對二氯苯對濕地土壤細(xì)菌群落多樣性的影響畢業(yè)論文(參考版)
2025-06-21 08:03本頁面
【正文】 在研究中，在土壤處理初期含對二氯苯２４０ ｍｇ／ｋｇ的培養(yǎng)土中出現(xiàn)一條新增條帶，為對照及其他處理土壤所沒有，處理后期隨著對二氯苯濃度降低而消失，說明土壤中存在著適應(yīng)對二氯苯適宜濃度而良好生長的細(xì)菌。細(xì)菌群落的耐受性可能是因?yàn)楹筇爝m應(yīng)、基因突變或者通過群落結(jié)構(gòu)中種群組成的改變而更具有耐受性。說明不同種類的細(xì)菌不僅對對二氯苯的敏感性不同，而且對不同程度的對二氯苯污染敏感性也不同。但是細(xì)菌群落遺傳多樣性并不是簡單地隨著對二氯苯濃度提高而減小。不同濃度對二氯苯不僅影響了組成細(xì)菌群落的細(xì)菌種群數(shù)目，還使細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)以及多樣性發(fā)生了改變。表明在土壤培養(yǎng)４５ ｄ時(shí)，不同對二氯苯濃度的土壤樣品之間的差異開始變小。２．３ 對二氯苯處理４５ ｄ土壤細(xì)菌群落總ｄｎａ的ｄｇｇｅ分析對二氯苯處理４５ ｄ時(shí)土壤細(xì)菌群落ｄｇｇｅ電泳圖譜與處理４ ｄ時(shí)相比發(fā)生了較大的改變，各濃度對二氯苯處理下條帶數(shù)目有所增加（圖５），在土壤培養(yǎng)４５ ｄ時(shí)，不同處理土壤樣品之間差異開始變小，對二氯苯濃度為１２０ ｍｇ／ｋｇ時(shí)譜型與對照的相似性為８４．３％，但亮度稍變暗；對二氯苯濃度為３６０ ｍｇ／ｋｇ時(shí)譜型與對照的相似度達(dá)到７１．５％。造成這種情況的原因可能是隨著對二氯苯的在土壤中的降解以及揮發(fā)，在土壤中的有效濃度降低，微生物的生長受到的抑制作用減小所引起的。第３和第４泳道上出現(xiàn)的條帶ｃ則表明在２４０ ｍｇ／ｋｇ和３６０ ｍｇ／ｋｇ濃度下有適應(yīng)該濃度的細(xì)菌，在２４０ ｍｇ／ｋｇ濃度處理４ ｄ時(shí)出現(xiàn)的新條帶反映的可能是此種細(xì)菌，隨著土壤中對二氯苯的揮發(fā)，原來３６０ ｍｇ／ｋｇ濃度降低至該種細(xì)菌能適應(yīng)的濃度。２．２ 對二氯苯處理１８ ｄ土壤細(xì)菌群落總ｄｎａ的ｄｇｇｅ分析圖３為不同濃度對二氯苯處理１８ ｄ土壤中細(xì)菌群落ｄｇｇｅ分析結(jié)果。隨著土壤中對二氯苯濃度的增加，土壤中細(xì)菌群落基因多樣性受到的影響也逐漸增強(qiáng)，到土壤對二氯苯濃度為２４０ ｍｇ／ｋｇ時(shí)，整個(gè)泳道條帶出現(xiàn)明顯差別。而３６０ ｍｇ／ｋｇ時(shí)，某些微生物對較高對二氯苯脅迫較為敏感，數(shù)量大大降低，達(dá)到ｄｇｇｅ分辨率下限。與對照相比，低濃度對二氯苯脅迫下條帶變化不大，但其中條帶ａ、ｂ亮度變暗消失，條帶ｃ、ｄ亮度增加。２ 結(jié)果與分析２．１ 對二氯苯處理４ ｄ后濕地土壤細(xì)菌群落總ｄｎａ的ｄｇｇｅ分析圖１為不同濃度對二氯苯處理土壤４ ｄ后土壤細(xì)菌群落ｄｇｇｅ分析結(jié)果。將凝膠置于中止液（０．５ ｍｏｌ／ｌ ｅｄｔａ－ｎａ２）中浸泡１０ ｍｉｎ，再用去離子水浸洗凝膠３次，取出凝膠豎起控水［９］。利用ｄｇｇｅ－１ｂ型電泳系統(tǒng)，在６０ ℃、１５０ ｖ、１ｔａｅ ｂｕｆｆｅｒ下電泳３３０ ｍｉｎ。用于１６ｓ ｒｄｎａ的ｐｃｒ擴(kuò)增反應(yīng)的引物序列為：３３８ｆ（ｃｃｔａｃｇｇｇａｇｇｃａｇｃａｇ）和５１８ｒ（ａｔｔａｃｃｇｃｇｇｃｔｇｃｔｇｇ）。ｐｃｒ反應(yīng)在ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ ａｇ公司的２２３３１型ｐｃｒ儀上進(jìn)行。１．４ ｐｃｒ擴(kuò)增擴(kuò)增反應(yīng)體系：１０ｐｃｒ緩沖液５ μｌ，ｍｇｃｌ２（２５ ｍｍｏｌ／ｌ） ４ μｌ，ｄｎｔｐ ２ μｌ，上下游引物各１．５ μｌ，模板ｄｎａ １ μｌ，ｔａｑ酶
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