分子生物學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)教學(xué)大綱(參考版)
2025-04-07 23:13本頁面
【正文】 基因診斷的技術(shù)與方法 核酸分子雜交和PCR技術(shù) [復(fù)習(xí)思考題]名詞解釋基因診斷、基因治療問答題1. 基因診斷的原理和診斷途徑2. 如何獲得目的基因3. 如何選擇載體和靶細(xì)胞14 / 14?；蜻B鎖分析的概念。 反轉(zhuǎn)錄病毒載體的特點(diǎn)。 熟悉 基因診斷的方法及其應(yīng)用。第十四章 基因診斷和基因治療[目的要求] 掌握 基因診斷的原理和診斷途徑。凋亡的調(diào)控。凋亡的形態(tài)學(xué)和生化特征。細(xì)胞周期調(diào)控因素?？刂泣c(diǎn)。[教學(xué)肘數(shù)] 3學(xué)時(shí)[講授內(nèi)容] 細(xì)胞周期 細(xì)胞周期基本概念。 了解 細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡調(diào)控。 熟悉 細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)和生化特點(diǎn)。重組體在真核細(xì)胞中表達(dá)的策略 哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)的優(yōu)點(diǎn)及載體種類、真核細(xì)胞表達(dá)元件，哺乳動(dòng)物基因轉(zhuǎn)移的遺傳選擇性標(biāo)記、表位標(biāo)記、western印跡雜交原理。 重組休在原核細(xì)胞中的表達(dá) 原核生物基因表達(dá)的特點(diǎn)，外源基因在原核細(xì)胞中表達(dá)的重要調(diào)控元件。表達(dá)產(chǎn)物的分離與純化。常見表達(dá)載體的特點(diǎn)，Western印跡雜交原理。融合蛋白的概念以及表達(dá)融合蛋白的優(yōu)點(diǎn)，真核細(xì)胞表達(dá)元件，哺乳動(dòng)物基因轉(zhuǎn)移的遺傳選擇性標(biāo)記。噬菌體載體 目的基因與載體的連接 連接的策略、連接反應(yīng)的建立 重組子導(dǎo)入受體、氯化鈣、電穿孔法 重組子的篩選與鑒定 插入片段長度鑒定、插入片段方法鑒定。[教學(xué)時(shí)數(shù)] 3學(xué)時(shí)[講授內(nèi)容] 基因克隆的載體 質(zhì)粒載體 (概念、要求和種類)。CaCl2法進(jìn)行重組子的轉(zhuǎn)化。 熟悉 常用的質(zhì)粒載體。載體的篩選標(biāo)志和篩選方法。長鏈 DNA測序的策略(隨機(jī)法、嵌套缺夫法、引物延伸法）[復(fù)習(xí)思考題] 名詞解釋基因組文庫、cDNA文庫、差示文庫問答題。其他方法。構(gòu)建真核細(xì)胞基因組文庫篩選目的基因(分離純化基因組DNA、DNA片段與載體的連接包裝、導(dǎo)入細(xì)胞、篩選目的基因)。 了解 基因序列分析的雙脫氧鏈終止法的測序原理。構(gòu)建cDNA文庫的原理與基本操作流程。堿性磷酸酶。DNA連接酶。 第四章 蛋白質(zhì)組和蛋白質(zhì)組學(xué)[目的要求] 掌握 蛋白質(zhì)組概念；二維電泳熟悉 蛋白質(zhì)組的研究范疇；研究蛋白質(zhì)組的基本方法（如酵母雙雜交、凝膠滯后電泳等）了解 蛋白質(zhì)的數(shù)據(jù)庫；蛋白質(zhì)的醫(yī)學(xué)應(yīng)用[教學(xué)時(shí)數(shù)] 3學(xué)時(shí)[講授內(nèi)容] 蛋白質(zhì)組的概念和特點(diǎn)蛋白質(zhì)組的研究范疇蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)的相互作用的研究方法（酵母雙雜交、噬菌體
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