人工種子與脫毒ppt課件-閱讀頁
2025-05-20 22:36本頁面
【正文】 病毒的移動 的 2條途徑：維管系統(tǒng)和胞間連絲。 在植物體內存在有一種“ 病毒鈍化系統(tǒng) ”，在分生組織中的活性最高，因而使分生組織不受侵染。 MS培養(yǎng)某些植物莖尖時，有些離子濃度過高應稀釋。在生長素中應避免用易促進愈傷組織化的 2， 4D，宜用 NAA或 IBA；細胞分裂素用 KT或 BA； GA3對某些植物莖尖培養(yǎng)有用。 剝離莖尖要 迅速 并盡快接種，或在一個襯有無菌濕濾紙的培養(yǎng)皿內進行操作， 以防莖尖變干 。 莖尖長（ｍｍ） 葉原基數(shù) 小植株數(shù) 脫毒植株數(shù) 脫毒率（％） 1 50 24 48 2 42 18 4 64 0 0 離體莖尖大小對馬鈴薯脫毒效果的影響 切取莖尖越小脫毒效果越好，但太小不易成活，過大又不能保證完全出去病毒，所以 莖尖大小要合適。當一個半圓球的頂端分生組織充分暴露出來之后，用解剖刀片將帶 12個葉原基 的分生組織切下，接到培養(yǎng)基上。 20223000lx 16h/d 光照下培養(yǎng)。微莖尖需數(shù)月才能成功。 莖尖培養(yǎng)脫毒，由于其脫毒效果好，后代穩(wěn)定，所以是目前培育無病毒苗最廣泛和最重要的一個途徑。 ① 外植體大小 在最適培養(yǎng)條件下， 外植體的大小 決定莖尖的存活率，外植體越大，產生再生植株的機會也就越多。 ② 培養(yǎng)條件 在莖尖培養(yǎng)中， 光下培養(yǎng) 的效果通常比暗培養(yǎng)效果好，如馬鈴薯莖尖培養(yǎng)時，當莖已長到 1cm高時，光照強度便增加到 4000 lx。 取芽的時間也很重要，一般選 萌動期 較好。 莖尖與熱處理相結合方法 能克服單獨莖尖培養(yǎng)時，莖尖過小成活率太低，莖尖太大又脫除不掉病毒的缺點。 取莖尖（或莖段）培養(yǎng)獲得無菌苗。 2）莖尖微體嫁接 木本植物 莖尖培養(yǎng)難以生根成植株，將實生苗砧木在人工培養(yǎng)基上種植培育，再從成年無病樹枝上切取 ，在砧木上進行試管微體嫁接，以獲得無病毒幼苗。多次繼代的愈傷組織中病毒含量下降，甚至檢測不出病毒。 愈傷組織脫毒的缺陷是植株遺傳性不穩(wěn)定，可能會產生變異植株。珠心胚與維管束系統(tǒng)無聯(lián)系，因此由珠心胚產生的植株全部均無病毒。珠心胚培養(yǎng)技術對除去柑橘主要病毒，如引起銀屑病、葉脈突出病、柑橘裂皮病、柑橘速衰病等的病毒，都十分有效。 脫毒植物的鑒定 利用生長點培養(yǎng)無毒苗的成苗率和脫毒率都非常低，有時無毒株只占千分之幾。由于在培養(yǎng)的植株中許多病毒具有延遲的恢復期，所以在最初 18個月中每隔一定時間仍需進行鑒定。無病毒植株容易再被感染，因此在繁殖的不同時期仍需重復進行鑒定。 外觀判斷法 —— 直接檢測法 指示植物法 抗血清鑒定法 電子顯微鏡檢查法 酶聯(lián)免疫鑒定法 (ELISA) 分子生物學方法 外觀判斷法： 帶病毒株往往葉片發(fā)黃，凹凸不平，畸形，可根據(jù)這些表現(xiàn)來判斷。 指示植物檢測法： 指示植物又稱鑒別寄主，指的是對某種或某些特定病毒非常敏感，而且癥狀表現(xiàn)十分明顯的植物。馬鈴薯病毒常用指示植物有千日紅、曼陀羅、豇豆、辣椒等。 指示植物 接穗 嫁接后的植物 抗血清鑒定法（抗原－抗體反應） 原理：由于病毒是由蛋白質和核酸組成的，是一種較好的抗原?？乖涂贵w結合產生血清反應。 抗體：是指生物體在外來抗原的刺激下產生的一種免疫球蛋白，主要存在于血清中，含抗體的血清稱為抗
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