【正文】 三．巴馬汀提取及延胡索乙素制備的方法巴馬汀為季銨生物堿，溶于水和極性大的有機(jī)溶劑（如甲醇 乙醇），所以可用甲醇，乙醇或水進(jìn)行分離。元胡索乙素的酸性硫酸鹽為無色針狀結(jié)晶，mp. 245～246度，在冷水中溶解度較小，在熱水中較大，其中性硫酸鹽為長(zhǎng)柱狀結(jié)晶，在水中溶解度較酸性硫酸鹽為長(zhǎng)柱狀結(jié)晶， 度，在水中溶解度較酸性硫酸鹽為大，其鹽酸鹽難溶于水。 1：154．偽非洲防己胺堿（Pseudocolumbamine）本品為具酸羥基的季銨偽原小檗堿型生物堿，額能溶于水，乙醇 甲醇 ，不溶于乙醚 苯等溶劑。 磷酸小檗堿 枸櫞酸小檗堿 1：125 1：30（酸性鹽1：100） 硫酸小檗堿 1：500 鹽酸小檗堿小檗堿的鹽類在水中的溶解度：，（dec），微溶于冷水，較易溶于沸水，其硝酸鹽及氫碘酸鹽，極難溶于水（冷水約為1：2000）。藥根堿 鹽酸鹽為銅色針狀結(jié)晶，～206度，其苦味酸鹽為呈黃色柱狀結(jié)晶，～220度（dec.），其分子式為C20H20O4N。掌葉防己堿鹽酸鹽即氯化巴馬?。≒almatine Chloride）。又謂再根莖 根及樹皮含小檗堿。 5．熟悉巴馬汀轉(zhuǎn)化為13－甲基巴馬汀的過程，認(rèn)識(shí)生物堿結(jié)構(gòu)改造的重要性。2．熟悉生物堿沉淀反應(yīng)的條件和方法3．掌握制備生物堿結(jié)晶性鹽的方法和精制4．掌握四氫巴馬汀的制備方法。黃藤層例入《本草綱目》，現(xiàn)代民間作為清熱消炎藥，常用于治療外傷感染，扁桃體炎，咽喉炎，結(jié)膜炎，熱痢及黃豆等。中 藥延胡索（元胡，Corydalis yanhusuo Wang）的塊根屬？？牡丹科紫堇屬植物，其主要鎮(zhèn)痛有效成分為去氫紫堇堿，氮其含量很少，為擴(kuò)大藥物資源，可用某些植物含其脫氫化合物巴馬汀較多的特 點(diǎn)，將其中的巴馬汀提取后，再經(jīng)氫化反應(yīng)，制備延胡索乙素，或經(jīng)化學(xué)結(jié)構(gòu)的改造，將巴馬汀轉(zhuǎn)化為13－甲基巴馬汀，以供臨床應(yīng)用。13－甲基巴馬汀（13－methylpalmatine）,又稱去氫紫？堿（dehydrocorydaline）,或去氫延胡索甲素，臨床可用于治療冠心病和胃潰瘍等癥。 掌葉防己堿的提取及其衍生物的制備掌葉防己堿，又稱巴馬?。≒almatine），硫酸延胡索乙素又稱消旋四氫巴馬汀硫酸鹽（dltelrahydropalmatine sulphate）.延胡索乙素（Coryadalis B）為鎮(zhèn)痛安定藥,用于緩解胃腸系統(tǒng)的疾病所引起的疼痛，臨產(chǎn)陣痛，頭痛，失眠等。（6） 記錄：TLC結(jié)果。／min（4） 收集：按色帶情況收集洗脫液。（3） 洗脫劑：環(huán)己烷／醋酸乙酯（99：1）（98：2）（97：3）。本實(shí)驗(yàn)采用離心層層析的技術(shù)進(jìn)行分離3％NaOH溶液或Na2CO3溶液噴后現(xiàn)紅色二．丹參色素的分離丹參色素多為橙色，紅色至棕紅色的化合物，少數(shù)為為黃色。合并相同，回收，純化，以TLC和mp檢查純度？計(jì)算回收率？（5） 檢測(cè)條件：TLC：石油醚（30～60度）：醋酸乙酯（9：1）PC：石油醚以水飽和顯色方法：（3） 取大黃酚 大黃素－6－甲醚的混合物15mg溶于1ml氯仿中，（先啟動(dòng)轉(zhuǎn)子），使樣品在轉(zhuǎn)子內(nèi)形成窄帶。操作步驟：（1） 常規(guī)方法于轉(zhuǎn)子上涂以1mm厚的硅膠GCMCNa（25～30g青島海洋化工廠生產(chǎn)的硅膠G加入80～％CMCNa水溶液，在乳缽 中調(diào)勻輾磨成漿糊狀）制備而成，陰干（約24小時(shí)）于70～90度的烘箱中活化2H，然后用1mm的刮板器修整轉(zhuǎn)子備用。但較費(fèi)時(shí)，使用洗脫劑量大。 離心薄層層析的應(yīng)用大黃素－6－甲醚（6） TLC檢查純度酸性氧化鋁板 （3～？級(jí)）苯／醋酸乙酯（6：1）碘蒸氣顯色用刀片切成段。（3） 苯／醋酸乙酯（6：1）展層至柱頂。 四．干柱層析法從華中五味子Schisandra sphenanthera wils 中分離五味子酯丁五味子酯丁（Schisantherin D）操作步驟：（1） 層析用酸性氧化鋁（120～200目，3～6級(jí)）240克，＊40cm的聚乙烯薄層膜柱中。 丙酮中重結(jié)晶 丙酮／甲醇中重結(jié)晶Hetisinone ~269度 254～258度 C20二萜生物堿 hetisine 和 hetisinone 的分離操作步驟：（1） VLC柱（15ml量垂熔漏斗）（2） 中性氧化鋁5克（3） 樣品：hetisine 16mg , hetisinone 16mg（4） 洗脫劑：甲苯／甲醇3～5％，甲苯／甲醇6～8％（5） 檢查：TLC ， mp，IR碘熏顯色Hetisine三．減壓柱層析（VLC）（Vacuum Liguid Chromatography）顯色劑——改良Drogendorff試劑對(duì)照品——粉防己甲素乙醇液（4） 檢出試劑：碘化鉍鉀試劑（5） 收集：每流份10ml量（6） 壓力：N2（2） 樣品：粉防己生物堿的粗品10mg，加適量CHCL3溶解，然后用少量硅膠拌合均勻，在紅外線燈下烘干，上柱。 。 mp。 0 .57 ，CHCL3）。吡啶－甲醇中結(jié)晶，~122度；丙酮中結(jié)晶，六面體粒狀結(jié)晶 mp134～136度；甲醇中結(jié)晶，～179度；乙醇中結(jié)晶，細(xì)棒狀，~242度。粉防己甲素不溶于 水，石油醚，易溶于乙醇 甲醇 丙酮 氯仿 和 苯中，也溶于稀酸水溶液。258～260度。263度（較）266度（分解），其苦味酸鹽MP。＋297度（C1,CHCL3）。2．粉防己甲素和粉防己乙素的分離：（1） 粉防己甲素?zé)o色針狀結(jié)晶，mp。 3％NaOH溶液或Na2CO3溶液噴后現(xiàn)紅色斑點(diǎn)。 氨熏顯紅色斑點(diǎn) 紫外分析燈下顯亮黃色斑點(diǎn) 大黃素－6－甲醚乙醇溶液。 對(duì)照品：大黃素 （6） 濃縮每流份至小體積。（4） 收集洗脫液：視色帶情況，收集每流份的量。（3） 洗脫劑：操作步驟：（1） 薄層層析用硅膠H10克，濕法裝柱。 Mp207度，能升華。 Na2CO3水溶液，難溶于石油醚。196 度，能升華。溶解度（g/100ml），（25度）。幾乎不溶于水，能溶于乙醇，可溶于Na2CO3 大黃素的分離大黃素（Emodin），橙黃色長(zhǎng)針晶（丙酮）mp。 1只二：低壓柱層析1．大黃酚 量筒 1只 小漏斗 1只 蒸發(fā)皿 小三角燒杯分別濃縮各餾份至小體積。按梯度 洗脫，先以二氯甲烷洗脫，用小三角瓶收集洗脫液，硅膠板上檢查內(nèi)酯成分出現(xiàn)時(shí)開始（用毛細(xì)血管滴下的洗脫液點(diǎn)在硅膠的薄層板上，用Kedde試劑檢出，加 熱后出現(xiàn)紫色斑點(diǎn)）收集第一流份，每流份收集10ml。將一濾紙片（直徑小于層析柱的內(nèi)徑，濾紙片打小孔，平鋪在樣品層上。可溶于甲醇，乙醇，丙酮，吡啶中，微溶于氯仿 乙醚 ，難溶于水及油醚。穿心蓮內(nèi)酯（Andrographolide C20H30O6 穿心蓮乙素），無色方形或長(zhǎng)方形結(jié)晶，熔點(diǎn)230～231度。以初步判斷所得化合物是什么化合物？2．穿心蓮中二萜內(nèi)酯化化合物（穿心蓮內(nèi)酯，新穿心蓮內(nèi)酯）的分離。已知或合物可作紅外吸收光譜圖與標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照證明。 氯仿：丙酮：甲醇：醋酸＝7：2：：， 顯色劑：25的三氯化鐵乙醇溶液顯色，按展層結(jié)果合并相同流份，常壓回收洗脫液至小體積，抽松后用乙醇為溶劑重結(jié)晶。然后將這些流份分別濃縮后點(diǎn)樣進(jìn)行薄層層析檢出，薄層層層析條件：硅膠CMC－Na薄層板。可加熱促使分解。當(dāng)檢出洗脫液至無肼的橙色斑點(diǎn)出現(xiàn)時(shí)改用氨性硝酸銀試劑檢出原兒茶酸。（5） 檢出：取硅膠CMCNa小板一塊如圖畫小格，用毛細(xì)管吸取各分洗脫液分別滴在各小格內(nèi)，然后用毛細(xì)管取檢出試劑* 滴在檢品處，觀察結(jié)果，另一格子只滴出試劑進(jìn)行空白對(duì)照。（先配50毫升，然后再酌量配）。（2） 樣品：5mg加洗脫劑5毫升加熱溶解后過濾，用吸管吸取濾液加入柱頂。原兒茶醛（Protocatechuic aldehyde實(shí)驗(yàn)五 柱層析的應(yīng)用常壓柱層析在中草藥化學(xué)成分分離上的應(yīng)用低壓柱層析在中草藥化學(xué)成分分離上的應(yīng)用減壓柱層析在中草藥化學(xué)成分分離上的應(yīng)用干柱柱層析在中草藥化學(xué)成分分離上的應(yīng)用一．常壓柱層析：1．四季青中酚性化合物（原兒茶酸，原兒茶醛）的分離原兒茶酸（Protocatechuic acid C7H6O4，3,4－二羥基苯甲酸）無色針晶，溶點(diǎn)198～200℃。： Na2HPO4 。： Na2HPO4 。［附］ PH緩沖液的配制：： Na2HPO4 。（3） 展開劑：氯仿（4） 顯色劑：改良碘化鉍鉀（5） 結(jié)果：記錄圖譜，并說明這些生物堿的堿度強(qiáng)弱。 Na2HPO4 ／升／升 ／升 ／升（二） 叔胺堿的分離：（1） 緩沖濾紙的制備：操作同上，配置五種不同的PH值的緩沖液。PH8：。PH3：。（3） 點(diǎn)樣：每隔2cm點(diǎn)樣。（2） 樣品：大黃素（Emodin） 大黃素甲醚（Physcion） 蘆薈大黃素（Aloeemodin） ＊ 苯氨－（用水飽和）中。 三．多緩沖液和堿性紙層析法 二．混合氨基酸的PC－阿膠水解液（1） 層析濾紙5*20cm一張，點(diǎn)樣同上。（3）展開劑：正丁醇－醋酸－水（4：1：1或4：1：5上層）（4） 顯色劑：鄰苯二甲酸－苯氨試劑*噴霧后于105℃加熱10分鐘。（2）樣品：％葡萄糖 (1). 層析濾紙按纖維長(zhǎng)絲方向(縱向)切成適當(dāng)大小的紙條,在一端2cm處用鉛筆劃一條線為起始線，在起始線上點(diǎn)樣，點(diǎn)間距1～。實(shí)驗(yàn)四 按面積歸一法，應(yīng).95％（3） 薄層層析法，按藥典規(guī)定