基因表達設計ppt課件(參考版)
2025-05-07 22:05本頁面
【正文】 常見的表達系統(tǒng) ? 大腸桿菌表達系統(tǒng)（原核） ? 酵母表達系統(tǒng)（真核） ? 動物細胞表達系統(tǒng) ? 昆蟲表達系統(tǒng)（家蠶表達系統(tǒng)） ? 植物表達系統(tǒng) ? 動物表達系統(tǒng)（乳腺反應器，輸卵管反應器） 非融合型表達載體 pPLLamda PL啟動子 溫度誘導 插入位點 HpaI （三）分泌型表達載體： ? 主要元件： ? 啟動子和 SD序列 ? 信號肽序列 ： SD下游，編碼信號肽， 可引導蛋白跨膜 ? 優(yōu)點：分泌表達，避免降解。 ? 不能進行修飾，可能有些蛋白沒有生物活性。 ? 表達蛋白的穩(wěn)定性： ? （ 1）使用蛋白酶缺失的工程菌：（ Ion蛋白酶缺失的工程菌） ? （ 2）使用融合蛋白 ? 防止產(chǎn)生包涵體： ? （ 1）使用融合蛋白，幫助正確折疊； ? （ 2）使用輔助質粒，產(chǎn)生分子伴侶，幫助正確折疊 ? （ 3）降低溫度，緩慢表達，幫助正確折疊； ? （ 4）減少誘導劑的量，緩慢表達，幫助正確折疊； ? （ 5）使用不同的培養(yǎng)基和金屬添加劑。 ? C端融合： (1) 表達情況一般不如 N端融合 (2)要克隆基因的下游引物不能含有 stop code.
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