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dna重組技術(shù)的基本工具介紹(參考版)

2025-01-10 02:36本頁面
  

【正文】 常用的載體有: 質(zhì)粒 質(zhì)粒是基因工程最常用的運(yùn)載體,它廣泛地存在于細(xì)菌中,是細(xì)菌染色體外能夠自主復(fù)制的很小的環(huán)狀 DNA分子,大小只有普通細(xì)菌擬核 DNA的百分之一。 載體的作用: 將外源基因轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中去。 “ 分子運(yùn)輸車” 載體必須具備的條件: 具有某些標(biāo)記基因,便于進(jìn)行篩選。 這兩種連接酶催化反應(yīng)基本相同,都是連接雙鏈 DNA的缺口,而不能連接單鏈 DNA。 DNA連接酶與 DNA聚合酶一樣嗎?為什么? “ 分子縫合針” DNA連接酶 種類 E因此 DNA連接酶不需要模板。 DNA連接酶和 DNA聚合酶都是形成磷酸二酯鍵 , 二者的差別主要表現(xiàn)在: ( 1) DNA聚合酶只能將單個(gè)核苷酸加到已有的核酸片段的3′ 末端的羥基上,形成磷酸二酯鍵;而 DNA連接酶是在兩個(gè)DNA片段之間形成磷酸二酯鍵,不是在單個(gè)核苷酸與 DNA片段之間形成磷酸二酯鍵。 因?yàn)楹心撤N限制酶的細(xì)胞,其 DNA分子中或不具備這種限制酶的識(shí)別序列,或通過甲基化酶將甲基轉(zhuǎn)移到所識(shí)別序列的堿基上,使限制酶不能將其切開。
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