dna重組技術(shù)的基本工具(參考版)
2025-05-15 13:57本頁面
【正文】 （ 4） DNA連接酶：是通過磷酸二酯鍵連接雙鏈DNA的缺口。注意：使 DNA解成兩條長鏈的方法除用解旋酶以外，在適當(dāng)?shù)母邷兀ㄈ?94℃ ）、重金屬鹽的作用下，也可使 DNA解旋。 總結(jié)規(guī)律 限制酶所識別的序列有什么特點？ 無論是 6個堿基還是 4個堿基，都可以找到一條中心軸線，中軸線兩側(cè)的雙鏈 DNA上的堿基是反向?qū)ΨQ重復(fù)排列的。 ⑤ 載體 DNA分子大小應(yīng)合適，以便提取和在體外進(jìn)行操作。 ③具有某些 標(biāo)記基因 ，便于進(jìn)行 篩選 。 作為基因工程運(yùn)載體的條件： ①能夠在宿主細(xì)胞中 復(fù)制并穩(wěn)定地保存 。能將外源基因送入細(xì)胞的工具就是運(yùn)載體。DNA連接酶是連接 兩個雙鏈 DNA片段 的末端，形成磷酸二酯鍵 ,不需要摸板。 作用：將雙鏈 DNA分子片段“縫合”起來，恢復(fù)兩個核苷酸之間的 磷酸二酯鍵 。coli DNA連接酶只能將雙鏈 DNA片段互補(bǔ)的 黏性末端 之間連接起來。 2． DNA連接酶 —“分子縫合針” 種類： （ 1） E P7T2聯(lián)系你已有的知識，為什么細(xì)菌中限制酶不剪切細(xì)菌本身的 DNA？ 細(xì)菌中限制酶之所以不切斷自身 DNA，是因為生物在長期演化過程中，含有某種限制酶的細(xì)胞，其 DNA分子中或者不具備這種限制酶的識別切割序列 ，或者通過甲基化酶將甲基轉(zhuǎn)移到所識別序列的堿基上（修飾），使限制酶不能將其切開 。有什么實例來說明？ 噬菌體侵染細(xì)菌的實驗，人感染病毒 對于單細(xì)胞的生物來講，它們沒有復(fù)雜的結(jié)構(gòu)和系統(tǒng)，又如何來抵抗入侵的外源 DNA，保護(hù)自身呢？ 需要讓外來的 DNA失效，才能保護(hù)自身 尋根問底：原核生物很容易受到自然界中外源 DNA的入侵，但是長期的進(jìn)化過程中，這些原核生物卻沒有因為外源 DNA的入侵而滅絕。 看下圖，分
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