有機(jī)酸測(cè)定ppt課件(參考版)
2025-05-03 22:07本頁面
【正文】 思 考 題 有機(jī)酸的總酸度、有效酸度和揮發(fā)性酸度測(cè)定的意義和方法原理是什么？氣相色譜法，液相色譜法測(cè)定有機(jī)酸的方法原理有什么不同？這兩種方法的主要操作步驟和方法要點(diǎn)有哪些？思 考 題。l 酯化時(shí)使用油浴也可，使用電熱板從試管底部加熱方便。但果膠等混入，粘度將增大，往往會(huì)使以后的處理費(fèi)事，故 乙醇的濃度應(yīng)選擇適當(dāng)（ 800 ml/L ） 。l 大部分蔬菜試樣有時(shí)混入一些丁醇不溶物或酯化反應(yīng)液呈淺褐色，對(duì)測(cè)定值無影響。水果新鮮物重 1～ 10g，蔬菜 1015g。蔬菜中的有機(jī)酸， 50％～ 90％以結(jié)合酸的形式存在， 乙醇提取比用溫水的提取率低 。? 注釋l 試樣制備過程中， 用溫水 80℃ 或 800ml/L乙醇提取 。 Sensitivity為 10MΩ ， Range為。l 分析 柱子在 60℃ 下保持 6min后，以每分鐘升溫5℃ 速度升至 250℃ 。取 5181。用移液管移入 20ml容量瓶中， 用己烷定容。l 酯化 用上述方法制備的有機(jī)酸中，加 丁醇 2mL，無水硫酸鈉 2g，濃硫酸 ，連接冷凝管，在電熱板上平穩(wěn)沸騰約 30min(加熱時(shí)要不斷攪拌 )， 使有機(jī)酸成為丁酯 。l 取此提取液 10～ 50mL，用 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器濃縮至無醇后 ，依次 通過 Amberite CGl CG4B及 CGl20柱，得到有機(jī)酸組分 ，加入 酚酞指示劑 并滴定， 求出總酸含量 。l水果： 從新鮮水果樣品中稱取 ，加 3倍量的800ml/L乙醇 研磨 ，以離心分離后，收集上清液，殘?jiān)俜磸?fù)提取 2次，合并提取液，加 酚酞指示劑 ，用 。必要時(shí)可過濾除去不溶物。 操作步驟? 試樣準(zhǔn)備l蔬菜 ： 把樣品切成 3mm見方，稱取 溫水(80℃ ，部分蔬菜可用 800ml/L乙醇代替研磨 )，提取2次，合并提取液，加 酚酞指示劑 ，用 溶液滴定， 求總酸量 ，同時(shí)使有機(jī)酸成為鈉鹽。? 可定量的有機(jī)酸有：甲酸、乙酸、丙酸、異丁酸、正丁酸、乳酸、異戊酸、異乙酸、正己酸、乙酰丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、反丁烯二酸、蘋果酸、酒石酸、反丙烯三羧酸以及檸檬酸等。178。216。l 分離有機(jī)酸 ,既要考慮流動(dòng)相的組成，濃度及 pH，還要考慮有機(jī)酸的強(qiáng)弱， 磷酸鹽緩沖液是 C18反相柱上應(yīng)用較廣的流動(dòng)相。l 反相分配色譜法，與正相的相反， 常用于分離極性較弱的化合物，分析的順序是 極性較強(qiáng)的組分保留時(shí)間短，先流出色譜柱。常用于分離極性較強(qiáng)的化合物，分析的順序是極性較低的組分保留值小，先流出色譜柱。l 固定相的極性大于流動(dòng)相時(shí)，叫正相。 可查閱相關(guān)手冊(cè)，了解樣品酸的含量范圍。否則分離不好，引起較大誤差 。l 流動(dòng)相（載液）： 5g 說明l 在樣品溶液測(cè)定中，每進(jìn) 3次樣液，就應(yīng)進(jìn) 1次標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行校正，并重新計(jì)算校正系數(shù)，以保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確度。l 根據(jù)各待測(cè)樣品的響應(yīng)值，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出其相應(yīng)的含量。l 分別注入待測(cè)樣品 10181。? 有機(jī)酸的定量：l外標(biāo)法， 將不同濃度酸液從低濃度到高濃度依次進(jìn)樣， 計(jì)算各自的峰面積，每個(gè)樣平行進(jìn) 5次， 作各種有機(jī)酸的峰面積或峰高與濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線 。l ,根據(jù)峰高的突增來進(jìn)一步驗(yàn)證色譜峰的歸屬 。 定性：將各種單一有機(jī)酸液依次進(jìn)樣，記錄各自保留時(shí)間。L，進(jìn)行色譜分析。L注入色譜儀，根據(jù)其峰高或峰面積設(shè)定有關(guān)最佳參數(shù)如最小峰面積。l正相柱： 填料是極性的，官能團(tuán)為 － CN氰基、－ NH2氨基等。由于 C18(ODS)是長(zhǎng)鏈烷基鍵合相 ，有較高的碳含量和更好的疏水性，對(duì)各種類型的生物大分子有更強(qiáng)的適應(yīng)能力，因此在生物化學(xué)分析工作中應(yīng)用的最為廣泛，近年來，為適應(yīng)氨基酸、小肽等生物分子的分析任務(wù)，又發(fā)展了 CH、 C C4等短鏈烷基鍵合相和大孔硅膠（ 20～ 40μm ）。Ll檢測(cè)器： 紫外檢測(cè)器， 214nm， l 最常用的 “ 萬能柱 ” 填料為 “ C18” ，簡(jiǎn)稱 “ ODS”柱，即十八烷基硅
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