基因表達(dá)設(shè)計(jì)ppt課件(完整版)
【正文】 7 RNA聚合酶 ? 改造的工程菌中基因組 DNA中含有 T7 RNA聚合酶基因。 位相載體 含有 3種讀碼框的系列載體 融合蛋白的功能 ? 提高外源基因的表達(dá)量 ? 幫助外源基因正確折疊（可溶） ? 提供親和標(biāo)記，方便純化； ? 提供親和標(biāo)記的還可作為檢測(cè)靶點(diǎn)，方便檢測(cè)。 常見(jiàn)的表達(dá)系統(tǒng) ? 大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)（原核） ? 酵母表達(dá)系統(tǒng)（真核） ? 動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng) ? 昆蟲(chóng)表達(dá)系統(tǒng)（家蠶表達(dá)系統(tǒng)） ? 植物表達(dá)系統(tǒng) ? 動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)（乳腺反應(yīng)器，輸卵管反應(yīng)器） 非融合型表達(dá)載體 pPLLamda PL啟動(dòng)子 溫度誘導(dǎo) 插入位點(diǎn) HpaI （三）分泌型表達(dá)載體： ? 主要元件： ? 啟動(dòng)子和 SD序列 ? 信號(hào)肽序列 ： SD下游，編碼信號(hào)肽， 可引導(dǎo)蛋白跨膜 ? 優(yōu)點(diǎn)：分泌表達(dá)，避免降解。 ? C端融合： (1) 表達(dá)情況一般不如 N端融合 (2)要克隆基因的下游引物不能含有 stop code. ? N， C端都融合，方便純化和進(jìn)行功能實(shí)驗(yàn)。 啟動(dòng)子的調(diào)控序列 ? Lac operator: （ 1） Lac I編碼阻遏蛋白，與之結(jié)合，阻止基因轉(zhuǎn)錄
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