電鏡樣品的制備(2)(參考版)
2025-05-13 22:27本頁(yè)面
【正文】 切割 斷裂：界面 斷開(kāi) 蝕刻：表面 剝離 表面剝離使內(nèi)部結(jié)構(gòu)暴露 花粉破壁 。 （ 6）清洗、修整、干燥 (37℃ 1h)、即可鍍膜觀察。 （ 4）灌注鑄型： 控制注入壓力 ，確保完全注入而不變形 。 （ 2）器官處理：摘取新鮮器官，生理鹽水由動(dòng)脈注入清洗， 1%戊二醛灌流固定，確保效果。 ： （ 1）鑄型劑：聚氯乙烯、甲基丙烯酸、丙烯酸單體、樹(shù)脂 類、工程塑料。 ： 方法：干燥的樣品 →雙刀切割 →粘樣鍍膜 →觀察 新切面 一、組織內(nèi)部結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)易剖出法： 適用于肝臟等實(shí)質(zhì)性器官以及密度大的組織 ： 方法：切痕 →掰開(kāi) →粘樣 →鍍膜觀察 適用于纖維組織、顆粒樣品 方法：干燥 →粘樣 →拉斷 →鍍膜觀察 二、環(huán)氧樹(shù)脂割斷法 ： 環(huán)氧樹(shù)脂 包埋樣品 固 化 敲 斷 溶去 樹(shù)脂 干燥 鍍膜 觀 察 80℃ 小錘敲擊刀背 三、冷凍割斷法： 常用二甲基亞砜 (DMSO)冷凍割斷法 取材 固定 清 洗 保護(hù) 包埋 固 化 斷 裂 融化 保護(hù)液 清洗 干燥 鍍膜 觀察 DMSO過(guò)渡， %， 25%， 50% 各 20~30分鐘， 緩沖液 液氮 冷卻 敲擊 斷裂 50%DMSO 四、管道鑄型法 為觀察 腔形器官 內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)的 立體構(gòu)筑 和 分布情況 ， 而設(shè)計(jì)的制樣方法。 應(yīng)用：微生物樣品的處理 液體培養(yǎng)基 的菌落 固體培養(yǎng)基 的菌落 ,先 滴固定液 刮下 菌落 8000離心2~5分鐘 常規(guī)固定 脫水干燥 粘樣鍍膜 細(xì)菌 霉菌 切割菌落 戊二醛固定 常規(guī)脫水干燥 桿菌 10μm 球菌 10 μm 曲霉 20 μm 酵母菌 5 μm 第二節(jié) 特殊要求的掃描制樣技術(shù) —— 組織細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)觀察法 切斷法：多孔組織 掰開(kāi)法：實(shí)質(zhì)性組織 拉斷法：纖維組織 簡(jiǎn)易剖出法 環(huán)氧樹(shù)脂割斷法 ： 冷凍割斷法 ： 管道鑄型法：腔形器官的立體構(gòu)架 內(nèi)部結(jié)構(gòu)剖出法 離子蝕刻法 ： 利用離子流破壞作用，使樣品表面剝離， 從而暴露出樣品的內(nèi)部結(jié)構(gòu) 。 目的 ： 改善生物樣品的導(dǎo)電性；提高二次電子的產(chǎn)額， 改善圖像的反差、亮度、分辨率，從而改善了 圖像的質(zhì)量；并增強(qiáng)了樣品
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