大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備和轉(zhuǎn)化(參考版)
2025-05-29 06:24本頁面
【正文】 ％10???baC％％（％）＋100??babC％(100???mbaT％％％％％％％％％％％％(100???mbaT） 。式中 a與 b的比例很重要。 C是與 T有關(guān)的交聯(lián)百分濃度。 保護(hù)實(shí)驗(yàn)儀器，不得損壞。 丙烯酰胺是神經(jīng)毒劑，可以透過皮膚 不要接觸皮膚，戴手套、口罩操作 分子生物學(xué) 2022 實(shí)驗(yàn) 沒有聚合的丙烯酰胺不要傾倒到水源附近 一定要催化充分，使之完全聚合 集中處理，實(shí)驗(yàn)中全部的膠由專門受過訓(xùn)練的人收集到一起，在一個(gè)特殊標(biāo)明的容器中保存，并進(jìn)一步催化使之反應(yīng)完全，最后送交學(xué)校危險(xiǎn)品倉庫，統(tǒng)一處理。 = 蛋 白 樣 品 距 加 樣 端 遷 移 距 離 （ c m ）溴 酚 藍(lán) 區(qū) 帶 中 心 距 加 樣 端 距 離 （ c m ） 相 對 遷 移 率分子生物學(xué) 2022 實(shí)驗(yàn) 六 .思考題 在不連續(xù)體系 SDSPAGE中 ,當(dāng)分離膠加完后 ,需在其上加一層水 ,為什么 ? 樣品溶解液中各種試劑的作用是什么 ? 在不連續(xù)體系 SDSPAGE中 ,分離膠與濃縮膠中均含有 TEMED和 AP,試述其作用 ? 分子生物學(xué) 2022 實(shí)驗(yàn) 注意事項(xiàng) 丙烯酰胺具有中等毒性。 ※ 剝膠時(shí)要小心 ,保持膠完好無損 ,染色要充分 . . 。 與 染色 ：電泳結(jié)束后，撬開玻璃板，將凝膠板做好標(biāo)記后放在大培養(yǎng)皿內(nèi)，加入染色液，染色 1小時(shí)左右。 ,加樣前 ,樣品在 沸水中加熱 3分鐘，去掉亞穩(wěn)態(tài)聚合。l和 3181。l樣品溶液，再加入 10181。l。l標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶解液于 EP管內(nèi)，再加入 10181。 l 各部分凝膠配制 分子生物學(xué) 2022 實(shí)驗(yàn) 四 . 實(shí)驗(yàn)過程 , 準(zhǔn)備 2個(gè)干凈的錐形瓶 . . ※ 固定玻璃板時(shí)，兩邊用力一定要均勻，防止夾壞玻璃板 . ,用移液管快速加入 ,大約 5厘米左右 ,之后加少許蒸餾水 ,靜置 40分鐘 . ※ 凝膠配制過程要迅速 , 催化劑 TEMED要在注膠前再加入 ,否則凝結(jié)無法注膠 .注膠過程最好一次性完成 ,避免產(chǎn)生氣泡 . 分子生物學(xué) 2022 實(shí)驗(yàn) ※ 水封的目的是為了使分離膠上延平直，并隔絕空氣 ※ 凝膠聚合好的標(biāo)志是膠與水層之間形成清晰的界面 . ,按比例配好濃縮膠 ,連續(xù)平穩(wěn)加入濃縮膠至離邊緣 5m
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