人工種子與脫毒ppt課件(參考版)
2025-05-08 22:36本頁(yè)面
【正文】 。 抗原：病毒。將病毒給動(dòng)物注射后產(chǎn)生抗體。 分為 2種 ①汁液感染法 ②嫁接檢測(cè)法 利用嫁接法接種，把待測(cè)的植物接種在敏感植物上，然后視其有無(wú)病斑，來(lái)判斷是否脫除了病毒。 通常不同病毒應(yīng)選用不同的植物。但有些病毒表現(xiàn)不明顯，僅靠這一方法還不夠。 常用的鑒定法有直接測(cè)定法、指示植物法、抗血清鑒定法和電子顯微鏡檢查法等 。只有病毒顯示持續(xù)陰性反應(yīng)的無(wú)病毒植株，才能進(jìn)一步擴(kuò)大繁殖。因此，每一莖尖分化產(chǎn)生的植株，在作為母本生產(chǎn)無(wú)病毒原種以前，必須進(jìn)行特定病毒鑒定。 5）花藥培養(yǎng)脫毒 ? 花藥培養(yǎng)實(shí)際上是單倍體培養(yǎng)，由此獲得單倍體植株，再通過(guò)染色體加倍獲得無(wú)病毒植株 。但珠心胚 大多是不育的，必須分離培養(yǎng)才能發(fā)育成正常的幼苗。 4）珠心培養(yǎng)法脫毒 ? 柑橘類(lèi)多胚品種中除了一個(gè)受精胚以外，尚有多個(gè)由珠心細(xì)胞形成的無(wú)性胚，稱(chēng)為珠心胚。 愈傷組織的某些細(xì)胞不帶病毒原因： 病毒的復(fù)制速度趕不上細(xì)胞的增殖速度； 有些細(xì)胞通過(guò)突變獲得了抗病毒的抗性。 3）愈傷組織培養(yǎng)脫毒 愈傷組織細(xì)胞帶病原菌不均一，部分細(xì)胞不帶病毒，由這些細(xì)胞再生的植株是無(wú)病毒的。然后將試管苗熱處理，再取莖尖培養(yǎng)獲得脫毒苗。 熱處理后取較大莖尖培養(yǎng)獲得脫毒苗。否則采用適當(dāng)?shù)奶幚?，打破休眠才能進(jìn)行。 ③ 外植體的生理狀態(tài) 莖尖最好要由 活躍生長(zhǎng) 的芽上切取。除了外植體的大小之外， 葉原基的存在 與否也影響分生組織形成植株的能力，一般認(rèn)為，葉原基能向分生組織提供生長(zhǎng)和分化所必需的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素。 （ 4）影響微莖尖成活及脫毒的因素 首先是母體材料病毒侵染程度 被單一病毒感染的植株脫毒較容易，復(fù)合感染的較難。 莖尖培養(yǎng)的繼代培養(yǎng)和生根培養(yǎng)和一般器官的培養(yǎng)相同。由于在低溫和短日照下，莖尖有可能進(jìn)入休眠；所以 較高的溫度和充足的日照時(shí)間必須保證 。 將接種的莖尖置于 22℃ 左右溫度下。 The Apical Meristem 剝?nèi)∏o尖過(guò)程 : 解剖鏡 下用解剖針將葉片剝掉， 解剖針要常消毒 。 消毒：葉片包被嚴(yán)緊的芽，如菊花、蘭花，只須 75%酒精中浸蘸一下，而葉片包被松散的芽，如香石竹、馬鈴薯等，則要用 %次氯酸鈉表面消毒 10min。 （ 3）莖尖的培養(yǎng)方法 需要一臺(tái) 解剖鏡 （ 840倍）。 在雙子葉植物中，激素可能在第 2對(duì)葉原基中合成，所以莖尖的圓錐組織生長(zhǎng)激素不能自給，必須加入生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素，濃度要合適。 分生組織不帶病毒 ，可能有 4方面的 原因 ： （ 2）培養(yǎng)基 一般以 White、 MS為基本培養(yǎng)基，提高鉀鹽和銨鹽含量有利于莖尖生長(zhǎng)。 植物細(xì)胞分裂和病毒繁殖之間存在相互競(jìng)爭(zhēng) 莖尖中存在 高水平內(nèi)源激素 ，可抑制病毒的增殖。 植物的去病毒技術(shù) ，實(shí)質(zhì)上就是采取不含病毒顆?；虿《绢w粒含量甚少的 ～ 帶 1～ 2個(gè)葉原基的莖尖 作為外植體，進(jìn)行微繁殖，使其培養(yǎng)成完整的無(wú)病毒小植株的技術(shù)。將感染了馬鈴薯 Y型病毒（ PVY）、黃瓜花葉?。?CMV)或煙草花葉病毒（ TMV）的葉柄，培養(yǎng)在三氮唑核苷的 MS培養(yǎng)基上，子代植株則除去病毒，而對(duì)照則無(wú)效，說(shuō)明三氮唑核苷抑制病毒的增殖。一些化學(xué)藥品如嘌呤和嘧啶；類(lèi)似物、氨基酸、抗生素處理，可在某種程度上抑制植物體內(nèi)或離體葉
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