【正文】 莖段）培養(yǎng)獲得無菌苗。無病毒植株容易再被感染，因此在繁殖的不同時期仍需重復(fù)進行鑒定。 抗體：是指生物體在外來抗原的刺激下產(chǎn)生的一種免疫球蛋白，主要存在于血清中，含抗體的血清稱為抗血清。 脫毒植物的鑒定 利用生長點培養(yǎng)無毒苗的成苗率和脫毒率都非常低，有時無毒株只占千分之幾。 取芽的時間也很重要，一般選 萌動期 較好。 剝離莖尖要 迅速 并盡快接種，或在一個襯有無菌濕濾紙的培養(yǎng)皿內(nèi)進行操作， 以防莖尖變干 。如：葡萄置于 38 ℃ 可去除扇葉病毒。 ? 人工種子繁殖體包括體細胞胚、微型器官和微芽，根據(jù)植物種類不同可適當選擇。 ? 內(nèi)種皮常用材料： 聚氧乙烯、海藻酸鈉、明膠、瓊脂等。 ?2） 在人工種子制作中 ， 可加入營養(yǎng)物質(zhì) 、 植物生長調(diào)節(jié)劑 、 固氮菌 、 殺蟲劑等 ?？茖W(xué)家把體細胞胚包埋在膠囊內(nèi)形成球狀結(jié)構(gòu)，使其具備種子機能。實際操作中，一般在試管中誘導(dǎo)出愈傷組織，并在含生長素的培養(yǎng)液中懸浮培養(yǎng)，然后置于含生長素的發(fā)酵罐中，使細胞迅速擴增，再將細胞移入無生長素的發(fā)酵罐中誘導(dǎo)出大量胚狀體。種子硬度由凝膠濃度與絡(luò)合物離子交換時間決定。 物理方法 —— 熱處理脫毒 依據(jù) 病毒對高溫的敏感，寄主耐高溫 。 植物細胞分裂和病毒繁殖之間存在相互競爭 莖尖中存在 高水平內(nèi)源激素 ，可抑制病毒的增殖。 莖尖培養(yǎng)的繼代培養(yǎng)和生根培養(yǎng)和一般器官的培養(yǎng)相同。 愈傷組織的某些細胞不帶病毒原因： 病毒的復(fù)制速度趕不上細胞的增殖速度； 有些細胞通過突變獲得了抗病毒的抗性。 通常不同病毒應(yīng)選用不同的植物。 分為 2種 ①汁液感染法 ②嫁接檢測法 利用嫁接法接種，把待測的植物接種在敏感植物上，然后視其有無病斑，來判斷是否脫除了病毒。 4）珠心培養(yǎng)法脫毒 ? 柑橘類多胚品種中除了一個受精胚以外，尚有多個由珠心細胞形成的無性胚，稱為珠心胚。 （ 4）影響微莖尖成活及脫毒的因素 首先是母體材料病毒侵染程度 被單一病毒感染的植株脫毒較容易，復(fù)合感染的較難。 分生組織不帶病毒 ，可能有 4方面的 原因 ： （ 2）培養(yǎng)基 一般以 White、 MS為基本培養(yǎng)基，提高鉀鹽和銨鹽含量有利于莖尖生長。 熱處理區(qū) 低溫 高溫 生長區(qū) 寄主無損傷 病原微生物被消除 寄主被殺死 B A C 2）熱處理脫毒方法 (1) 溫湯浸漬處理 適用于 休眠器官 ，在 50℃ 左右的溫水中浸漬 10min至數(shù)小時，方法簡便易行，但易使材料受傷。 ? 解決措施 ： ? 胚乳中添加防腐劑、抗生素、控制糖含量、低溫貯藏，種皮外包裹滑石粉、液體石蠟等成分。只有同步化了細胞才可能成批地產(chǎn)出成熟胚胎。 ※ 人工種子的概念 ? 人工種子（ artificial seeds)又稱合成種子（ synthetic seeds)或體細胞種子（ somatic seeds)。他認為隨著組織培養(yǎng)技術(shù)的不斷發(fā)展，可以用少量的外植體同步培養(yǎng)出眾多的胚狀體，這些胚狀體被包埋在某種膠囊內(nèi)使其具有種子的功能，可以直接用于田間播種。其中過濾篩選法較實用、快速。 ? 如何進行大量制種和大田播種，實現(xiàn)機械化操作等方面配套技術(shù)尚需進一步研究。處理時間因植物而異，短則幾十分鐘，長可達數(shù)月。在生長素中應(yīng)避免用易促進愈傷組織化的 2， 4D，宜用 NAA或 IBA；細胞分