植物的脫毒技術(shù)ppt課件(參考版)
2025-01-16 20:02本頁面
【正文】 本章小結(jié) ? 5．無毒苗的鑒定方法主要有： ? （ 1）指示植物鑒定法； ? （ 2）抗血清鑒定法； ? （ 3）電子顯微鏡檢查法； ? （ 4）酶聯(lián)免疫鑒定法，是目前比較精確和常用的鑒定方法。 本章小結(jié) ? 4．病毒主要分布于植物體成熟和衰老的組織及器官中，靠維管束傳播。 本章小結(jié) ? 3. 單一的脫毒處理技術(shù)或難以完全脫除病毒，或需要較長的時(shí)間， 2種或 3種脫毒技術(shù)的組合使用逐漸成為生產(chǎn)無毒種苗的首選。 ? 2．熱處理法去除植物病毒可分為溫湯浸漬處理法和熱處理法。 本章小結(jié) ? 1．去除植物病毒的方法有熱處理法、微莖尖培養(yǎng)法、愈傷組織培養(yǎng)法和莖尖微體嫁接法。而在種植時(shí)間長、輪作及種植規(guī)模大的產(chǎn)地則在短期內(nèi)就可感染。 生產(chǎn)場所應(yīng)隔離病毒感染途徑， 做好土壤消毒或防蚜等工作。另一種更便宜的方法，是把由莖尖得到的并已經(jīng)過脫毒檢驗(yàn)的植物通過離體培養(yǎng)進(jìn)行繁殖和保存。栽培用的土壤也應(yīng)進(jìn)行消毒，周圍環(huán)境也要整潔，并及時(shí)噴施農(nóng)藥防治蟲害，以保證植物材料在與病毒嚴(yán)密隔離的條件下栽培。這些原原種或原種材料保管得好可以保存利用 5～ 10年。 ? 侵染百合的病毒電鏡圖 六、無病毒植物的保存和利用 ? 無病毒苗的保存繁殖 ? （ 1）無病毒植株并不是有額外的抗病性，它們有可能很快又被重新感染。由于這些特征相當(dāng)穩(wěn)定， 故對病毒鑒定是很重要的。特點(diǎn)：特異性高；測定速度快；靈敏度高；可定量。 ? 原理：是采用酶標(biāo)記抗原或抗體的定量測定法。 五、脫毒苗的鑒定 ? 酶聯(lián)免疫吸附法 (ELISA)： ? 1997年 Clark和 Adams用微量血凝板建立了診斷植物病毒的 ELISA技術(shù)。 五、脫毒苗的鑒定 ? 抗血清鑒定首先要進(jìn)行抗原的制備，只有獲得高純度的抗原，才有可能獲得高度純凈的抗血清。 五、脫毒苗的鑒定 ? 抗血清鑒定法 ? 植物病毒是由核酸和蛋白質(zhì)組成的核蛋白復(fù)合體，因而也是一種抗原，注射到動物體內(nèi)即產(chǎn)生抗體，抗體存在于血清之中，稱為抗血清。將被接種的指示植物置于有防蚜蟲網(wǎng)罩的溫室內(nèi)， 15~25℃ ，如接種植物的漿液含有病毒，數(shù)天至幾周后，指示植物即出現(xiàn)可見的癥狀。 五、脫毒苗的鑒定 ? 接種方法： ? 接種時(shí)取待測植物的幼葉，加少量水及等量（ pH值 ），磨成勻漿，吸取少量漿液揩抹在事先涂有 500~600目金剛砂（有利于破損葉片表面細(xì)胞）部分，輕輕摩擦務(wù)使?jié){液能侵入葉片表皮細(xì)胞但又不損傷葉片。這種專用以產(chǎn)生癥狀的寄主即為指示植物，又稱鑒別寄主。 ? 局限：只能測出病毒的相對感染力；只能鑒定靠汁液及嫁接傳染的病毒。 五、脫毒苗的鑒定 ? 指示植物鑒定法 ： ? 美國病毒學(xué)家 Holmes于 1929年發(fā)現(xiàn)，因?yàn)槭抢貌《驹谄渌参锷袭a(chǎn)生枯斑作為鑒別病毒種類的標(biāo)準(zhǔn)，也稱為枯斑和空斑測定法。 四、植物脫除病毒的方法 ? 小結(jié)： ? 單一的脫毒處理技術(shù)或難以完全脫除病毒，或需要較長的時(shí)間， 2種或 3種脫毒技術(shù)的組合使用逐漸成為生產(chǎn)無毒種苗的首選。柑橘類嫁接成活率為 30%~50%，移栽成活率約 95%，嫁接兩年后即可結(jié)實(shí)。為了克服這個(gè)困難，可將實(shí)生苗砧木培育在培養(yǎng)基上，再從成年無病毒樹枝上切取莖尖（ ~），在砧木切斷面上進(jìn)行試管微體嫁接，就可獲得無病毒的幼苗。珠心胚培養(yǎng)技術(shù)對除去柑橘主要病毒，如引起銀屑病、葉脈突出病、柑橘裂皮病、柑橘速衰病等的病毒，都十分有效。珠心胚與維管束系統(tǒng)無聯(lián)系，因此由珠心胚產(chǎn)生的植株全部均無病毒。 ? 產(chǎn)生原因 ：一是病毒的復(fù)制速度跟不上細(xì)胞的增殖速度；二是有些細(xì)胞通過突變獲得了抗病毒的特征。 四、植物脫除病毒的方法 ? 其它脫毒方法 ? （ 1）愈傷組織脫毒 ? 原理 ：在由受感染的組織形成的愈傷組織中，并非所有的細(xì)胞都均勻一致地帶有該種病原體。 四、植物脫除病毒的方法 ? 抗病毒劑使用濃度越高，處理時(shí)間越長脫毒效果越加明顯，相反，高濃度抗病毒劑對植株的生長有一定傷害；病毒抑制劑的使用量，應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)的植物種類不同而不同，一般為 5mg/L~20mg/L之間，另外，添加的濃度高時(shí)，處理的時(shí)間就可短些，濃
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