分子生物學(xué)整理資料1(參考版)
2025-04-07 23:13本頁(yè)面
【正文】 3. DNA克隆的基本步驟是什么P473答：DNA克隆的過(guò)程包括以下幾個(gè)基本步驟：1）獲得目的DNA片段； 2）將目的基因片段連接到載體上； 3）將人工重組的DNA引導(dǎo)進(jìn)入受體細(xì)胞； 4）檢出目的轉(zhuǎn)化子； 5）將目的基因轉(zhuǎn)化子進(jìn)行表達(dá)分析。2. 何謂分子克隆？P463464答：克隆意為無(wú)性繁殖，簡(jiǎn)述為將DNA的限制酶酶切片段插入克隆載體，導(dǎo)入宿主細(xì)胞，經(jīng)無(wú)性繁殖，以獲得相同的DNA擴(kuò)增分子。2）可以定向地改變生物的遺傳特性，即通過(guò)有目的地取得某種基因并將該基因引進(jìn)原本沒(méi)有這種基因的生物體，改變后者的遺傳特性。 在各個(gè)不同層次中，染色體和染色質(zhì)的活性、轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄初始產(chǎn)物的加工、翻譯等4 種水平上的調(diào)控是基因表達(dá)的更重要調(diào)節(jié)過(guò)程。 6）蛋白質(zhì)合成以后選擇性地被激活的控制，蛋白質(zhì)和酶分子水平上的剪切、活性水平的控制。 4） 轉(zhuǎn)錄后加工產(chǎn)物在從細(xì)胞核向細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程中所受到的調(diào)控。 2） 轉(zhuǎn)錄水平上的調(diào)控，包括基因的開與關(guān)，轉(zhuǎn)錄效率的高和低。第13章 真核生物基因的表達(dá)調(diào)控1. 真核生物基因表達(dá)的調(diào)控有哪7個(gè)層次，其中更重要的調(diào)節(jié)過(guò)程是什么？P390391答。這種調(diào)控方式中，起信號(hào)作用的是細(xì)胞中某一氨基酸或嘧啶的濃度和有特殊負(fù)載的氨基?！猼RNA的濃度。弱化子對(duì)RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄的終止依賴于前導(dǎo)肽翻譯中核糖體所處的位置，而細(xì)胞中色氨酸存在與否，決定了mRNA轉(zhuǎn)錄的弱化子結(jié)構(gòu)，使弱化子中4區(qū)域呈現(xiàn)競(jìng)爭(zhēng)性配對(duì)，從而產(chǎn)生了弱化效應(yīng)，這是色氨酸操縱子的第二水平控制機(jī)制。？P376—378答：色氨酸操縱子轉(zhuǎn)錄終止的調(diào)控是通過(guò)弱化作用實(shí)現(xiàn)的。，其作用是？P375答：①色氨酸操縱子的阻遏系統(tǒng)是色氨酸生物合成途徑的第一水平調(diào)控，它主管轉(zhuǎn)錄的啟動(dòng)與否。即表現(xiàn)為培養(yǎng)基中的乳糖會(huì)被利用而減少。即培養(yǎng)基中葡萄糖被利用，而乳糖沒(méi)有。、葡萄糖含量，判斷細(xì)菌對(duì)乳糖的利用情況。通過(guò)調(diào)節(jié)基因編碼的調(diào)節(jié)蛋白或與誘導(dǎo)物、輔阻遏物協(xié)同作用，開啟或關(guān)閉操縱基因，對(duì)結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)進(jìn)行正、負(fù)控制?！痉词阶饔靡蜃邮侵改苤苯踊蜷g接地識(shí)別或結(jié)合在各類順式作用元件核心序列上參與調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄效率的蛋白質(zhì)。順式作用元件是指對(duì)基因表達(dá)有調(diào)節(jié)活性的DNA 序列，其活性只影響與其自身同處在一個(gè)DNA 分子上的基因；這種DNA 序列通常不編碼蛋白質(zhì)，多位于基因旁側(cè)或內(nèi)含子中。反式作用因子的編碼基因與其識(shí)別或結(jié)合的核苷酸序列不在同一個(gè)DNA 分子上。第十二章 原核生物基因表達(dá)調(diào)控？P366答： 基因活性的調(diào)節(jié)主要通過(guò)反式作用因子與順式作用元件的相互作用而實(shí)現(xiàn)。？P353答：蛋白質(zhì)合成之后，還需要經(jīng)過(guò)加工修飾和折疊才具有生物活性，并通過(guò)分選過(guò)程被運(yùn)送到功能部位。這3個(gè)步驟構(gòu)成了一個(gè)循環(huán)，即核糖體循環(huán)。這個(gè)過(guò)程有3個(gè)步驟：① 進(jìn)位反應(yīng)，是氨基酰tRNA的反密碼子與mRNA的密碼子在核糖體內(nèi)的識(shí)別。(課件)第十一章 蛋白質(zhì)的合成？P312313答：起始密碼子：AUG（絕大多數(shù)的生物體中都使用這個(gè)起始密碼子）、GUG（極少數(shù)使用） 終止密碼子：UAA、UAG、UGA不編碼任何一種氨基酸。 ③通過(guò)剪接除去由內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄而來(lái)的序列； ④RNA 鏈內(nèi)部的核苷酸被甲基化等。核內(nèi)不均一的RNA (heterogeneous nuclear RNA , hnRNA) 的堿基組成與總DNA 組成類似，又稱為類似DNA的RNA (DRNA）。 細(xì)胞內(nèi)由RNA聚合酶合成的原初轉(zhuǎn)錄物一般都需要經(jīng)過(guò)一系列的變化，包括:①5′端形成帽子結(jié)構(gòu)；②3′端形成一段多聚腺苷酸；③切去內(nèi)含子和連接外顯子(剪接)；④鏈的斷裂；⑤核苷酸修飾；⑥糖苷鍵的改變；⑦RNA 編輯等過(guò)程，才能轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒斓腞NA 分子，這些過(guò)程總稱為RNA 的成熟。P261264答：RNA轉(zhuǎn)錄的抑制劑按照作用性質(zhì)不同可分為3類：① 嘌呤和嘧啶類似物，抑制和干擾核酸合成；② DNA模板功能的抑制物，通過(guò)與DNA結(jié)合而改變模板的功能，如烷化劑、放線菌素、嵌入染料；③ RNA聚合酶的抑制物，利福霉素、利鏈菌素、α鵝膏蕈堿。端，一般有4~6個(gè)連續(xù)或不連續(xù)的U 序列結(jié)構(gòu)。原核生物基因的終止子
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