【正文】 、圖表要求： 1）文字通順，語言流暢，書寫字跡工整，打印字體及大小符合要求，無錯(cuò)別字，不準(zhǔn)請他人代寫 2）工程設(shè)計(jì)類題目的圖紙，要求部分用尺規(guī)繪制，部分用計(jì)算機(jī)繪制，所有圖紙應(yīng)符合國家技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范。 作者簽名： 日期： 年 月 日 導(dǎo)師簽名： 日期： 年 月 日 25 注 意 事 項(xiàng) （論文）的內(nèi)容包括： 1）封面（按教務(wù)處制定的標(biāo)準(zhǔn)封面格式制作） 2）原創(chuàng)性聲明 3）中文摘要（ 300 字左右）、關(guān)鍵詞 4）外文摘要、關(guān)鍵詞 5）目次頁（附件不統(tǒng)一編入） 6）論文主體部分：引言（或緒論）、正文、結(jié)論 7）參考文獻(xiàn) 8）致謝 9）附錄（對論文支持必要時(shí)） ：理工類設(shè)計(jì)（論文）正文字?jǐn)?shù)不少于 1萬字（不包括圖紙、程序清單等），文科類論文正文字?jǐn)?shù)不少于 萬字。本人授權(quán) 大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。本人完全意識到本聲明的法律后果由本人承擔(dān)。除了文中特別加以標(biāo)注引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫的成果作品。 作 者 簽 名： 日 期： 指導(dǎo)教師簽名： 日 期： 使用授權(quán)說明 本人完全了解 大學(xué)關(guān)于收集、保存、使用畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）的規(guī)定，即：按照學(xué)校要求提交畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）的印刷本和電子版本；學(xué)校有權(quán)保存畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）的印刷本和電子版，并提供目錄檢索與閱覽服務(wù)；學(xué)?？梢圆捎糜坝?、縮印、數(shù)字化或其它復(fù)制手段保存論文；在不以贏利為目的前提下，學(xué)?？梢怨颊撐牡牟糠只蛉績?nèi)容。盡我所知，除文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，不包含其他人或組織已經(jīng)發(fā)表或公布過的研究成果，也不包含我為獲得 及其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或?qū)W歷而使用過的材料。 同時(shí)也向?qū)⒁獏⒓颖菊撐脑u閱、答 辯的各位專家和教授表示我最真摯的謝意，你們的寶貴意見將是我發(fā)展與進(jìn)步的動力。 另外，衷心感謝我的同窗同學(xué)們，在我畢業(yè)論文寫作中，與他們的探討交流使我受益頗多；同時(shí)，他們也給了我很多無私的幫助和支持，我再次深表謝意。 同時(shí)，我要感謝我們學(xué)院給我們授課的各位老師以及陳瑞利老師、路志芳等各位實(shí)驗(yàn)室的老師，正是由于他們悉心指導(dǎo)和幫助，我們才會有比較準(zhǔn)確的試驗(yàn)數(shù)據(jù)，才為論文得以順利完成提供了保證。從李老師身上，我不僅學(xué)到了扎實(shí)、寬廣的專業(yè)知識，也學(xué)到了做人的道理。有時(shí)我們占用了導(dǎo)師的休息時(shí)間來給我們指導(dǎo)論文他都好不抱怨。 本文的研究工作是在我的導(dǎo)師李安華老師的精心指導(dǎo)和悉心關(guān)懷下完成的，在題目的選定和論文的研究工作中無不傾注著導(dǎo)師辛勤的汗水和心血。 20 參考文獻(xiàn) [1] 范代娣 , 陳斌 , 尚龍安 . 紅霉素發(fā)酵工藝優(yōu)化研究 [J]. 生物工程學(xué)報(bào) , 1999, 12(5): 106110. [2] 肖懷秋 , 李玉珍 . 微生物培養(yǎng)基優(yōu)化方法研究進(jìn)展 [J]. 釀酒科技 , 2020, 21(1): 9094. [3] 江蘇新醫(yī)學(xué)院 . 中藥大辭典 [M]. 上海 : 上海科學(xué)技術(shù)出版社 , 1986: 22712272. [4] 左勇 , 李楊 , 謝暉 , 等 . 紅霉素?fù)u瓶發(fā)酵控制條件的優(yōu)化 [J]. 四川理工學(xué)院學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版） , 2020(4): 1720. [5] 左勇 , 李楊 , 任永利，等 . 紅霉素產(chǎn)生菌的誘變及培養(yǎng)基優(yōu)化研究 [J]. 四川理工學(xué)院學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版） , 2020(1): 1418. [6] 張宇，龔文靜，沈以凌，等 . 發(fā)酵液中紅霉素含量的測定 [M]. 中國釀造 : 中國輕工業(yè)出版社 , 2020（ 5） : 137140. [7] 張志宏，李東霄 , 常靜玲 . 紅霉素菌渣生物改性研究 [M]. 河南師范大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版） , 2020（ 5） : 168170. [8] 韋革宏，楊祥 . 發(fā)酵工程 . 北京 : 科學(xué)出版社 , 2020: 735737. [9] 陳堅(jiān)，李寅 .發(fā)酵過程優(yōu)化原理與實(shí)踐 [J]. 北京 :化學(xué)工業(yè)出版社 , 2020(5): 176181. [10] 陳堅(jiān) , 劉立明 , 堵國成 . 發(fā)酵過程優(yōu)化原理與技術(shù) [J]. 北京 : 化學(xué)工業(yè)出版社 , 2020(3): 143149. [11] 張金國，劉翔 . 紅霉素發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化研究 [J]. 中國抗生素雜志 , 2020(7): 3134. [12] 應(yīng)惟媧 , 郝玉有，儲炬 , 王永紅，莊英萍 . 響應(yīng)面法優(yōu)化紅霉素發(fā)酵培養(yǎng)基 [J]. 中國抗生素雜志 , 2020(5): 3436. [13] 李雷，任永利 , 李楊，方春玉，左勇 . 紅霉素生產(chǎn)工藝的現(xiàn)狀與展望 [J]. 中國釀造 , 2020(9): 226227. [14] 龔文靜，張宇，虞龍，等 . 紅霉素高產(chǎn)突變菌株發(fā)酵工藝優(yōu)化 [J]. 中國釀造 , 2020(3): 136140. [15] 齊霞昌，陳昌發(fā) , 錢江潮，等 . 采用高效液相色譜測定紅霉素發(fā)酵液組分 [J]. 食品與發(fā)酵工業(yè) , 2020, 33(5): 5354. [16] 朱明珍 , 徐積恩 . 紅霉素 35 年 : 產(chǎn)生菌及其發(fā)酵 [J]. 中國抗生素雜志 ,2020(3): 463470. [17] 王丹 , 馬玉龍 . pH 值調(diào)節(jié)對紅霉素膜漿中抗生素的降解作用 [J]. 環(huán)境保護(hù)科學(xué) , 2020(4): 3839. 21 [18] 吳瑞武 , 謝遠(yuǎn)典，金曉霞，等 . 幾種原材料對紅霉素發(fā)酵的影響 [J].中國抗生素 , 2020(3): 3839. [19] 徐馳 .化工過程優(yōu)化中主要工藝影響因素的研究 [J]. 計(jì)算機(jī)與應(yīng)用化學(xué) , 1998(1): 3336. [20] 李嘯 , 陳長華，李友元 . 紅霉素 A 發(fā)酵條件的優(yōu)化 [J]. 中國醫(yī)藥工業(yè)雜志 , 2020, 37(6): 381383. 22 致謝 時(shí)光荏苒，轉(zhuǎn)眼我已經(jīng)要畢業(yè)了，在學(xué)校的這幾年我覺得我成長了很多，學(xué)會了很多東西。通過對各種菌種的形態(tài)和性能對比，我們篩選出來的優(yōu)質(zhì)的、符合我們要求的菌種是克雷伯氏菌屬、氨基酸球菌屬和變形菌屬。 19 結(jié)論 本次課題的實(shí)驗(yàn)是在安陽工學(xué)院實(shí)驗(yàn)室完成，從接種到發(fā)酵再到后來的菌種篩選及鑒定都有作者和老師共同完成。所以在發(fā)酵過程中可以不斷監(jiān)測可控條件的變化，及時(shí)做出應(yīng)對措施，使損失降到最低。在實(shí)驗(yàn)過程中我們也許會遇到一些難以避免的問題，比如發(fā)酵過程中的污染問題、溶氧量的控制問題，在紅霉素的生產(chǎn)過程中可能會出現(xiàn)紅霉素降解問題，還有其含有的雜質(zhì)可能會影響紅霉素產(chǎn)量和質(zhì)量。 檸檬酸鹽試驗(yàn) 菌種 A B C 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 + — — 注： +表示能利用 — 表示不能利用 菌種鑒定 通過以上多個(gè)實(shí)驗(yàn)的綜合結(jié)果，我們初步確定了微生物的種類，現(xiàn)在將結(jié)果匯總展示如下： 實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 結(jié)果 A B C 17 細(xì)胞形狀 短針 球形 桿狀 形成芽孢 無 無 無 有莢膜 無 無 無 革蘭氏染色 陰性 陰性 陰性 好氧性 兼性厭氧 兼性厭氧 兼性厭氧 運(yùn)動性 無 無 無 糖、醇、糖苷類碳源分解實(shí)驗(yàn) ++ + — 淀粉水解實(shí)驗(yàn) — — — 甲基紅實(shí)驗(yàn) + — — 乙酰甲基甲醇實(shí)驗(yàn) — — — 檸檬酸鹽實(shí)驗(yàn) + — — 初步鑒定結(jié)果表明 A為克雷伯氏菌屬， B為氨基酸球菌屬， C為變形菌屬 18 第四章 討論 本次課題的研究都是基于實(shí)驗(yàn)操作的基礎(chǔ)之上的，是在老師的指導(dǎo)下順利完成的，實(shí)驗(yàn)過程盡量要求準(zhǔn)確，避免可能出現(xiàn)的錯(cuò)誤和漏洞，具有科學(xué)依據(jù)。也可以用酚紅水溶液作為指示劑 ,其變色范圍 ，顏色變化為由黃到紅。 乙酰甲基甲醇試驗(yàn) 菌種 A B C 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 — — — （ 8）檸檬酸鹽試驗(yàn) 因?yàn)橛行┘?xì)菌可分解檸檬酸形成 CO2,而培養(yǎng)基中鈉離子可以形成碳酸鈉 ,使培養(yǎng)基的堿性增加 ,我們可以在培養(yǎng)基中加入指示劑， 根據(jù)培養(yǎng)基中的指示劑變色情況來判斷試驗(yàn)結(jié)果。我們在培養(yǎng)基中加入乙酰甲基甲醇，看微生物能否分解這種代謝產(chǎn)物來判定微生物的種類。乙酰甲基甲醇是丙酮酸脫羧縮合和脫羧后轉(zhuǎn)變而成的，丙酮酸又是葡萄糖的代謝產(chǎn)物。這說明菌株 A 的培養(yǎng)液 16 中含有有機(jī)酸， B、 C培養(yǎng)液中沒有產(chǎn)生有機(jī)酸。因?yàn)榕囵B(yǎng)液中含有有機(jī)酸，我們可以加入甲基紅指示劑看培養(yǎng)液顏色變化來進(jìn)行檢驗(yàn)。 淀粉水解試驗(yàn)結(jié)果 菌種 A B C 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 — — — 注： —表示沒有淀粉水解能力 （ 6）甲基紅試驗(yàn) 設(shè)計(jì)該實(shí)驗(yàn)的目的是想看看菌株是否能分解葡萄糖產(chǎn)酸。 試驗(yàn)結(jié)果為菌落周圍仍為藍(lán)黑色 ,無水解圈產(chǎn)生。淀粉的特性是遇碘變藍(lán)，但 淀粉水解后遇碘不再變藍(lán)。 糖、醇、糖苷類碳源的分解實(shí)驗(yàn)結(jié)果 菌種 A B C 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 ++ + — 注： ++表示產(chǎn)酸產(chǎn)氣 +表示產(chǎn)酸不產(chǎn)氣 —表示不產(chǎn)酸不產(chǎn)氣 （ 5）淀粉水解試驗(yàn) 我們知道，有些菌種可以合成淀粉酶并把它分泌到胞外。氣體的產(chǎn)生可由糖發(fā)酵管中倒立的杜氏小管中的氣泡的有無來證明。酸的產(chǎn)生可以用指示劑來指示。 （ 4）糖、醇、糖苷類碳源的分解試驗(yàn) 不同的細(xì)菌在分解糖或醇 (如葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、甘油 )的能力上 15 有很大差異。 （ 3）運(yùn)動性試驗(yàn) 將接種過三種菌種的試管分別直立放于試管架上 ,并把它們 放在恒溫箱中用適宜溫度培養(yǎng)，經(jīng)定期觀察發(fā)現(xiàn) ,A、 B、 C接種后菌株僅在在接種線處生長 ,細(xì)而密 ,并未出現(xiàn)擴(kuò)散。 唯一氮源實(shí)驗(yàn)結(jié)果 菌種編號 硫氨酸 酵母膏 硝酸胺 蛋白胨 硝酸鉀 A +++ +++ ++ ++ + B + +++ +++ ++ + C ++ + + — —