巴戟天對大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖、成骨分化及cbfal基因表達(dá)影響的研究開題報(bào)告(參考版)
2025-01-24 15:56本頁面
【正文】 文獻(xiàn)資料福建中醫(yī)學(xué)院圖書館建有較完備的網(wǎng)上信息資源、文獻(xiàn)檢索數(shù)據(jù)庫和藏書、期刊資源等滿足課題需要.其他 導(dǎo)師審查意見 導(dǎo)師簽名 年 月 日 開題小組評議意見（課題的先進(jìn)性、科學(xué)性、可行性評價(jià)）參加開題成員簽名 年 月 日 系（院、部）批準(zhǔn)意見系（院、部）蓋章 年 月 日備考檢查及變動情況記錄第一次檢查及變動記錄導(dǎo)師簽名 年 月 日 第一次檢查及變動記錄導(dǎo)師簽名 年 月 日 課題完成日期 年 月 日備注16。協(xié)作單位及協(xié)作內(nèi)容落實(shí)情況 透射電鏡觀察在福建醫(yī)大電鏡室進(jìn)行（已落實(shí)）。實(shí)驗(yàn)動物情況通過福建中醫(yī)學(xué)院動物實(shí)驗(yàn)中心向上海斯萊特動物有限公司購買SD大鼠100只。FACSCAN 流式細(xì)胞儀(美國BECTON DICKISON)。MILLIQ Biocel 超純水裝置(美國MILLIPORE)。DYCP32 瓊脂糖漿水平電泳槽(北京六一儀器廠)。DU650 紫外分光光度計(jì)(美國BECKMAN)。MDFU4086S4086S超低溫冰箱(日本SANYO)。ZWA微型振蕩器(常州國華電器有限公司)。GBB16二氧化碳培養(yǎng)箱(德國Heraeus)。851l恒溫磁力攪拌器 （常州國華電器有限公司）；LDZX40H全自動壓力滅菌消毒器（上海申安醫(yī)療器械廠）；TGL16C水平離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）；HH4數(shù)顯恒溫水浴鍋(常州國華電器有限公司)。Φ690酸度計(jì)(德國BECKMAN)。預(yù)期結(jié)果以論文形式發(fā)表通過巴戟天對大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖、成骨分化及Cbfal基因表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究，確立含藥血清體外培養(yǎng)大鼠BMSCs的模型，揭示巴戟天水提物或巴戟天醇提物可能通過促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖、向成骨細(xì)胞分化及使此過程中的Cbfal基因表達(dá)加強(qiáng)，從而促進(jìn)成骨，有利于骨愈合、骨修復(fù), 為中藥促進(jìn)骨折愈合，治療骨折遲緩愈合、不愈合以及中醫(yī)藥在骨組織修復(fù)工程中的應(yīng)用等提供科學(xué)依據(jù)，也為新藥開發(fā)、中醫(yī)藥現(xiàn)代化研究提供科學(xué)的理論依據(jù)。(二、巴戟天對骨髓基質(zhì)細(xì)胞成骨分化及Cbfal mRNA的表達(dá)的影響)SD大鼠120只（生理鹽水組、水提物組、醇提物組各40只），制備血清）誘導(dǎo)成骨劑 組含巴戟天醇提物血清＋誘導(dǎo)成骨劑組含巴戟天水提物血清＋誘導(dǎo)成骨劑組含巴戟天醇提物血清組含巴戟天水提物血清組生理鹽水組取最佳時(shí)效與量效制備血清、培養(yǎng)BMSCs 各組按時(shí)間點(diǎn)檢測HE染色、倒置相差顯微鏡、透射電鏡等形態(tài)學(xué)觀察。 含巴戟天水提物、巴戟天醇提物血清對Cbfal基因表達(dá)的影響；運(yùn)用RTPCR法觀察BMSCs成骨分化過程Cbfal mRNA的表達(dá)及含巴戟天水提物、巴戟天醇提物血清對Cbfal基因表達(dá)的影響。 含巴戟天水提物、巴戟天醇提物血清對BMSCs成骨分化的影響；a) ALP染色（Gomori鈣鈷法）；b) 礦化結(jié)節(jié)染色(茜素紅法)；c) I型膠原染色(Van Gieson 苦味酸—酸性品紅法)d) I型膠原免疫組化觀察；e) BGP含量的測定；f) ALP活性比的測定；g) 透射電鏡觀察；h) 倒置相差顯微鏡。其余同兩天組。c) 6天組：用藥劑量相當(dāng)于臨床等效劑量，(根據(jù)“人和動物體表面積折算的等效劑量比率表”計(jì)算)。對照組以等量的生理鹽水以獲得空白對照血清，一日劑量分2次服，連續(xù)給藥3天，第4天1次服用全天劑量，采血前禁食12小時(shí)，末次給藥3小時(shí)后采血，分別裝瓶（供按采血時(shí)間分組對照：1小時(shí)組、2小時(shí)組、3小時(shí)組）。以3000r／min離心15min，分離血清，56℃水浴，30分鐘滅活，—20℃冰箱保存?zhèn)溆谩?含巴戟天水提物、巴戟天醇提物血清的制備；a) 2天組：用藥劑量相當(dāng)于臨床等效劑量，(根據(jù)“人和動物體表面積折算的等效劑量比率表”計(jì)算)。b) 巴戟天醇提取物的制備 取藥物粉碎，以95％乙醇回流提取三次，每次1h，回收乙醇至盡，浸膏備用。[31] 劉金保，董曉先，董燕湘，等。和漢醫(yī)藥學(xué)會志，1985，2：106－107[29] 張群豪，陳可冀．血清藥理學(xué)在中藥及復(fù)方研究中應(yīng)用的評價(jià)[J]．中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，1996，16(3)：131．[30] 賈延幼，楊于嘉，周燕，等。[28] 田代真一。巴戟天化學(xué)成分研究。巴戟天對小鼠抗疲勞的實(shí)驗(yàn)研究。中藥通報(bào)，1986，11（9）：42－43。[25] 周法興，文潔，馬燕。中藥巴戟天化學(xué)成分的研究。時(shí)珍國醫(yī)藥，2000，11（7）：665－666。18（11）：677680[20] Ducy P,Zhang r,Geoffroy v,et :a transcriptional activator of osteoblast differentiation[J].Cell,1997,89(5):747[21] Hoshi K,Komori T,Ozawa characterization of skeletal cell in Cbfaldeficient mice. Bone,1999,25:639651.[22] Ziros PG,Gil AP,Georgakopoulos T,et bonespecific transcriptional regulator Cbfal is a target of mechanical
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