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均相酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)ppt課件(參考版)

2025-01-08 09:11本頁(yè)面
  

【正文】 ( 2)判斷半乳糖對(duì)此反應(yīng)是競(jìng)爭(zhēng)性還是非競(jìng)爭(zhēng)性抑制? K+1 K1 K+2 K+3 K3 思考題 3. 下列反應(yīng)為一有產(chǎn)物抑制的酶催化反應(yīng): E+S ES E+P EP ES+P ESP EP+S EPS ES E+P ( 1)根據(jù)平衡假設(shè),推導(dǎo)其速率方程; ( 2)如果 [ESP]=[EPS],推導(dǎo)的方程如何簡(jiǎn)化? ( 3)如果存在 k1/k+1=k4/k+4和 k2/k+2=k3/k+3的關(guān)系則由( 2)求得的方程中最大速率和米氏常數(shù)如何表示? K+1 K1 K+2 K2 K+3 K3 K+4 K4 K+5 。 思考題 2. Scott等提出乳糖在乳糖酶存在時(shí)水解機(jī)理如下: E+S ES E+P+Q E+P EP 式中 S、 P、 Q——分別為乳糖、半乳糖和葡萄糖。 ?至少有一個(gè)產(chǎn)物在所有底物完成反應(yīng)之前從酶的結(jié)合位點(diǎn)釋放 . 反應(yīng) A與 E結(jié)合 P與E釋放 B與 E結(jié)合 反應(yīng) Q與E釋放 生成產(chǎn)物 P 生成產(chǎn)物 Q III. pingpong Bi Bi mechanisms A relationship between E and E’ can also be obtained, assuming a steady state in the concentration of E’ then, Relationship of v and [B] where and Fixed substrate concentration dependence for enzymes displaying pingpong mechanisms dependence of V’max on [B] dependence of K’ on [B] Fixed substrate concentration dependence for enzymes displaying pingpong mechanisms Relationship of v and [A] where and dependence of V’max on [A] dependence of K’ on [A] Differentiation Between Mechanisms Relationship of the K’ and [A] or [B] 思考題 1. 某一酶催化反應(yīng)的 Km值為 105mol/L,Vmax=22μmol/(L I. Random sequential Bi Bi mechanisms 反應(yīng) 底物 A,B與酶 E結(jié)合 產(chǎn)物 P,Q從酶的結(jié)合點(diǎn) 釋放 I. Random sequential Bi Bi mechanisms Bimolecular substrates Bimolecular products A useful relationship exists among above constants Rearrangement, (a) Relationship of v and [A] From eq(a), then Relationship of v and [B] Fixed substrate concentration dependence for enzymes displaying randomsequential mechanisms. Dependence of V’max on [A] Dependence of K’ on [A] Dependence of V’max on [B] Dependence of K’ on [B] II. Ordered sequential Bi Bi mechanisms ?所有底物 (A和 B)與酶結(jié)合后,反應(yīng)才能發(fā)生; ?各底物與酶的結(jié)合及產(chǎn)物與酶的釋放是 按一定次序進(jìn)行 的。已知反應(yīng)速率方程為 : 解:在分批式反應(yīng)器中 ][][SSvS ??? 1][][d]d[SStSvS ????? 1?即: ]d[ ][ ][1 d SS St SSt ?? ???00積分得到: ])[]([][ ][ln SSSSt ??? 00轉(zhuǎn)化率為 90%,即 ([S0][S])/[S0]=, [S]= m i n .).(.ln 1420220 2 ????t例 22:假設(shè)某酶有兩個(gè)活性中心,它的反應(yīng)機(jī)制可用下圖表示,試根據(jù)穩(wěn)態(tài)假設(shè),求其速率方程式 E + S [ES] + S E + P [ESS] Km KSI [ES] + P k+2 k+2 解:根據(jù)解離平衡過(guò)程可得 ][]][[ ,][]][[E S SSESKESSEKSIm ??根據(jù)酶的質(zhì)量守恒可得 ][][][][ E S SESEE ???0將上面兩式變換后可得 SIm K SESESSESKE ]][[][][ ][][ ???0變換方程可以得到以下兩式: SImSISISImKSSKKSEKSESES SKSSKEES][][]][[]][[][ ,][][][][???????1100][][dd E S SkESktP 22 ?? ???SImSIKSSKKSVtPv][][)(dd m a x?????1111 20202?????? ??][][][][][][ddSKSKKEkKSSKEktPSISImSIm當(dāng)反應(yīng)速率達(dá)到最大時(shí), 所有的酶都以復(fù)合物的形式存在, 則 [E0]=[ES]+[ESS], Vmax=k+2([ES]+[ESS])=k+2[E0] 例 23:某酶催化反應(yīng),其 Km= mol/L,現(xiàn)測(cè)得該反應(yīng)進(jìn)行到 10 min時(shí),底物濃度為 105 mol/L,已知[S0]= 104 mol/ MM方程表示。 Ea 是反應(yīng)活化能 (kcal/mol). R 是氣體常數(shù) T 是絕對(duì)溫度, A是前因子 2. 熱失活作用 (下降區(qū) ) (酶的熱變性作用 ) 酶的熱變性失活符合一級(jí)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)方程: ][][ EkdtEd d??式中 [E0] 酶的初始濃度 。 這是由于溫度升高,雖然可加速酶的催化反應(yīng)速率,同時(shí)也加快了酶的熱失活速率。 pHactivity profiles of two enzymes. (A)胃蛋白酶 。 E +
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