綠色銀光蛋白ppt課件(參考版)
2025-01-18 08:35本頁面
【正文】 用不同的“熒光蛋白”讓未知世界顯影 。利希曼利用熒光蛋白展現了大腦內的連接，圖片中美麗的“彩虹”就是神經系統(tǒng)網絡 1997年在大阪大學降生的第一種發(fā)光哺乳動物小老鼠 兩只熒光豬誕生于中國黑龍江省哈爾濱東北農業(yè)大學的實驗室 約克鎮(zhèn)科技公司生產的熒光魚引入市場，熒光蛋白便迅速在商業(yè)上得到應用 利用 GFP來發(fā)明生理傳感器：一種感應離子或酸堿度水平，然后通過發(fā)出特征性的熒光來報告結果的分子機器。 ? (3) 實驗中發(fā)現很難建成 GFP 穩(wěn)定細胞株 , 可能與 GFP 參與細胞凋亡過程有關。但GFP 在應用中還發(fā)現有許多問題亟待解決 : ? (1) 熒光信號強度的非線性性質使得定量非常困難 。 ? 1. 提高了 GFP的光譜性質， ? 2. 提高熒光強度 ? 3. 提高光穩(wěn)定性 ? 4. 顏色突變 ? 5. pH敏感的突變體 ? 到目前為止 , 改進熒光蛋白已有非常廣泛的應用 , 如轉染細胞的確定 , 體內基因表達的測定 , 蛋白質分子的定位和細胞間分子交流的動態(tài)監(jiān)測 , 免疫分析、核酸堿基探針分析 , 以及分子間第二信使鈣離子和 cAMP 水平的指示 , 細胞間隙 pH 變化的檢測 。 改進 GFP 的應用前景 藍色熒光蛋白、青色熒光蛋白，綠色熒光 蛋白 ，黃色熒光蛋白， 褐色。當在黃色熒光 GFP 中插入一個 Zif268 鋅指結構 , 可以得到傳導 Zn 2+ 的 GFP , 結果發(fā)現熒光少量增加 , 為改變前的 倍 , K d 值約 0. 4mmol。 ? GFP 的結構雖然具有高度完整性 , 但是實驗中發(fā)現 , 在 GFP 中某些確定的位置 , 插入外源基因 , 完全沒有喪失其熒光性。當 cAMP 濃度很低時 , 兩個熒光分子距離很近 , 并出現 FRET , 如果增加 cAMP 濃度 , 發(fā)生 FRET 的可能性急劇下降。 ? 最近 , 有學者用 GFP 依賴的生物傳感器測量活細胞內生化動力學 , 通過利用帶有 GFP 標記的蛋白激酶 A 轉染細胞 , 觀測有關 cAMP 的動態(tài)熒光變化 。結果發(fā)現 , 當 Ca 2+ 結合到 CaM 上 , 出現分子間異源二聚體 , 兩個 GFP 足夠接近而產生 FRET
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