【正文】 體 (receptor) (“ 雌性” )的重組過程。當 F因子復制完成后， F變成 F+ (圖，動畫 )。經(jīng)過稀釋，接種到含有鏈霉素的完全培養(yǎng)基上，這樣將殺死所有 Hfr細胞，然后對形成菌落的 F細胞用影印培養(yǎng)法測試其基因型，以便確定每個基因轉移到 F細胞的時間 (如圖 )。 ? 用不同的 Hfr菌株進行中斷雜交實驗所作出的大腸桿菌基因連鎖圖，其基因進入 F細胞的轉移的順序不大相同。 (動畫 ) 2022/2/14 湖北大學生命科學學院 陳建國 72 重組作圖 2022/2/14 湖北大學生命科學學院 陳建國 73 (四 )、重組作圖 ? 兩基因間的重組值約等于 22%。這樣通過兩個位點間重組頻率的計算就可以獲得每個片段的連鎖群。例如 λ和 P1噬菌體可代表略有不同的溶原性類型。以后的研究工作表明，這種過濾性因子是噬菌體 P22。 。 2022/2/14 湖北大學生命科學學院 陳建國 90 三、轉導 ? 黎德伯格將上述兩種菌株分別放在戴維斯 U型管的兩臂內(nèi)，中間用玻璃濾板隔開，以防止細胞接觸，但可以允許比細菌小的物質(zhì)通過 (動畫 )，結果也獲得了野生型重組體。所以這樣的 T偶數(shù)系列噬菌體稱為 烈性噬菌體 。部分二倍體F′lac+/lac不穩(wěn)定， F′因子可能丟失，產(chǎn)生 lac單倍體，或是在 F′和染色體間重組產(chǎn)生穩(wěn)定的 lac+。如果選出 ade+同時也是 lac+，說明 lac和ade間沒有發(fā)生過交換。這說明 Hfr菌株的基因是按一定的線性順序依次進入 F菌株，也就是說，染色體從原點開始以直線方式進入 F細胞的。 ? Hfr菌株的基因型是： strs azir tonAr galb+ lac+ ? F 菌株的基因型是： strr azis tonAs galb lac ? str代表鏈霉素， s代表敏感性， r代表抗性， +代表原養(yǎng)型或抗性， 代表營養(yǎng)缺陷型。 2022/2/14 湖北大學生命科學學院 陳建國 48 (二 )、 F因子及其在雜交中的行為 2022/2/14 湖北大學生命科學學院 陳建國 49 F因子的存在狀態(tài) ? 以大腸桿菌為例， F因子能夠以三種狀態(tài)存在： ? 沒有 F因子，即 F； ? 包含一個自由狀態(tài)的 F因子，即 F+； ? 包含一個整合到自己染色體組內(nèi)的 F因子，即 Hfr (如圖 )。 2022/2/14 湖北大學生命科學學院 陳建國 44 (一 )、接合現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)和證實 ? 經(jīng)過上述分析可以認為： ? 在 Lederbery和 Tatum及其它類似試驗中，發(fā)生了一種不同于轉化的遺傳重組方式，稱之為接合。因而研究整合的分子機制事實上也為遺傳重組的分子機制作出了貢獻。不同細菌轉化過程有一定差異，但是它們都存在幾個共同特征，即： ? 1. 感受態(tài)與感受態(tài)因子： ? 感受態(tài) 指細菌能夠從周圍環(huán)境中吸收 DNA分子進行轉化的生理狀態(tài)。 ? 但是當時的化學與生化分析技術還無法鑒定殺死細菌中的成分，因而不知轉化因子為何物。 ? 其它突變類型 的篩選、鑒定： ? 對于其它的突變類型 (如溫度敏感型 )，也可以通過培養(yǎng)條件的選擇培養(yǎng)來篩選與鑒定。 ? 通常采用 平板表面涂布法 或 劃線法 可以獲得單菌落。病毒可根據(jù)宿主 (動物、植物、細菌 )或遺傳物質(zhì) (DNA或 RNA)來分類。2022/2/14 湖北大學生命科學學院 陳建國 1 第一節(jié) 細菌和病毒遺傳研究的意義 一 、 細菌的生物學特征 二 、 病毒的生物學特征 三 、 細菌和病毒在遺傳研究中的優(yōu)越性 四 、 細菌和病毒的擬有性過程 五 、 細菌遺傳的實驗研究方法 2022/2/14 湖北大學生命科學學院 陳建國 2 一、細菌的生物學特征 ? 細菌是單細胞生物，完成每個世代只需 20分鐘，而且容易得到它的生化突變型，它不僅在醫(yī)學上和農(nóng)業(yè)上重要，而且從進化角度上也是異常成功的，因為它占據(jù)地球上大部分的生物干重。 ? 病毒主要是由蛋白質(zhì)外殼及其包被的核酸所組成的顆粒。 2022/2/14 湖北大學生命科學學院 陳建國 13 細胞計數(shù) (培養(yǎng)物細胞濃度 ) 2022/2/14 湖北大學生命科學學院 陳建國 14 (二 ) 建立純系的方法 —— 純培養(yǎng) ? 挑取由單個細胞繁殖而來的菌落進行培養(yǎng)就可以獲得由一個細胞繁殖而來的純系。 2022/2/14 湖北大學生命科學學院 陳建國 17 (三 ) 選擇培養(yǎng)法鑒定突變型與重組型 ? 許多細菌的突變都與培養(yǎng)基營養(yǎng)成分及培養(yǎng)條件有關。 ? 他將這種細菌遺傳類型的轉變稱為 轉化 ，并將引起轉化的物質(zhì)稱為 轉化因子 (tranforming principle)。 2022/2/14 湖北大學生命科學學院 陳建國 32 (二 )、轉化過程 ? 轉化現(xiàn)象在細菌中是一種普遍現(xiàn)象。 ? 實際上就是一個遺傳重組的過程。 ? 為了驗證這些原養(yǎng)型菌落產(chǎn)生的可能而進行的研究最終表明： 這些解釋均不成立 。 ? F因子可以在細菌細胞間進行轉移并傳遞遺傳物質(zhì)。 (圖，動畫 ) 2022/2/14 湖北大學生命科學學院 陳建國 58 2022/2/14 湖北大學生命科學學院 陳建國 59 部分二倍體中的單交換 2022/2/14 湖北大學生命科學學院 陳建國 60 部分二倍體中的雙交換 2022/2/14 湖北大學生命科學學院 陳建國 61 2. F因子及其在雜交中的行為 2022/2/14 湖北大學生命科學學院 陳建國 62 (三 )、用中斷雜交試驗 作染色體連鎖圖 ? 雅科等人在五十年代設計了中斷雜交試驗，以證明接合