基乙醇或二硫蘇糖醇(DTT)以及牛血清白蛋白(BSA)等。鏈內(nèi)的核苷酸第5位上的磷酸已形成二酯鍵，第3位上的羥基也已參與二酯鍵的形成，故稱核苷酸殘基。在鏈的一端的一個(gè)核苷酸核糖上第5位連接的磷酸只有一個(gè)酯鍵，稱此核苷酸為DNA鏈的5′磷酸末端或5′端。在核酸中一個(gè)核苷酸核糖上第3位的羥基與下一個(gè)核苷酸核糖上第5位的磷酸羥基脫水縮合成酯鍵，該酯鍵稱3′,5′－磷酸二酯鍵。P6旁欄思考題：想一想，具備什么條件才能充當(dāng)“分子運(yùn)輸車”？解析：能自我復(fù)制、有一個(gè)或多個(gè)切割位點(diǎn)、有標(biāo)記基因位點(diǎn)及對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害等。2. 如果你操作失誤，堿基不能配對(duì)。模擬制作討論題（P6）：1. 你模擬插入的DNA片段能稱得上一個(gè)基因嗎？提示：不能。因此DNA連接酶不需要模板。DNA連接酶和DNA聚合酶都是形成磷酸二酯鍵（在相鄰核苷酸的3位碳原子上的羥基與5位碳原子上所連磷酸基團(tuán)的羥基之間形成），那么，二者的差別主要表現(xiàn)在什么地方呢？（1）DNA聚合酶只能將單個(gè)核苷酸加到已有的核酸片段的3′末端的羥基上，形成磷酸二酯鍵；而DNA連接酶是在兩個(gè)DNA片段之間形成磷酸二酯鍵，不是在單個(gè)核苷酸與DNA片段之間形成磷酸二酯鍵。另一種是從T4噬菌體中分離得到，稱為T4連接酶。尋根問(wèn)底（P6）：DNA連接酶與DNA聚合酶是一回事嗎？為什么？答：不是一回事。限制酶就是細(xì)菌的一種防御性工具，當(dāng)外源DNA侵入時(shí)，會(huì)利用限制酶將外源DNA切割掉，以保證自身的安全。：DNA連接酶有連接單鏈DNA的本領(lǐng)嗎？解析：迄今為止，所發(fā)現(xiàn)的DNA連接酶都不具有連接單鏈DNA的能力，至于原因，現(xiàn)在還不清楚，也許將來(lái)會(huì)發(fā)現(xiàn)可以連接單鏈DNA的酶。（5）載體DNA分子大小應(yīng)適合，以便提取和在體外進(jìn)行操作，太大就不便操作。（3）載體DNA必需帶有標(biāo)記基因，以便重組后進(jìn)行重組子的篩選。這些供目的基因插入的限制酶的切點(diǎn)所處的位置，還必須是在質(zhì)粒本身需要的基因片段之外，這樣才不至于因目的基因的插入而失活。是否任何質(zhì)粒都可以作為基因工程載體使用呢？其實(shí)不然，作為基因工程使用的載體必需滿足以下條件。）。這樣，盡管細(xì)菌中含有某種限制酶也不會(huì)使自身的DNA被切斷，并且可以防止外源DNA的入侵（本題不要求學(xué)生回答的完全，教師可參考教師用書(shū)中的提示，根據(jù)學(xué)生的具體情況，給予指導(dǎo)。細(xì)菌中限制酶之所以不切斷自身DNA，是因?yàn)槲⑸镌陂L(zhǎng)期的進(jìn)化過(guò)程中形成了一套完善的防御機(jī)制，對(duì)于外源入侵的DNA可以降解掉。解析：限制酶具有特異性，一種限制酶只能識(shí)別特定的堿基序列，并在特定的部位切開(kāi)?！菊n后答案點(diǎn)撥】思考與探究（P7）1. 不能。理論上，在該轉(zhuǎn)基因植株自交F1代中，仍具有抗除草劑特性的植株占總數(shù)的 ， (3)種植上述轉(zhuǎn)基因油菜，它所攜帶的目的基因可以通過(guò)花粉傳遞給近緣物種，造成“基因污染”。(2)將攜帶抗除草劑基因的重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入二倍體油菜細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)、篩選獲得一株有抗除草劑特性的轉(zhuǎn)基因植株。把目的基因重組入Ti質(zhì)粒上的TDNA片段中，再將重組的TDNA插入植物細(xì)胞的染色體DNA中。如果將藥物蛋白基因移到動(dòng)物如牛、羊的膀胱上皮細(xì)胞中，利用轉(zhuǎn)基因牛羊尿液生產(chǎn)提取藥物比乳汁提取藥物的更大優(yōu)越性在于：處于不同發(fā)育時(shí)期的 動(dòng)物都可生產(chǎn)藥物。在翻譯中需要的模板是 ，原料是氨基酸，直接能源是ATP，搬運(yùn)工兼裝配工是 ，將氨基酸的肽鍵連接成蛋白質(zhì)的場(chǎng)所是________，“翻譯”可理解為將由____個(gè)“字母”組成的核酸“語(yǔ)言”翻譯成由 個(gè)“字母”組成
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