高中生物選修專題一基因工程(參考版)
2025-01-12 13:14本頁(yè)面
【正文】 —— 個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定 抗蟲(chóng)、抗病結(jié)種實(shí)驗(yàn)，活性比較實(shí)驗(yàn) 不能，受體細(xì)胞必須表現(xiàn)出特定的性狀，才能說(shuō)明目的基因完成了 表達(dá) 。 提取 （ 3）檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì) 方法：抗原 抗體雜交 蘇云金桿菌 Bt毒素蛋白 將 Bt毒蛋白注射小鼠體內(nèi) 從小鼠血管抽出血液分離出抗 Bt毒素的抗體 抗體 蛋白質(zhì) 出現(xiàn)雜交帶 脫分化 組織培養(yǎng) 證明： 提取蛋白質(zhì)與 Bt毒素蛋白質(zhì)一樣 例：用棉鈴飼喂棉鈴蟲(chóng)，如蟲(chóng)吃后不出現(xiàn)中毒癥狀，說(shuō)明未攝入目的基因或攝入目的基因未表達(dá)。小圖為微粒載片和阻擋網(wǎng)。其原理和聲音都與鳥(niǎo)槍相仿，成功率僅為千分之八。 基因槍法： 利用壓縮氣體產(chǎn)生的動(dòng)力 ，將包裹在金屬粒表面的表達(dá)載體 DNA打入受體細(xì)胞中，使目的基因與其整合并表達(dá)的方法 ① 操作方法： ② 金屬粒： 將目的基因?qū)雴巫尤~植物細(xì)胞 鎢粉粒子和金粉粒子，粒子的直徑一般在 ～ 4um 。 （ 2）將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞 —— 顯微注射法。 （ 1） 將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞 ③ 基因槍法：?jiǎn)巫尤~植物。 (3)終止子 (4)標(biāo)記基因 (2)啟動(dòng)子 (1)目的基因 不同受體細(xì)胞，目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法不同，基因表達(dá)載體的構(gòu)建有所差異。 (3)用化學(xué)方法直接 人工合成目的基因 蛋白質(zhì)氨基酸序列 →mRNA 的核苷酸序列 → 目 的基因序列 → 目的基因 針對(duì)：基因比較小，核苷酸序列又已知 推測(cè) 化學(xué)合成 推測(cè) ： 二 . 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 —— 核心 IMN ： ①使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并遺傳給子代。 （ 2） 應(yīng)用 PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因 ① 定義： ② 原理： DNA復(fù)制 PCR是多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定 DNA片段的核酸合成技術(shù)，在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因 DNA分子熱變性（在 90～ 95 OC時(shí)，解旋，雙鏈分開(kāi)溫度降低又結(jié)合成雙鏈）因此，在PCR技術(shù)中 不需要解旋酶 （與復(fù)制不同之在處 ) ③ 儀器： PCR擴(kuò)增儀（自動(dòng)調(diào)控溫度的儀器） ④ 條件： 有一段已知的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物，脫氧核苷酸，酶等。 第三步：以單鏈 DNA為模板，在 DNA聚合酶的作用下合 成另一條互補(bǔ)的 DNA鏈，形成雙鏈 DNA分子。 基因組文庫(kù)的建立方法 提取某種生物的全部 DNA 用適當(dāng)?shù)南拗泼该盖? 一定大小的 DNA片段 將 DNA片段與運(yùn)載體連接 導(dǎo)入受體菌中儲(chǔ)存（ 基因組文庫(kù)） 目的基因 分離 部分基因文庫(kù)的建立方法
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