細胞生物學研究方法4學時(參考版)
2025-01-19 20:19本頁面
【正文】 。 三、細胞工程 — — 細胞融合 單克隆抗體技術(shù) monoclonal antibody technique ? 英國人 Kohler和Milstein 1975年將兩種細胞雜交而創(chuàng)立了單克隆抗體技術(shù)，獲 1984年諾貝爾獎 顯微操作技術(shù) micromanipulation technique 第四節(jié) 細胞及生物大分子的動態(tài)變化 一、熒光漂白恢復(fù) （ fluorescence photobleaching recovery, FRP） 技術(shù) 熒光漂白恢復(fù)技術(shù) (fluorescence recovery after photobleaching, FRAP) 二、熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù) fluorescence resonance energy transfer 三、單分子技術(shù) single molecule techniques ? 光鑷 （ Optical tweezers） ? 磁鑷 （ magic tweezers） ? 原子力顯微鏡 （ atomic force microscopy） How do muscles produce works? ? 研究生物大分子在細胞內(nèi)合成、分布、定位等； ? 一般用 3H， 14C， 32P， 35S， 135I， 45Ca等； ? 放射性同位素標記 → 切片或涂片 → 曝光 → 觀察 五、放射自顯影技術(shù) radioautography 135I 四、酵母雙雜交 yeast twohybrid system ? 研究蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)之間的相互作用。 ? 傳代培養(yǎng) (passage)： 將細胞從一個培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到另外一個培養(yǎng)瓶即稱為傳代或 傳代培養(yǎng) 。 其它生化分離方法 紙色譜 柱色譜 親和色譜 Figure 342. SDS polyacrylamidegel electrophoresis (SDSPAGE). Figure 344. Separation of protein molecules by isoelectric focusing. Figure 345. Twodimensional polyacrylamidegel electrophoresis. 二、細胞內(nèi)核酸、蛋白質(zhì)、糖等成分的顯示方法 ? 為了對某些細胞成分進行定性和定位研究，利用染色劑可與細胞某種成分發(fā)生反應(yīng)而著色的原理加以顯示，稱為 組織化學和細胞化學染色 方法（ histochemical and cytochemical staining method） ； ? 如：細胞內(nèi) DNA和 RNA的原位顯示 Myofibrillar ATPase: Identifying Fast and Slow Fibers Succinate Dehydrogenase(琥珀脫氫酶 ): Identifying Oxidati ve Potential Promoter:GUS ? 是根據(jù)免疫學原理，利用抗體同特定抗原專一結(jié)合，對抗原進行定位測定的技術(shù)，常用的標記物有熒光素和酶
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