dna重組技術(shù)的基本工具(1)(參考版)
2025-01-10 02:15本頁(yè)面
【正文】 總 結(jié) 課下制作： 使用 EcoRI酶、 連接酶 形成的 DNA重組的模型 ，下節(jié)課展示。 有特殊的遺傳標(biāo)記基因，便于篩選。 T4 DNA連接酶 能在受體細(xì)胞中穩(wěn)定保存并大量復(fù)制。 主要從原核生物中分離純化 產(chǎn)生黏性末端或平末端 功能 來(lái)源 結(jié)果 DNA連接酶 （分子縫合線(xiàn) ) 基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體（分子運(yùn)輸車(chē) ) 功能 種類(lèi) 種類(lèi) 條件 對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害。能將外源基因送入細(xì)胞的工具就是 運(yùn)載體 。 EcoRⅠ 黏性末端 黏性末端 SmaⅠ 平末端 平末端 …… GAATTC…… …… CTTAAG…… …… GAATTC…… …… CTTAAG…… EcoRⅠ …… GAATTC…… …… CTTAAG…… …… GAATTC…… …… CTTAAG…… 不同來(lái)源的 DNA片段混合 將不同種來(lái)源的 DNA片段連接起來(lái) 生物 A基因片段 生物 B基因片段 …… G AATTC…… …… CTTAA G…… …… G AATTC…… …… CTTAA G…… 酶切 “ 分子縫合針 ” —— DNA連接酶 DNA連接酶 可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來(lái)， 把切下來(lái)的 DNA片段拼接成新的 DNA，即將 脫氧核糖和磷酸 連接起來(lái) . 可把黏性末端之間的 縫隙“縫合” 起來(lái)， E 主要從原核生物中分離純化 大多數(shù)限制酶的識(shí)別序列由 6個(gè)核苷酸組成， 少數(shù)的識(shí)別序列由 5或 8個(gè)核苷酸組成 限制酶的識(shí)別序列 限制性核酸內(nèi)切酶 ——“ 分子手術(shù)刀 ” ： ： （特異性） ： 識(shí)別雙鏈 DNA分子中 特定 核苷酸序列，并且使每條鏈中 特定部位 的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)。 例如：流感嗜血桿菌的 d菌株( Haemophilus influenzae d )中先后分離到 3種限制酶，則分別命名為 : HindⅠ 、 HindⅡ 和 HindⅢ 限制性核酸內(nèi)切酶 ——“ 分子手術(shù)刀 ” ： ： （特異性） 識(shí)別雙鏈 DNA分子中 特定
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