應(yīng)用生物化學ppt課件(參考版)
2025-05-02 00:30本頁面
【正文】 。因而等電點沉淀法可用于某些兩性電解質(zhì)的分離如氨基酸、蛋白質(zhì)、核苷酸等。（四）、等電點沉淀法n 原理：n 利用兩性電解質(zhì)在等電點處溶解度最小的性質(zhì)。 透析外液的更換 溫度： 溫度越高，透析速度越快。當膜的兩側(cè)存在小分子濃度梯度差時，小分子就從高濃度一側(cè)向低濃度一側(cè)擴散，直至達到平衡，如果能不斷去除擴散出來的小分子，從而達到分離純化的目的。n 缺點： 對某些具有生物活性的大分子，容易引起變性失活，操作常在低溫下進行；分離效果差，共沉作用大；離子強度及離子種類對其也有影響。不同溶質(zhì)要求不同濃度的有機溶劑，因此可用有機溶劑進行分步沉淀。（二）、有機溶劑沉淀法n 原理 ：n 有機溶劑對許多溶于水的小分子生化物質(zhì)以及核酸、多糖、蛋白質(zhì)等生物大分子都能發(fā)生沉淀作用。 （３）ＰＨ對鹽析的影響： 蛋白質(zhì)所帶凈電荷越多，溶解度越大；在凈電荷為零時，溶解度最低。 （２）離子強度和離子類型對鹽析的影響： 離子強度越大，蛋白質(zhì)的溶解度越低，越容易產(chǎn)生鹽析現(xiàn)象；離子半徑小而價數(shù)高的離子在鹽析方面影響較強，離子半徑大而價數(shù)低的離子對鹽析影響弱。一般為 %%的蛋白質(zhì)濃度較適中。影響蛋白質(zhì)鹽析的因素216。n 冰凍干燥法濃縮實例（一）、硫酸氨鹽析法： 根據(jù)蛋白質(zhì)在稀鹽溶液中溶解度會隨著鹽濃度的增高而上升（鹽溶），但當鹽濃度增高到一定數(shù)值時，其溶解度又逐漸下降，直至蛋白質(zhì)析出， 鹽析 的發(fā)生在于鹽濃度增高到一定數(shù)值時，使水活度降低，進而導致蛋白質(zhì)分子表面電荷逐漸被中和 ， 水化膜逐漸被破壞 ，最終引起蛋白質(zhì)分子之間相互聚集并從溶液中析出?！ 超過濾法： 把提取液裝入過濾裝置，在空氣或氮氣的壓力下，使小分子物質(zhì)通過半透膜，大分子物質(zhì)留在膜內(nèi)。 鹽析法；等電點沉淀法；有機溶劑沉淀法；非離子多聚體沉淀法；生成鹽復合物沉淀法；熱變性沉淀法；酸堿變性沉淀法等 。5. 去垢劑： 去垢劑是一類既有親水基又有疏水基的物質(zhì)，可以分為陰離子、陽離子和中性去垢劑等，如 SDS， Tween20， Triton X100。3. PH值： 溶
教學課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1