熒光紅外酶標(biāo)儀ppt課件(參考版)
2025-05-31 01:23本頁(yè)面
【正文】 如食品中蛋白質(zhì)、脂肪水分的測(cè)量、化工原料的純度測(cè)量等 。 使用化學(xué)計(jì)量學(xué)、數(shù)學(xué)方法建立模型。 無損檢測(cè)、快速、樣品制備簡(jiǎn)單 。 近紅外光譜分析的應(yīng)用 漫反射測(cè)量固體和粉末樣品： 部分光線直接經(jīng)鏡面反射離開外，有部分在樣品內(nèi)經(jīng)反復(fù)的反射、吸收、衍射等過程重新從表面逸出，形成漫反射光。 常用的液體分散介質(zhì)： 液體石蠟油 (nd=)、六氯丁二烯 (nd=)、氟化煤油 這些液體分散介質(zhì)自身也有各自的吸收峰。減少了光散射現(xiàn)象。 常用于高分子有機(jī)化合物的測(cè)定。 ? 晶片局部發(fā)白，表示壓制的晶片厚薄不勻；晶片模糊，表示晶片吸潮，水在光譜圖 3450cm1和 1640cm1處有吸收峰。 油壓機(jī)壓力： 5~10 107Pa (5~10t/cm2)；加壓同時(shí)要抽去空氣。 可拆池：用于高沸點(diǎn)、粘稠型液體的測(cè)定 液膜厚度的選擇： 脂肪族碳?xì)浠衔? ~ 鹵化物、芳香族化合物 ~ 含氧、氮的有機(jī)物 ~ 含硅、氟的有機(jī)物 ~ (2) 溶液法 四）、固體樣品 1．壓片法 KCl、 KBr在加壓下呈現(xiàn)所謂冷脹現(xiàn)象并變?yōu)榭伤芪?，在中紅外光區(qū)完全透明，因此常用作固體樣品的稀釋劑。 液膜 mm以下時(shí)，可以借助窗片的附著力，使其自然形成液膜。主要起稀釋作用。 對(duì)于含量較低的氣體還可以采用 多重反射氣體池 進(jìn)行測(cè)定。 一）、試樣的前處理與提純 窗片 試樣氣體 氣泵 對(duì)于一些難提純的混合組分，也要盡可能地減少組分?jǐn)?shù)。 濾光型紅外光度計(jì)：大氣中有機(jī)物鹵代烴、光氣、氫氰酸、丙烯腈 非濾光型紅外光度計(jì)：?jiǎn)我唤M分如 CO、 CO2 三、 試樣的制備 試樣中的微量雜質(zhì) (~1%)可以不需要進(jìn)行處理，超過~1%，就需分離出去微量雜質(zhì)。 波譜區(qū) 近紅外光 中紅外光 遠(yuǎn)紅外光 波長(zhǎng) /?m ~ ~50 50~1000 波數(shù) / cm1 13333~4000 4000~200 200~10 躍遷類型 分子振動(dòng) 分子轉(zhuǎn)動(dòng) 近紅外光譜區(qū)： 1980S ?低能電子能級(jí)躍遷 ?含氫原子團(tuán)： OH、 NH、 CH伸縮振動(dòng)的倍頻吸收峰 ?稀土及過渡金屬離子配位化學(xué)的研究對(duì)象 ?適用于水、醇、高分子化合物、含氫原子團(tuán)化合物的定量分析 紅外吸收光譜法 ： 分子的振動(dòng)、轉(zhuǎn)動(dòng)基頻吸收光譜區(qū) 應(yīng)用最為廣泛的紅外光譜區(qū) 遠(yuǎn)紅外光譜區(qū) ： ?氣體分子的轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)躍遷 ?液體與固體中重原子的伸縮振動(dòng) ?晶體的晶格振動(dòng) ?某些變角振動(dòng)、骨架振動(dòng)異構(gòu)體的研究 ?金屬有機(jī)化合物、氫鍵、吸附現(xiàn)象研究 該光區(qū)能量弱 ,較少用于分析 3. 紅外光譜區(qū)的劃分（ ~1000?m） SWNIR:7501100nm； LWNIR:11002526nm 光源 單色器 吸收池 樣品 檢測(cè)器 數(shù)據(jù)處理和儀器控制 參比 切光器（斬波器） 檢測(cè)器 光源 單色器 吸收池 數(shù)據(jù)處理 儀器控制 1．組成結(jié)構(gòu)框圖 硅碳棒 一）、色散型紅外吸收光譜儀的基本組成 二、 紅外吸收光譜儀 與雙光束 UVVis儀器類似，但部件材料和順序不同。 分子中基團(tuán)的振動(dòng)和轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)躍遷產(chǎn)生的吸收光譜。 樣品受到 頻率連續(xù)變化的紅外光照射時(shí) ， 分子吸收其中一些頻率的輻射 ， 分子振動(dòng)或轉(zhuǎn)動(dòng)引起偶極矩的凈變化 ， 使振 轉(zhuǎn)能級(jí)從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài) ， 相應(yīng)于這些區(qū)域的透射光強(qiáng)減弱 ， 記錄百分透過率 T%對(duì) 波數(shù) 或 波長(zhǎng) 的曲線 ， 即 紅外光譜 。 1930年有人用群論和量子力學(xué)方法計(jì)算了許多簡(jiǎn)單分子的基頻和鍵力常數(shù)，發(fā)展了紅外光譜的理論研究。 這種 利用樣品對(duì)不同波長(zhǎng)紅外光的吸收程度研究物質(zhì)的分子組成和結(jié)構(gòu)的方法 ，稱為 紅外分子吸收光譜法 。而許多化學(xué)家則致力于研究各種物質(zhì)對(duì)各種不同波長(zhǎng)紅外光的吸收程度，用于推斷物質(zhì)分子的組成和結(jié)構(gòu)。 紅外光譜儀原理應(yīng)用及操作簡(jiǎn)介 一、概述 紅外光譜起源 1800年英國(guó)天文學(xué)家 Hershl用溫度計(jì)測(cè)量太陽光可見區(qū)內(nèi)外的溫度時(shí)，發(fā)現(xiàn)紅色光以外的黑暗部分溫度比可見光部分高，從而認(rèn)識(shí)到在可見光光波長(zhǎng)波方向末端還有一個(gè)紅外光區(qū)。 例 ：鎮(zhèn)靜劑利血平具有熒光，它還可氧化成具有更強(qiáng)烈熒光的產(chǎn)物再進(jìn)行分析。 例： 用熒光法研究氨基酸和蛋白質(zhì)。 較常測(cè)定的元素有： F、 S、 Fe、 Ag、 Co、 Ni、 Cu、 Mo、 W ? 熒光熄滅測(cè)定法 銅、鈹、鐵、鈷、鋨及過氧化氫采用催化熒光法測(cè)定； 鉻、鈮、鈾、碲采用低溫?zé)晒夥y(cè)定； 鈰、銪、銻、釩、鈾采用固體熒光法測(cè)定 芳香族化合物存在共軛的不飽和體系 ， 是有機(jī)化合物熒光測(cè)定的主要類型 。 四 . 熒光分析的應(yīng)用 1. 無機(jī)化合物 ? 直接熒光測(cè)定法 其中 ， 較常測(cè)定的元素有： Be、 Al、 B、 Ga、 Se、 Mg、Zn、 Cd與某些稀土元素；測(cè)定的靈敏度有些可以達(dá)到 1010。 2. 類型：?jiǎn)喂馐?、雙光束熒光分光光度計(jì)、低溫激光Shpol’skill熒光分光光度計(jì) 、配有壽命和
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