【正文】 低價、毒性小、純度高。 對樣品有很強的溶解力。 2022/2/4 色譜分析 1 176 1. 色譜流動相的基本要求 保持色譜柱的穩(wěn)定性，因而： 1) 與固定相不互溶 （延長柱壽命） 2) 不發(fā)生不可逆吸附 3) 有合適的 pH值 化學惰性 —— 不與樣品及固定相發(fā)生反應。 167。 高純氣體可為首選。 不純載氣有時會產(chǎn)生負峰。有人用氨做載氣，效果還不錯。 2022/2/4 色譜分析 1 171 3. 載氣粘度的影響 載氣粘度直接影響柱壓降，進而影響柱效。 國外氫焰離子化檢測器也用氦氣。 最好用氦氣，用氫氣比較危險。 低流速時重載氣為好，柱效高。 GLC：影響氣相速率方程的傳質(zhì)阻力相，需要合理選擇載氣種類。 2022/2/4 色譜分析 1 166 流動相的基本情況 流動相的物理、化學性質(zhì)及其純度將直接影響到色譜系統(tǒng)的： 1) 穩(wěn)定性 2) 分離效率 3) 分離速度 4) 檢測靈敏度 2022/2/4 色譜分析 1 167 流動相的基本種類 GC—— 永久性氣體 HPLC—— 各種低沸點有機溶劑及水溶液 2022/2/4 色譜分析 1 168 167。 2022/2/4 色譜分析 1 161 海水中有機氯農(nóng)藥的殘留量 檢測： 八個組分依次為： αHCH、 βHCH、 γHCH、δHCH、 ρ,ρ’DDE、 ρ,ρ’DDD、 ο,ρ’DDT、ρ,ρ’DDT DB1701， 30m (id) ； 柱溫： 70℃ 保持 1min，以15℃ /min升至 220℃ ，保持 10min； 2022/2/4 色譜分析 1 162 高效感溫型殺螨劑 —— 苯丁錫原藥甲醇萃取物的 GCMS總離子流圖 14:50的為雙 （ 2甲基 2苯基丙基 ） 錫 23:62的為 二 (2甲基 2苯基丙基 )叔丁基 氫化錫 R T : 2 . 9 8 2 5 . 6 24 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24T i m e (m i n )05101520253035404550556065707580859095100Relative Abundance1 3 . 5 68 . 0 79 . 4 42 3 . 6 21 3 . 9 98 . 1 82 3 . 9 12 3 . 2 11 1 . 4 9 2 2 . 4 42 1 . 5 31 7 . 9 92 0 . 3 11 4 . 5 0 1 6 . 3 01 2 . 1 31 1 . 3 45 . 1 9 6 . 3 9 7 . 2 5 9 . 5 98 . 2 43 . 6 6NL:2 . 7 8 E6T I C M S b e n d i n g x i za z h i _ 0 2HP5色譜柱 (30m ) 柱溫： 50℃ →3min→ 15℃ /min→240 ℃ →10min ， 2022/2/4 色譜分析 1 163 梔子花頭香成分 萜烯類化合物 （ 如羅勒烯 ， 香葉烯 ） 共 28種 ， 占 ％ ；酯類化合物 （ 如惕各酸酯類 ， 苯甲酸酯類 ） 共 21種 ， 占總揮發(fā)性化合物的 ％ ；醇類化合物 （ 如芳樟醇 ， 6十一醇 ） 共9種 ， 其含量占 ％ 。微填充柱寬有很高的柱效，最低板高可達 ~。 大口徑毛細管柱：一般口徑在 米，液膜厚度為 ~，負載大，可不經(jīng)分流而直接進樣分析。 熔融石英毛細管柱 (FSOT—— Fused Silica Open Tubular Column) ：其表面惰性度好，能耐高溫，最主要的是有彈性，不易折斷。 載體壁涂柱（ SCOT—— Support Coated Open Tubular Column）：把載體和固定液同時涂于壁上制備而成。 其他的幾種柱子及其性能如下 。 2022/2/4 色譜分析 1 157 毛細管柱的種類 經(jīng)典的毛細管柱為壁涂開管柱 (WCOT——Wall Coated Open Tubular Column)。 曾經(jīng)用示波儀或電流計型記錄器記錄 ，其滿刻度筆速 。 也可應用特制的微型熱絲檢測器，微型熱敏電阻檢測器，但因其屬于非商品化檢測器，使用頻率不高。（靈敏度高，死體積趨近于零，響應時間快等。 快速分析時因峰寬只有幾秒或少于 1秒 ，要求檢測器 、 記錄器響應時間快 ， 則檢測器和記錄器的時間常數(shù) ， 應少于最早峰峰寬的流出時間的 1/20。 增加尾吹氣將改善這一狀況。 2022/2/4 色譜分析 1 153 尾吹 毛細管柱內(nèi)流動相流速低，流量小，組分會因柱后死體積突然增加而發(fā)生嚴重的縱向擴散，從而導致峰形展寬，有可能使在柱中以分離的組分在柱后再次重疊，影響分離。 2022/2/4 色譜分析 1 152 HP6820系統(tǒng)的分流裝置 此為不分流模式。此為分流模式。 注意 在分流前要有一段混合體積，內(nèi)裝硅烷化玻璃球，可保證分流后組成不失真。這種分流器只是在進樣時才打開開關(guān)閥，幾秒鐘后就關(guān)閉大部分載氣，而留下一點出氣，防止試樣反擴散進柱中。 2022/2/4 色譜分析 1 149 A為氣化樣品與載氣混合部分， B為分流點， C為噴嘴 引起放空部分與進入部分在分流過程中進一步混合，確保寬沸程樣品分流后不失真。 2022/2/4 色譜分析 1 146 A． 動態(tài)分流法 是目前毛細管柱進樣系統(tǒng)最常用的分流方法，不同儀器上的分流有不同的形式。 分析不同濃度的混合物時 ， 峰面積必須正比于濃度 。 分流法又分為 動態(tài)法 和 靜態(tài)法 兩種 。 要引進如此微量樣品 ， 可采用分流法進樣 。 因毛細管柱內(nèi)徑細 ， 柱容量小 ， 出峰快 、峰形窄 ， 因此對色譜儀本身 (如進樣系統(tǒng) 、檢測器 、 記錄器等 )有些特殊的要求 。 故： 毛細管柱上可實現(xiàn)快速分析 。 2022/2/4 色譜分析 1 142 分析時間 根據(jù)公式 ,樣品的保留時間正比于柱長 ， 在以氮為載氣時 ， 毛細管柱的線速可達 16厘米 /秒 ，而填充柱在 4厘米 /秒 毛細管柱可采用很高的載氣線速來縮短保留時間 。即 毛細管柱色譜總效高，其分離效能也高 。 填充柱每米塔片數(shù)在 1000－ 1500之間 ， 長 2米的填充柱的柱效為 2022－ 3000 ★ 所以毛細管柱的總柱效可以比填充柱高 10－100倍 。 可見 ， 一根 2米長的填充柱中固定液的含量是一根20米長毛細管柱中固定液含量約 150倍 ， 故允許進樣量也在一百倍以上 。 2022/2/4 色譜分析 1 137 一根色譜柱的最大允許進樣量，約為一塊理論板的有效體積。 每根柱有確定值 對毛細管柱，取決于色譜柱中固定液的含量。 D ( m m ) 0 . 5 0 . 3 3 0 . 2 1 0 . 1N / L 2022 3000 5000 100002022/2/4 色譜分析 1 134 3．載氣線速 從速率方程可知 ， 最小板高時的最佳線速為： 如果 Cl很小 ， 則有： lgopt CCBU??221161)1(34KKKrDCBUggopt?????2022/2/4 色譜分析 1 135 可見，細管徑，輕載氣更適合于快速分析。 式中 Cg、 C1的大小取決于分配系數(shù)及柱的幾何性 （ 以相比 β為代表 ） ， 但一般毛細管柱液膜薄 ， β值較大 ， 液相傳質(zhì)阻力C1項不起控制作用 。其表達式為： 2022/2/4 色譜分析 1 129 UDdKKUDKdKUrDdH fgpgp122222)1(32)1(22?????? ?UDdkkUkkkDrUDHlfgg22222)1(32)1(2411612???????????????填充柱： 毛細管柱： 2022/2/4 色譜分析 1 130 在毛細管柱，柱內(nèi)只有一個流路，故多徑項 2?dp為 0，彎曲因子 ?=1，且用其液膜厚代替了填充柱中載體的顆粒直徑 dp。 ⊕ 毛細管柱完全沒有這些缺陷，故理論板數(shù)可高大 106數(shù)量級。 2022/2/4 色譜分析 1 126 其獨特的特點在于： ◇ 滲透性大，分析速度快 ◇ 傳質(zhì)阻力小，可用長柱，并得高的總柱效。 這種柱子稱為 “ 無限直徑 ” 柱 。 這種進樣方式把一個尖細的樣品脈沖送到柱中心 ， 在此樣品脈沖向出口移動時 ， 始終保持它的完整性 ， 不接觸柱壁 。 這種現(xiàn)象稱為 壁效應 。 一部分樣品很快到達柱壁區(qū)域 。 2022/2/4 色譜分析 1 118 1. 壁效應 采用通常進樣方式時 ， 樣品和流動相一起加到柱入口 。 2022/2/4 色譜分析 1 117 高效液相色譜的進樣問題 液相色譜的進樣系統(tǒng) ， 由于其柱壓力高 ， 不可能采用直接進樣法 ， 只能用進樣閥進樣 。 其作用是吸著強滯留的組分 ， 防止對分析柱的污染 ， 保持分析柱性能穩(wěn)定 。 為了延長柱壽命 ， 在進樣閥和分析柱之間加上衛(wèi)柱 。 2022/2/4 色譜分析 1 116 液相色譜柱的保養(yǎng) 8． 使用衛(wèi)柱 (Guard Column,亦稱預柱 )。 為了長期保存 ， 最好用純有機溶劑 （ 如甲醇 ）清洗柱子 。 6． 柱子兩端用金屬螺帽封閉 ， 保存在純凈的有機溶劑中 。 4． 應該用進樣閥 ， 而不用注射器進樣 ， 以防止注射隔膜碎屑集聚在柱入口 。 若空穴形成 ， 應重新裝柱 。 2022/2/4 色譜分析 1 114 液相色譜柱的保養(yǎng) 3． 柱子的實際操作壓力應低于填裝時的最高壓力 ， 最好在最高壓力的一半以下 。 堵塞最容易發(fā)生在極窄的入口接頭處以及入口 、 出口篩板處 。 顯然 ， 抑制劑不能干擾分離和測定 。 在水溶液流動相（ 如緩沖液 ） 中 ， 細菌容易生長 ， 可能堵塞篩板 。 在流動相貯槽與柱之間 ， 使用 。 為了保持柱效 、 柱容量及滲透性 ， 必須進行仔細地保養(yǎng) 。 一根柱子使用是否得當 ， 直接影響它的柱效和壽命 。 使其不能到達 FID噴嘴 ?色譜柱到進樣口安裝位置不正確 . 使其不能到達進樣口 ?色譜柱到進樣口及檢測器的位置安裝正確 108 2022/2/4 色譜分析 1 109 色譜柱安裝到進樣口 評定因素 ?安裝深度 柱到針的間隙 ? 按照廠方的介紹 , ? 在進樣針頭到柱保留 12厘米的間隙 ?對分析物和樣品基質(zhì)選擇適用的襯管 ?使用專用的柱切割器 ?保證所有的柱接頭及其它接口不漏 高效液相色譜法的相關(guān)情況 2022/2/4 色譜分析 1 111 液相色譜柱的保養(yǎng) 柱的穩(wěn)定性與固定相類型及使用情況有關(guān) 。 2022/2/4 色譜分析 1 98 F、其他柱子 現(xiàn)在多采用毛細管柱進行分離 ， 它的處理以后專門論述 。 2022/2/4 色譜分析 1 97 E. 固定相的填充 一般采用泵抽法填充 ， 在柱的一端 （ 以后接檢測器那端 ） 填入少量玻璃棉后用布包緊 ， 接上真空泵抽氣 ， 另一端用小漏斗加入固定相 ， 在不斷輕輕敲擊柱身中直至填滿 。 試漏 方法：將柱出口堵死后浸在水里 ， 通氣 ，在高于操作壓力下 ， 不應有氣泡冒出 。 2022/2/4 色譜分析 1 96 D. 色譜柱柱體的選擇，試漏和清洗 填充色譜柱一般是玻璃柱或不銹鋼柱(3~4mm 1~4m)， 根據(jù)實驗條件 (如柱壓柱溫 )和樣品性質(zhì) (如反應性能 、 腐蝕性等 )選擇合適柱材 ， 現(xiàn)多為螺旋形 (螺旋直徑與柱內(nèi)徑之比一般為 15： 1到 25： 1)。 2022/2/4 色譜分析 1 95 C. 固定液的涂漬與老化 涂漬完畢還需進行 老化 處理 ， 其目的有二：徹底除去填充物中的殘余溶劑 和 某些揮發(fā)性雜質(zhì) ， 促進固定液均勻牢固地分布于載體表面 。 固定液一般采用動態(tài)法 涂漬 ：涂漬須在通風柜進行 。 2022/2/4 色譜分析 1 94 C. 固定液的涂漬與老化 色譜柱質(zhì)量還與固定液能否均勻分布在載體表面以及填充情況有密切的關(guān)系 。 低于此溫度 ， 固定液溶解被測組份的能力降低 ，或分離效果很差 。 超過最高使用溫度可能使固定液變質(zhì) ， 產(chǎn)生流失現(xiàn)象或者縮短色譜柱的壽命 。 2022/