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正文內(nèi)容

高中生物選修專題一基因工程(參考版)

2025-01-12 13:14本頁面
  

【正文】 —— 個體生物學(xué)水平的鑒定 抗蟲、抗病結(jié)種實(shí)驗(yàn),活性比較實(shí)驗(yàn) 不能,受體細(xì)胞必須表現(xiàn)出特定的性狀,才能說明目的基因完成了 表達(dá) 。 提取 ( 3)檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì) 方法:抗原 抗體雜交 蘇云金桿菌 Bt毒素蛋白 將 Bt毒蛋白注射小鼠體內(nèi) 從小鼠血管抽出血液分離出抗 Bt毒素的抗體 抗體 蛋白質(zhì) 出現(xiàn)雜交帶 脫分化 組織培養(yǎng) 證明: 提取蛋白質(zhì)與 Bt毒素蛋白質(zhì)一樣 例:用棉鈴飼喂棉鈴蟲,如蟲吃后不出現(xiàn)中毒癥狀,說明未攝入目的基因或攝入目的基因未表達(dá)。小圖為微粒載片和阻擋網(wǎng)。其原理和聲音都與鳥槍相仿,成功率僅為千分之八。 基因槍法: 利用壓縮氣體產(chǎn)生的動力 ,將包裹在金屬粒表面的表達(dá)載體 DNA打入受體細(xì)胞中,使目的基因與其整合并表達(dá)的方法 ① 操作方法: ② 金屬粒: 將目的基因?qū)雴巫尤~植物細(xì)胞 鎢粉粒子和金粉粒子,粒子的直徑一般在 ~ 4um 。 ( 2)將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞 —— 顯微注射法。 ( 1) 將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞 ③ 基因槍法:單子葉植物。 (3)終止子 (4)標(biāo)記基因 (2)啟動子 (1)目的基因 不同受體細(xì)胞,目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法不同,基因表達(dá)載體的構(gòu)建有所差異。 (3)用化學(xué)方法直接 人工合成目的基因 蛋白質(zhì)氨基酸序列 →mRNA 的核苷酸序列 → 目 的基因序列 → 目的基因 針對:基因比較小,核苷酸序列又已知 推測 化學(xué)合成 推測 : 二 . 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 —— 核心 IMN : ①使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并遺傳給子代。 ( 2) 應(yīng)用 PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因 ① 定義: ② 原理: DNA復(fù)制 PCR是多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定 DNA片段的核酸合成技術(shù),在短時間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因 DNA分子熱變性(在 90~ 95 OC時,解旋,雙鏈分開溫度降低又結(jié)合成雙鏈)因此,在PCR技術(shù)中 不需要解旋酶 (與復(fù)制不同之在處 ) ③ 儀器: PCR擴(kuò)增儀(自動調(diào)控溫度的儀器) ④ 條件: 有一段已知的基因的核苷酸序列,以便根據(jù)這一序列合成引物,脫氧核苷酸,酶等。 第三步:以單鏈 DNA為模板,在 DNA聚合酶的作用下合 成另一條互補(bǔ)的 DNA鏈,形成雙鏈 DNA分子。 基因組文庫的建立方法 提取某種生物的全部 DNA 用適當(dāng)?shù)南拗泼该盖? 一定大小的 DNA片段 將 DNA片段與運(yùn)載體連接 導(dǎo)入受體菌中儲存( 基因組文庫) 目的基因 分離 部分基因文庫的建立方法
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