分子生物學緒論第一章a(參考版)
2025-01-16 07:34本頁面
【正文】 分析儀器 實現(xiàn)了凝膠電泳、初始數(shù)據獲取、堿基閱讀等步驟自動化。最后通過克隆片段的重疊組裝確定大片段 DNA序列。 ddNTP的作用 方法過程 ddNTP與 dNTP 聚丙烯酰胺凝膠電泳 ? DNA聚合酶 ? 單鏈 DNA模板 ? 單鏈寡核苷酸引物 ? Mg2+ ? 4種 dNTP (dATP,dGTP,dCTP和 dTTP) ? 4種 ddNTP (ddATP,ddGTP,ddCTP和 ddTTP) 反應體系 DNA序列測定策略 定向測序 是從大片段 DNA的一端開始按順序進行分析 。 對這 4組核苷酸進行聚丙烯酰胺凝膠電泳區(qū)分長度差一個核苷酸的單鏈 DNA ，可讀出序列 。 在 DNA合成反應中除了加入 4種正常 dNTP外 ， 再加入 1種少量的 ddNTP， 反應產物是一系列長短不一的核苷酸鏈 。 核酸探針（ Nucleic acid probe） 常用的核酸分子雜交方法 Southern印跡雜交（ Southern bloting） Northern 印跡雜交（ Northern bloting） 斑點雜交（ dot blotting） 原位雜交（ in situ hybridization） 五、 DNA序列分析及進展 DNA序列分析技術是揭開生命奧秘的一把金鑰匙 吳瑞士 引物 延伸測序策略 1971年首次成功地測定了λ 噬菌體兩個粘性末端的完整序列。 DNA/DNA DNA/RNA 根據核酸分子雜交的原理，有目的地人工制備或從基因組中分離一段已知序列的 DNA，使其帶上標記，經變性后成為單鏈，在一定條件下與待測 DNA單鏈雜交，如兩者序列有同源性，就形成帶有標記的雙鏈 DNA分子，即檢測到了待測的 DNA。 ３、 DNA濃度越大，兩條互補鏈彼此相遇的可能性越大，復性速度也越快。 ＤＮＡ復性的特點 你知道影響ＤＮＡ復性速度的因素有哪些嗎？ 判斷： １、 DNA片段小的比大的容易復性。 增色效應 同一種 DNA分子在不同離子強度溶液中其 Tm值不同 你還記得影響ＤＮＡ變性的因素有哪些嗎？ 變性的 DNA重新恢復為雙螺旋的過程 ， 叫做復性或退火 。 熔解
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