【正文】 。 此細(xì)胞圖像正在向小腦傳送信息，告訴它肌肉要怎么做 一個(gè)腦干神經(jīng)元（紅色）被來自其它神經(jīng)元的殘余信號(hào)（藍(lán)黃色）所包圍 大腦彩虹圖展示神經(jīng)活動(dòng) 美國(guó)哈佛大學(xué)分子與細(xì)胞生物學(xué)教授杰夫 大 腦 里 的 彩 虹 神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，像這些星細(xì)胞，重點(diǎn)照顧思考神經(jīng)元的身體，包括飲食和保護(hù)。 中國(guó)第一例轉(zhuǎn)基因猴子在昆明落地 ? 南方都市報(bào) 發(fā)布時(shí)間： 20221112 08:31 The head of a barley plant transformed with a gene for green fluorescent protein (GFP) using the gene gun. (The red head is untransformed。 我國(guó)首例熒光轉(zhuǎn)基因克隆豬產(chǎn)下熒光豬崽 2022年 1月 7日，東北農(nóng)業(yè)大學(xué)劉忠華教授主持的轉(zhuǎn)基因克隆豬課題獲得成功。 發(fā)熒光的雞 發(fā)紅光的貓 韓國(guó)科學(xué)家采用基因工程技術(shù)克隆的“熒光貓” 2022年登上世界各大媒體的頭條新聞。 1998年， Eduardo Kac通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出第一條可以發(fā)出綠色熒光的狗。1promoter, cyclinB1。s nucleus, posed of protein and RNA. 科學(xué)使用綠色熒光蛋白跟蹤大腦細(xì)胞的活動(dòng) 隨著病毒在宿主體內(nèi)不斷擴(kuò)散，通過跟蹤發(fā)出的綠光就可觀察病毒的擴(kuò)散途徑；或者把它接合到一種蛋白質(zhì)上并通過顯微鏡觀察它在細(xì)胞內(nèi)部的移動(dòng)。如介導(dǎo)糖皮質(zhì)激素受體（ hGR)遷移藥物的篩選模型的成功構(gòu)建。 Moller 等研究發(fā)現(xiàn) GFP 標(biāo)記的 P. putidaRI 細(xì)菌主要聚集在生物膜的表層，而 Aciobacter sp. C6 則附著在生物膜底層生長(zhǎng)。 Ikeno等分別以 GFP 和 Ps 作為報(bào)告基因和啟動(dòng)子，轉(zhuǎn)入 E. coli 重組子中，用以檢測(cè)水體中微量的苯衍生物。 Scott 等以 GFP 紅移突變體作為標(biāo)記基因 ,有效地追蹤了乳酸細(xì)菌在復(fù)雜厭氧系統(tǒng)中的運(yùn)移。 Bowyer 等在小麥病原菌中構(gòu)建了含異檸檬酸酶啟動(dòng)子的 GFP 基因，監(jiān)測(cè)到 T. yall undae 侵染小麥時(shí)的碳代謝過程。這和過去用熒光染色法觀察到的結(jié)果一致。 B2 protein of flock house virus) or a plant (right) viral suppressor, leading to enhanced GFP expression (lighter green/yellow areas). GFP用于植物 RNA沉默研究 ? 用于植物信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)研究 GFP結(jié)合熒光共振能量轉(zhuǎn)移 (FREP)為研究植物信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)也提供了新方法。 Aspuria等 (2022)將 GFP與受生長(zhǎng)素誘導(dǎo)的啟動(dòng)子重組后導(dǎo)入植物，用生長(zhǎng)素誘導(dǎo)后，通過觀察側(cè)根的分生組織中是否有 GFP的積累來證明生長(zhǎng)素的時(shí)空表達(dá)。 GFP在動(dòng)物學(xué)研究中的應(yīng)用 GFP在植物研究中的應(yīng)用 ? 作為報(bào)告基因用于轉(zhuǎn)基因植物研究 GFP作為新型報(bào)告基因用于植物的遺傳轉(zhuǎn)化，可以替代與篩選有關(guān)的抗生素或抗除草劑標(biāo)記基因，既優(yōu)化植物遺傳轉(zhuǎn)化過程，又使轉(zhuǎn)基因植物更安全。 ? GFP作為一種新型免疫標(biāo)記物 利用 GFP的發(fā)光特性使免疫反應(yīng)呈綠色熒光從而可以直接觀察，可望取代傳統(tǒng)的標(biāo)記技術(shù)，建立特異、靈敏、簡(jiǎn)便和快速的免疫診斷新方法。以 GFPS65T基因作為篩選標(biāo)記的新型克隆載體，以綠白斑篩選法篩選陽性重組子，替代 Lacz藍(lán)白斑篩選，不需 X一 gal。 藍(lán)色熒光蛋白 EBFP：增強(qiáng)藍(lán)色熒光蛋白； ECFP：增強(qiáng)藍(lán)綠色熒光蛋白 EGFP：增強(qiáng)綠色熒光蛋白； EYFP：增強(qiáng)黃色熒光蛋白 綠色熒光蛋白變異體的發(fā)色基團(tuán)結(jié)構(gòu) 基于 GFP的傳感器 一種被修飾過的用來感應(yīng)鋅離子濃度的藍(lán)色熒光蛋白：當(dāng)紅色的鋅離子連接到藍(lán)色的被修飾過的發(fā)色團(tuán)上后，蛋白質(zhì)會(huì)發(fā)出亮度增強(qiáng)一倍的熒光從而形成容易被檢測(cè)到的可見信號(hào)。 紅移熒光蛋白 雙突變體 Y66H/Y145F能在 381nm光的激發(fā)下產(chǎn)生 445nm的藍(lán)光，故稱 BFP。 增強(qiáng)型 GFP 將 wtGFP中的 Ser65用 Thr替代，得到突變體。 GFP的其他生化特性 GFP作為標(biāo)記蛋白的優(yōu)點(diǎn) ① 熒光穩(wěn)定 ② 檢測(cè)方便 ③ 無種屬特異性，也無有細(xì)胞種類和位置的限制 ④ GFP對(duì)受體細(xì)胞基本無毒害 ⑤ 易于構(gòu)建載體，不受假陽性干擾 ⑥ 不需任何反應(yīng)底物和輔助因子 ⑦ 可制成永久標(biāo)本 ⑧ 靈敏度高 GFP基因的改進(jìn) ? 更換 GFP生色團(tuán)氨基酸 ? 改變堿基組成 ? 除去 GFP基因中隱蔽剪接位點(diǎn) ? 插人植物內(nèi)含子 ? 更換強(qiáng)啟動(dòng)子等突變體 GFP ? 對(duì)密碼子進(jìn)行優(yōu)化修飾 ? 增加熒光強(qiáng)度和熱穩(wěn)定性，促進(jìn)了生色團(tuán)的折疊 Zolotukhin等（ 1996）改變了 wtGFP基因編碼區(qū)中 88個(gè)密碼子中的 92個(gè)堿基而用人類基因組中常用的密碼子代替，將 GFP的熒光強(qiáng)度提高 22倍，適合在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中高效表達(dá)。 ? 但因?yàn)?GFP不是酶，熒光信號(hào)沒有酶學(xué)放大效果，因此 GFP靈敏度可能低于某些酶類報(bào)告蛋白。目前，對(duì)于 GFP的作用機(jī)理較為認(rèn)同的僅僅是： GFP是生物發(fā)光過程中的能量受體，并且是最終的發(fā)光體，不同的生物發(fā)光機(jī)制各不相同，不同的突變體發(fā)光機(jī)制也有很大差異。 Chattoaj等對(duì) GFP進(jìn)行了光譜分析，結(jié)合前人工作提出， GF