【正文】 馬鈴薯病毒常用指示植物有千日紅、曼陀羅、豇豆、辣椒等。 愈傷組織脫毒的缺陷是植株遺傳性不穩(wěn)定，可能會產(chǎn)生變異植株。 莖尖培養(yǎng)脫毒，由于其脫毒效果好，后代穩(wěn)定，所以是目前培育無病毒苗最廣泛和最重要的一個途徑。 在植物體內(nèi)存在有一種“ 病毒鈍化系統(tǒng) ”，在分生組織中的活性最高，因而使分生組織不受侵染。利用這一差異，選擇適當(dāng)?shù)臏囟群吞幚頃r間，進(jìn)行高溫處理，就能使寄主體內(nèi)病毒濃度降低，傳遞速度減慢或失去活性，而寄主細(xì)胞仍然存活，并加快分裂和生長。 ? CaCl2濃度： %% ? 離子交換時間： 20min30min ? 無菌水漂洗 20min 貯藏 ? 貯藏條件 ： 4~7℃ 低溫、相對濕度小于 67% ? 貯藏中存在的問題 ： ? 種胚質(zhì)量不高、后期停止生長、胚腐爛、種子失水干縮等。 ? 2）胚狀體同步化處理或分選： ? 胚狀體的同步化是指促使所有培養(yǎng)的細(xì)胞或發(fā)育中的細(xì)胞團(tuán)塊進(jìn)入同一個分裂時期。所以，人工種子是一種人工制造的代替天然種子的顆粒體，可以直接播種于田間。 ※ 人工種子的優(yōu)點 ?1） 培養(yǎng)條件可以人為控制 ， 具有省地省工可直接在田間播種等優(yōu)點 。 人工種皮制備 ? 分內(nèi)種皮和外種皮 ? 對人工種皮的要求：具有保護(hù)胚的功能，并且無毒性、通氣好、抗污染、抗壓性好、不粘連、適于貯藏和運(yùn)輸。 小結(jié) ? 人工種子是在實驗室人工控制條件下生產(chǎn)的繁殖體。 熱處理廣泛應(yīng)用于葡萄、草莓、馬鈴薯和菊花等植物。 （ 3）莖尖的培養(yǎng)方法 需要一臺 解剖鏡 （ 840倍）。 ③ 外植體的生理狀態(tài) 莖尖最好要由 活躍生長 的芽上切取。 5）花藥培養(yǎng)脫毒 ? 花藥培養(yǎng)實際上是單倍體培養(yǎng)，由此獲得單倍體植株，再通過染色體加倍獲得無病毒植株 。 抗原：病毒。 常用的鑒定法有直接測定法、指示植物法、抗血清鑒定法和電子顯微鏡檢查法等 。然后將試管苗熱處理，再取莖尖培養(yǎng)獲得脫毒苗。 將接種的莖尖置于 22℃ 左右溫度下。將感染了馬鈴薯 Y型病毒（ PVY）、黃瓜花葉?。?CMV)或煙草花葉病毒（ TMV）的葉柄，培養(yǎng)在三氮唑核苷的 MS培養(yǎng)基上，子代植株則除去病毒，而對照則無效，說明三氮唑核苷抑制病毒的增殖。 脫毒方法 物理法：熱處理脫毒 化學(xué)法：藥劑處理 生物法：莖尖培養(yǎng)脫毒 1）熱處理脫毒原理： ①病毒是 DNA大分子，病毒進(jìn)入植物細(xì)胞后，隨植物細(xì)胞 DNA一起復(fù)制。 ? 糖分存在容易導(dǎo)致微生物感染而腐爛，所以人工胚乳中也要加入防腐劑、抗菌素、有益菌類等。所以在一個材料中同時可以見到各個不同發(fā)育時期的胚狀體。第 4章 人工種子 與植物脫毒 1 人工種子 農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中使用的天然種子，一般都是由種皮、胚乳和胚三部分構(gòu)成。 胚狀體的誘導(dǎo)與同步化發(fā)育 不論是哪一種方式產(chǎn)生的胚狀體，在發(fā)生和發(fā)育過程中一般是不同步的。 人工胚乳配制 ? 成分：無機(jī)鹽混合物、碳水化合物（糖和淀粉）、蛋白質(zhì)、植物生長調(diào)節(jié)劑。在植物病毒病害防治上 ,植物脫毒技術(shù)得到廣泛應(yīng)用。 ? 近年發(fā)現(xiàn)三氮唑核苷（ 1— β— D— 呋喃核糖 — 1， 2，4— 三氮唑）用于防治一系列動物 DNA和 RNA病毒，對植物也有效。當(dāng)一個半圓球的頂端分生組織充分暴露出來之后，用解剖刀片將帶 12個葉原基 的分生組織切下，接到培養(yǎng)基上。 取莖尖（或