造血干細(xì)胞的發(fā)育調(diào)控(參考版)
2025-05-29 22:00本頁面
【正文】 （ 8） 觀察結(jié)果。 （ 7） 于 5% CO飽和濕度及 37℃ 溫箱內(nèi)孵育。 （ 5） 待支持物降至 40℃ 左右，加入培養(yǎng)體系并混勻。 （ 3） 將配制的培養(yǎng)體系在 37℃ 水浴 中 保溫 10min。 一、造血干／祖細(xì)胞體外培養(yǎng)的基本條件 （一） 細(xì)胞培養(yǎng) 室條件 （二）培養(yǎng)的支持物 （三）營養(yǎng)液 （四）細(xì)胞因子 （五）血清 二、造血干／祖細(xì)胞體外培養(yǎng) （一） 造血祖細(xì)胞 集落 培養(yǎng)： （ 1） 分離培養(yǎng)細(xì)胞，制成單個核細(xì)胞懸液。 ? 體外造血祖細(xì)胞培養(yǎng)就是在體外模擬體內(nèi)的生理環(huán)境，將從機(jī)體中分離出的造血祖細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，使之生存、增殖分化。抑癌基因編碼產(chǎn)物通常為細(xì)胞增殖負(fù)調(diào)節(jié)因子，抑制細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)終末分化、維持基因穩(wěn)定、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡等。 （ 四 ） 造血基因調(diào)控 ? 原癌基因的編碼產(chǎn)物可為：細(xì)胞因子、細(xì)胞因子受體、細(xì)胞內(nèi)蛋白激酶、細(xì)胞內(nèi)信號傳遞分子及轉(zhuǎn)錄因子等。 2． FLT3配基 (FLT3 ligand, FL) ? 誘導(dǎo)處于靜止期的造血干／祖細(xì)胞進(jìn)人細(xì)胞周期，促進(jìn)其擴(kuò)增。 （二）白細(xì)胞介素 （ interleukin, IL) ? 白細(xì)胞介素主要是白細(xì)胞產(chǎn)生的信號分子，不僅在免疫系統(tǒng)中傳遞信息，同時也參與造血系統(tǒng)的造血調(diào)控。 （ multiCSF） 促進(jìn)多系集落生長。 －巨噬細(xì)胞集落刺激因子 (GMCSF) 除了促進(jìn)中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞祖細(xì)胞增殖、分化 成熟外，對成熟細(xì)胞也產(chǎn)生作用。 （一） 集落刺激因子類 ( colonystimulating factors, CSFs ) 主要有以下幾種： （ erythropoietin， EPO） 刺激紅系祖細(xì)胞的增殖和分化，以提高紅細(xì)胞數(shù)量。 其中細(xì)胞因子的調(diào)控占重要地位。 紅細(xì)胞爆式集落形成單位 （ BFUE） 紅細(xì)胞的祖細(xì)胞體外培養(yǎng) 紅細(xì)胞集落形成單位 (CFUE) （三）造血干／祖細(xì)胞的臨床應(yīng)用 造血干／祖細(xì)胞移植主要應(yīng)用于： ，如急、慢性白血病等 ； ，如再生障礙性貧血、異常血紅蛋白病、 Fanconi貧血、難治性貧血等； ，如乳腺癌、卵巢癌、神經(jīng)母細(xì)胞瘤等； ，如重癥聯(lián)合免疫缺陷癥、自身免疫性疾病、基因治療等。 多向祖細(xì)胞可進(jìn)一步分化 為單向祖細(xì)胞。 ? 造血祖細(xì)胞是一類由造血干細(xì)胞分化而來，但失去自我更新能力的過渡性、增殖性的細(xì)胞群，過去稱為 定向干細(xì)胞 。 （ 3） 造血干細(xì)胞的表面標(biāo)記 的流式細(xì)胞儀檢測 ? CD34+ 細(xì)胞具有長期重建造血的能力； ? CD34+ CD38—細(xì)胞比 CD34+ 細(xì)胞具有更強(qiáng)的長期造血能力； ? AC 133+細(xì)胞也被認(rèn)為是早期造血細(xì)胞的標(biāo)志。 （ 2）單克隆抗體法 ? 利用 FACS自動細(xì)胞分選系統(tǒng)分選出 CD34+CD38+及CD34+CD38—亞群細(xì)胞 ，在無血清體系中加入各種細(xì)胞因子（如 SCF、 IL IL GMCSF及 Epo）刺激，結(jié)果表明， CD34+ CD38—單個細(xì)胞可形成原代集落，并可向紅系、粒系、巨噬系、巨核系等 細(xì)胞分化。 （ 1）脾集落測試法 ? 1961年 Till等首先
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