對(duì)二氯苯對(duì)濕地土壤細(xì)菌群落多樣性的影響畢業(yè)論文-wenkub
2023-07-03 08:03:07 本頁面
【正文】 ｔｅｒｉａ differed ａｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｒｅａｔｉｎｇ ｔｉｍｅ． ｉｎ ｅａｒｌｙ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｐｅｒｉｏｄ， ｓｏｉｌ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ ｗａｓ ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ． ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ａｍｏｎｇ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ ｉｎ ｌａｔｅｒ ｐｅｒｉｏｄ ｗａｓ ｌｉｔｔｌｅ． ｉｎ ｅａｒｌｙ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｐｅｒｉｏｄ， ａ ｎｅｗ ｍｅｄｉｕｍ ｂａｎｄ ｅｍｅｒｇｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉｕｍ ｏｆ ２４０ ｍｇ／ｋｇ ｏｆ 1，4－ｄｉｃｈｌｏｒｏｂｅｎｚｅｎｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ， indicating ｔｈａｔ ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ｓｐｅｃｉａｌ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｓｐｅｃｉｅｓ resistant to 1，4－ｄｉｃｈｌｏｒｏｂｅｎｚｅｎｅ ｅｘｉｓｔｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｓｏｉｌ．ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｄｇｇｅ； １，４－ｄｉｃｈｌｏｒｏｂｅｎｚｅｎｅ； ｗｅｔｌａｎｄ ｓｏｉｌ ｂａｃｔｅｒｉａ ｃｏｍｍｕｎｉｔｉｅｓ； ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ土壤微生物在土壤生態(tài)中扮演了重要角色［１］，并且參與地球生物生態(tài)系統(tǒng)的化學(xué)循環(huán)，進(jìn)行污染物質(zhì)的降解［２，３］。通過不同培養(yǎng)時(shí)間（４、１８和４５ ｄ）和不同培養(yǎng)濃度（１２０、２４０、３６０和６００ ｍｇ／ｋｇ）對(duì)二氯苯污染下濕地土壤細(xì)菌群落基因組的變性梯度凝膠電泳（ｄｇｇｅ）多樣性分析。結(jié)果表明，各處理下的土壤細(xì)菌群落多樣性在不同處理時(shí)間有明顯差異。但是由于土壤微生物個(gè)體微小、數(shù)量眾多、土壤環(huán)境條件復(fù)雜等原因，用常規(guī)的分離培養(yǎng)法很難全面有效地評(píng)估土壤中微生物群體多樣性及環(huán)境污染對(duì)土壤微生物的影響，極大地限制了人們對(duì)土壤微生物的認(rèn)識(shí)［４］。１ 材料與方法１．１ 供試土壤供試土壤取自鹽城海濱濕地土壤，無人為污染。培養(yǎng)過程中不斷補(bǔ)水，保證水位高于土壤１～２ ｃｍ。１．４ ｐｃｒ擴(kuò)增擴(kuò)增反應(yīng)體系：１０ｐｃｒ緩沖液５ μｌ，ｍｇｃｌ２（２５ ｍｍｏｌ／ｌ） ４ μｌ，ｄｎｔｐ ２ μｌ，上下游引物各１．５ μｌ，模板ｄｎａ １ μｌ，ｔａｑ酶 （１０ ０００ ｕ／ｍｌ） ０．５ μｌ，加去離子水至50 μｌ。用于１６ｓ ｒｄｎａ的ｐｃｒ擴(kuò)增反應(yīng)的引物序列為：３３８ｆ（ｃｃｔａｃｇｇｇａｇｇｃａｇｃａｇ）和５１８ｒ（ａｔｔａｃｃｇｃｇｇｃｔｇｃｔｇｇ）。將凝膠置于中止液（０．５ ｍｏｌ／ｌ ｅｄｔａ－ｎａ２）中浸泡１０ ｍｉｎ，再用去離子水浸洗凝膠３次，取出凝膠豎起控水［９］。與對(duì)照相比，低濃度對(duì)二氯苯脅迫下條帶變化不大，但其中條帶ａ、ｂ亮度變暗消失，條帶ｃ、ｄ亮度增加。隨著土壤中對(duì)二氯苯濃度的增加，土壤中細(xì)菌群落基因多樣性受到的影響也逐漸增強(qiáng)，到土壤對(duì)二氯苯濃度為２４０ ｍｇ／ｋｇ時(shí)，整個(gè)泳道條帶出現(xiàn)明顯差別。第３和第４泳道上出現(xiàn)的條帶ｃ則表明在２４０ ｍｇ／ｋｇ和３６０ ｍｇ／ｋｇ濃度下有適應(yīng)該濃度的細(xì)菌，在２４０ ｍｇ／ｋｇ濃度處理４ ｄ時(shí)出現(xiàn)的新條帶反映的可能是此種細(xì)菌，隨著土壤中對(duì)二氯苯的揮發(fā)，原來３６０
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