生物化學(xué)第二章ppt課件(參考版)
2025-01-18 03:47本頁面
【正文】 蛋白質(zhì)質(zhì)量濃度 /（ mg/ml） = 280 260 測定范圍： ～ 。 表征 ：生物活性喪失；物理性質(zhì) （ 溶解度 、 粘度 、 擴散系數(shù) 、 光譜特性等 ）和化學(xué)性質(zhì) （ 化學(xué)反應(yīng) ， 被酶解性 ） 改變 應(yīng)用 ：變性滅菌 、 消毒；變性制食品；抗衰老 …… ● 蛋白質(zhì)的變性作用如果不過于劇烈 ， 則是一種可逆過程 ， 變性蛋白質(zhì)通常在除去變性因素后 ， 可緩慢地重新自發(fā)折疊成原來的構(gòu)象 ， 恢復(fù)原有的理化性質(zhì)和生物活性 ， 這種現(xiàn)象成為 復(fù)性 （ renaturation） 。 沉淀方法類別 : 高濃度中性鹽 （ 鹽析 ） 有機溶劑沉淀 （ 丙酮 、 乙醇等 ） 重金屬鹽類沉淀 （ Cu2+、 Hg2+、 Pb2+、 Ag+） 生物堿試劑和某些酸類沉淀 加熱變性沉淀 四、 蛋白質(zhì)變性與復(fù)性 ● 蛋白質(zhì)因受某些物理或化學(xué)因素的影響 ， 分子的空間構(gòu)象被破壞， 從而導(dǎo)致其理化性質(zhì)發(fā)生改變并失去原有的生物學(xué)活性的現(xiàn)象稱為蛋白質(zhì)的 變性作用 （ denaturation） 。 另外，當(dāng)在蛋白質(zhì)溶液中加入中性鹽的濃度較低時，蛋白質(zhì)溶解度會增加，這種現(xiàn)象稱為 鹽溶 （ salting in），這是由于蛋白質(zhì)顆粒上吸附某種無機鹽離子后，使蛋白質(zhì)顆粒帶同種電荷而相互排斥，并且與水分子的作用加強，從而溶解度增加。 鹽析法 :在蛋白質(zhì)溶液中加入高濃度的硫酸銨、氯化鈉等中性鹽，可有效地破壞蛋白質(zhì)顆粒的水化層。 蛋白質(zhì)膠體性質(zhì)的應(yīng)用 透析法 :利用蛋白質(zhì)不能透過半透膜的的性質(zhì)，將含有小分子雜質(zhì)的蛋白質(zhì)溶液放入透析袋再置于流水中，小分子雜質(zhì)被透析出，大分子蛋白質(zhì)留在袋中，以達到純化蛋白質(zhì)的目的。 蛋白質(zhì)分子在非等電狀態(tài)時帶有同性電荷，即在酸性溶液中帶有正電荷，在堿性溶液中帶有負電荷。 蛋白質(zhì)分子表面有許多極性基團，這些基團與水有高度親和性，很容易吸附水分子。 可溶性蛋白質(zhì)分子表面分布著大量極性氨基酸殘基 ， 對水有很高的親和性 ， 通過水合作用在蛋白質(zhì)顆粒外面形成一層 水化層 ， 同時這些顆粒帶有 電荷 ， 因而蛋白質(zhì)溶液是相當(dāng)穩(wěn)定的親水膠體 。 由于各種蛋白質(zhì)的等電點不同，所以在同一 pH 溶液中帶電荷不同，在電場中移動的方向和速度也各不相同，根據(jù)此原理就可利用 電泳的方法 將混合的各種蛋白質(zhì)分離開。如果蛋白質(zhì)中堿性氨基酸較多，則等電點 偏堿 ，如果酸性氨基酸較多，等電點 偏酸 。 血紅蛋白輸氧功能和構(gòu)象變化 O2 Hb Hb O2 O2 血紅蛋白和肌紅蛋白的氧合曲線 活動肌肉毛細血管中的 PO2 0 20 40 60 80 100 肺泡中的 PO2 肌紅蛋白 血紅蛋白 氧分壓 氧飽和度 第六節(jié) 蛋白質(zhì)的重要性質(zhì) 一 、 兩性解離性質(zhì)及等電點 二 、 蛋白質(zhì)膠體性質(zhì) 三、 蛋白質(zhì)的沉淀 四、 蛋白質(zhì)的變性與復(fù)性 五、 蛋白質(zhì)的紫外吸收特性 六、 蛋白質(zhì)呈色反應(yīng) 一、蛋白質(zhì)兩性解離性質(zhì)和等電點 pH = pI 凈電荷 =0 pH pI 凈電荷為正 pH pI 凈電荷為負 Pr COOH NH3+ + H+ + OH + H+ + OH Pr COO NH2 Pr COO NH3+ 當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)溶液在某一定 pH值時 ， 使某特定蛋白質(zhì)分子上所帶正負電荷相等 ， 成為兩性離子 ， 在電場中既不向陽極也不向陰極移動 ， 此時溶液的 pH值即為該蛋白質(zhì)的等電點 （ isoelectric point， pI） 。變構(gòu)現(xiàn)象是蛋白質(zhì)表現(xiàn)其生物功能的一種普遍而十分重要的現(xiàn)象，也是調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)生物功能的極為有效的方式。 不同生物與人的 Cytc的 AA差異數(shù)目 生物 與人不同的 AA數(shù)目 黑猩猩 0 恒河猴 1 兔 9 袋鼠 10 牛、豬、羊、狗 11 馬 12 雞、火雞
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