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遺傳學(xué)講義第7【精品(參考版)

2025-01-21 20:30本頁面
  

【正文】 。 2022/2/14 湖北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 陳建國 92 轉(zhuǎn)導(dǎo) 2022/2/14 湖北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 陳建國 93 三、轉(zhuǎn)導(dǎo) 2022/2/14 湖北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 陳建國 94 使用時(shí),直接刪除本頁! 精品課件,你值得擁有 ! 精品課件,你值得擁有 ! 2022/2/14 湖北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 陳建國 95 使用時(shí),直接刪除本頁! 精品課件,你值得擁有 ! 精品課件,你值得擁有 ! 2022/2/14 湖北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 陳建國 96 本章要點(diǎn) ? 細(xì)菌和病毒在遺傳研究中的優(yōu)越性; ? 轉(zhuǎn)化、接合、性導(dǎo)與轉(zhuǎn)導(dǎo)的概念與基本原理; ? F菌株、 F+菌株、 Hfr菌株; ? F因子、 F180。 2022/2/14 湖北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 陳建國 91 三、轉(zhuǎn)導(dǎo) ? P22侵染細(xì)菌后,細(xì)菌染色體斷裂成片段,在形成噬菌體顆粒時(shí),偶爾錯(cuò)誤地把細(xì)菌染色體片段包裝在噬菌體蛋白質(zhì)外殼內(nèi),其中并不包含有噬菌體的遺傳物質(zhì),這種假噬菌體稱為 轉(zhuǎn)導(dǎo)顆粒 。以后的研究工作表明,這種過濾性因子是噬菌體 P22。 2022/2/14 湖北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 陳建國 90 三、轉(zhuǎn)導(dǎo) ? 黎德伯格將上述兩種菌株分別放在戴維斯 U型管的兩臂內(nèi),中間用玻璃濾板隔開,以防止細(xì)胞接觸,但可以允許比細(xì)菌小的物質(zhì)通過 (動(dòng)畫 ),結(jié)果也獲得了野生型重組體。 (動(dòng)畫 ) ? 黎德伯格等 1956年在傷寒沙門氏菌中發(fā)現(xiàn)了轉(zhuǎn)導(dǎo)現(xiàn)象。 2022/2/14 湖北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 陳建國 85 2022/2/14 湖北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 陳建國 86 原噬菌體 2022/2/14 湖北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 陳建國 87 二、溫和噬菌體 ? P1噬菌體不整合到細(xì)菌的染色體上,而是 ? 原噬菌體通過紫外線照射,或溫度改變可轉(zhuǎn)變?yōu)榱倚允删w。例如 λ和 P1噬菌體可代表略有不同的溶原性類型。所以這樣的 T偶數(shù)系列噬菌體稱為 烈性噬菌體 。末端是基板,由尾絲及尾針組成。它們的外貌都象蝌蚪狀 (如圖 )。這樣通過兩個(gè)位點(diǎn)間重組頻率的計(jì)算就可以獲得每個(gè)片段的連鎖群。部分二倍體F′lac+/lac不穩(wěn)定, F′因子可能丟失,產(chǎn)生 lac單倍體,或是在 F′和染色體間重組產(chǎn)生穩(wěn)定的 lac+。 ? F因子整合到宿主細(xì)菌染色體過程是可逆的,當(dāng)發(fā)生 環(huán)出 時(shí), F因子又重新離開染色體,然而 F因子偶然環(huán)出時(shí)不夠準(zhǔn)確,它攜帶有大腸桿菌染色體的一些基因,這種 F因子稱為 F′因子 (圖,動(dòng)畫 )。根據(jù)大腸桿菌接合實(shí)驗(yàn)的研究,利用中斷雜交,基因重組等方法已繪制出大腸桿菌 K12的環(huán)狀遺傳圖。 (動(dòng)畫 ) 2022/2/14 湖北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 陳建國 72 重組作圖 2022/2/14 湖北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 陳建國 73 (四 )、重組作圖 ? 兩基因間的重組值約等于 22%。如果選出 ade+同時(shí)也是 lac+,說明 lac和ade間沒有發(fā)生過交換。用完全培養(yǎng)基但不加腺嘌呤,可以選出 F ade+的菌落。 2022/2/14 湖北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 陳建國 69 2022/2/14 湖北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 陳建國 70 (四 )、重組作圖 ? 如果兩個(gè)基因間的轉(zhuǎn)移時(shí)間小于 2分鐘,用中斷雜交法所得的圖距不太可靠,應(yīng)采用傳統(tǒng)的 重組作圖法 。 ? 用不同的 Hfr菌株進(jìn)行中斷雜交實(shí)驗(yàn)所作出的大腸桿菌基因連鎖圖,其基因進(jìn)入 F細(xì)胞的轉(zhuǎn)移的順序不大相同。這說明 Hfr菌株的基因是按一定的線性順序依次進(jìn)入 F菌株,也就是說,染色體從原點(diǎn)開始以直線方式進(jìn)入 F細(xì)胞的?;旌?11分鐘后,才開始出現(xiàn)抗噬菌體 T1的 F細(xì)菌。經(jīng)過稀釋,接種到含有鏈霉素的完全培養(yǎng)基上,這樣將殺死所有 Hfr細(xì)胞,然后對形成菌落的 F細(xì)胞用影印培養(yǎng)法測試其基因型,以便確定每個(gè)基因轉(zhuǎn)移到 F細(xì)胞的時(shí)間 (如圖 )。經(jīng)過稀釋,接種到含有鏈霉素的完全培養(yǎng)基上,這樣將殺死所有 Hfr細(xì)胞,然后對形成菌落的 F細(xì)胞用影印培養(yǎng)法測試其基因型,以便確定每個(gè)基因轉(zhuǎn)移到 F細(xì)胞的時(shí)間 (如圖 )。 ? Hfr菌株的基因型是: strs azir tonAr galb+ lac+ ? F 菌株的基因型是: strr azis tonAs galb lac ? str代表鏈霉素, s代表敏感性, r代表抗性, +代表原養(yǎng)型或抗性, 代表營養(yǎng)缺陷型。新染色體的 DNA稱為 供體外基因子 ,而宿主的染色體則稱為 受體內(nèi)基因子 ,部分二倍體中發(fā)生單數(shù)交換,可使環(huán)狀染色體打開,產(chǎn)生一個(gè)線性染色體,這種細(xì)胞不能成活,只有發(fā)生偶數(shù)的交換,才能產(chǎn)生遺傳的重組體和片段。 (動(dòng)畫 ) 2022/2/14 湖北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 陳建國 56 Hfr和 F接合 2022/2/14 湖北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 陳建國 57 2. F因子及其在雜交中的行為 ? 當(dāng) F+或 Hfr的細(xì)菌染色體進(jìn)入 F后,在一個(gè)短時(shí)期內(nèi), F細(xì)胞中對某些位點(diǎn)來說總有一段二倍體的DNA。當(dāng) F因子復(fù)制完成后, F變成 F+ (圖,動(dòng)畫 )。 2022/2/14 湖北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 陳建國 48 (二 )、 F因子及其在雜交中的行為 2022/2/14 湖北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 陳建國 49 F因子的存在狀態(tài) ? 以大腸桿菌為例, F因子能夠以三種狀態(tài)存在: ? 沒有 F因子,即 F; ? 包含一個(gè)自由狀態(tài)的 F因子,即 F+; ? 包含一個(gè)整合到自己染色體組內(nèi)的 F因子,即 Hfr (如圖 )。 ? F因子的化學(xué)本質(zhì)是 DNA,可以自主狀態(tài)存在于細(xì)胞質(zhì)中或整合到細(xì)菌的染色體上。 sex fact
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