新手上路westernblot問題集合(參考版)
2025-01-18 09:10本頁面
【正文】 Westen blot相關(guān)試劑為生化即用型試劑，精準(zhǔn)配制，即到即用；[url]Westen blot相關(guān)試劑[/url]質(zhì)優(yōu)價(jià)低，原料品種齊全，規(guī)格多樣，提供了較優(yōu)的產(chǎn)品和服務(wù)。 3. 二抗室溫1小時(shí)，1:2000，或 4℃封閉過夜（室溫兩小時(shí)就夠），一抗室溫1小時(shí)，二抗室溫1小時(shí)，最好是一抗4℃過夜（或室溫2小時(shí)）1:200，二抗室溫1小時(shí)1:2000，換ECL法。 所用Marker可分離14116KD的蛋白，是否因?yàn)閙arker有問題？一抗（多克隆抗體）、二抗的濃度及孵育的時(shí)間是否合適？封閉的時(shí)間是否太短？A10：1. marker有可能被降解，也有可能是上樣量太少。 Q10: Western轉(zhuǎn)膜已經(jīng)成功了，但是Marker泳道未見蛋白條帶，其余各泳道均有清晰的蛋白條帶，經(jīng)考馬斯亮藍(lán)染膠，結(jié)果相同。把封閉的時(shí)間延長(zhǎng)，同時(shí)提高封閉液的濃度，可以減少以下背景噪音。 SDS—PAGE的時(shí)候，恒壓和恒流都可以用?？偟鞍卓既镜臅r(shí)候發(fā)現(xiàn)接近積層膠的條帶比較清楚，條帶也很窄，可是越靠下面的條帶越來越寬，有的跑得都連在一起，這種現(xiàn)象是正常的。 Q7: 半干法轉(zhuǎn)移與膠的面積和蛋白分子兩大小有一定關(guān)系，那么濕法轉(zhuǎn)移是不是所有的轉(zhuǎn)移條件都一樣呢？一般的條件
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