【正文】 其間接證據(jù)是通過研究一些增效劑的作用發(fā)現(xiàn)的。例如，果蠅中的AChE是由一個(gè)(yī ɡ232。,內(nèi)容(n232。,本章(běn zhānɡ)思考題,1.害蟲的抗藥性有哪些類型？ 2.各種抗性的定義。,7. 增效劑的使用(shǐy242。o)方法如右圖,第七十六頁，共八十頁。在不同地塊(d236。,第七十五頁，共八十頁。 w233。國內(nèi)大都用有機(jī)磷與菊酯類藥劑混配。,第七十三頁，共八十頁。,2. 負(fù)交互抗性農(nóng)藥的應(yīng)用 負(fù)交互抗性是利用反選擇作用。 調(diào)整用藥時(shí)期就是在害蟲發(fā)生，但天敵未大量出現(xiàn)的時(shí)期施藥，避免或減少對天敵的危害，以延緩抗性的形成。 合理用藥主要是兩種情況： 用選擇性殺蟲劑，只殺死害蟲，而不殺死其天敵； 選擇性用藥，即藥劑本身不具有選擇性，但通過恰當(dāng)?shù)厥褂梅椒ǎ蛊洳粋蛏賯μ鞌常?常用的方法有： （1）調(diào)節(jié)使用劑量 （2）調(diào)節(jié)施藥時(shí)期(sh237。h233。,（四） 害蟲抗性治理(zh236。,（四） 害蟲抗性治理(zh236。lǐ)的基礎(chǔ)研究,抗性監(jiān)測 抗性品系的選育 交互抗性譜 抗性機(jī)理 抗性遺傳(y237。 該技術(shù)可用于新基因鑒定，突變檢測，表達(dá)監(jiān)控和遺傳制圖等。用熒光標(biāo)記待測樣品（DNA,cDNA,RNA)與位于芯片上的核酸探針雜交(z225。n)長度多態(tài)性 RFLPs ( restriction fragment length polymorphisms),第六十四頁，共八十頁。nzh236。n du224。ng)變異性質(zhì)。據(jù)認(rèn)為SSCP可以區(qū)分1bp的差異 PCRSSCP分析不能確定(qu232。,第六十頁，共八十頁。 R引物則相反。sh249。ngd249。,（3）分子生物學(xué)檢測(jiǎn c232。 b.靶標(biāo)敏感性檢測技術(shù) 檢測乙酰膽堿對有機(jī)磷和氨基甲酸酯類殺蟲劑的不敏感性，用神經(jīng)(sh233。所以(suǒyǐ)對于昆蟲抗藥性測定的標(biāo)準(zhǔn)有必要重新進(jìn)行評價(jià)和制定。ngy224。初步檢測到抗性個(gè)體的單雌系進(jìn)行單獨(dú)飼養(yǎng)進(jìn)行F4代核實(shí)驗(yàn)證，根據(jù)攜帶抗性基因的單雌系數(shù)目進(jìn)行評估大田害蟲種群的抗性等位基因頻率。從田間采集成蟲進(jìn)行單對交配，每個(gè)單對作為一個(gè)(yī ɡ232。ng)條件：①隱性基因控制的抗性；②必須是單對基因控制的抗性；③實(shí)驗(yàn)室內(nèi)要有純度較高的抗性品系。,c.單雌系F1代遺傳監(jiān)測（檢測）法 Gould等（1997）將區(qū)分劑量和單對雜交結(jié)合在一起提出單對F1法（單對雜交法）。該方法使用成功與否的關(guān)鍵是得到合適的區(qū)分劑量，通常做法是根據(jù)敏感品系的LD99或LD99.9來確定，但最好通過抗性遺傳分析得到區(qū)分劑量。,b.區(qū)分劑量（discriminating dose）法 使用1至2個(gè)能夠區(qū)分害蟲種群中抗性個(gè)體(g232。,a.抗性倍數(shù)法（LD50） 讓害蟲在室內(nèi)條件下接觸到不同劑量（濃度）梯度的殺蟲劑得到(d233。,（1）生物測定技術(shù)(j236。,3.抗性監(jiān)測(jiān c232。,（二）抗性監(jiān)測(jiān c232。,2.殺蟲劑抗性治理(zh236。,2.殺蟲劑抗性治理(zh236。lǐ)的策略,（1）適度治理(Moderation Management) 限制(xi224。zh242。lǐ)方案,二苯基化合物類 （三氯殺螨砜等）,甲脒或氨基甲酸酯類 （雙甲脒等）,有機(jī)磷類 （久效磷、三唑磷等）,2年后,2年后,2年后,第四十四頁，共八十頁。,第四十三頁，共八十頁。,5.3 操作因子 包括人為因子，藥劑的性質(zhì)，使用方法(fāngfǎ)，次數(shù)、濃度、劑量等。ich243。二個(gè)抗性基因結(jié)合時(shí)對抗性的影響是倍增，而不是簡單的相加作用。,四、影響抗性發(fā)展(fāzhǎn)的因子,遺傳學(xué)因子(yīnzǐ) 生物學(xué)因子 操作 因子,第四十頁，共八十頁。 shi)單一的，即使是酶活性提高，也不一定就是某種酶活性提高，可能是幾種解毒酶活性都提高的結(jié)果。使昆蟲,第三十七頁，共八十頁。n zi)在未接觸到足夠的藥量前就迅速飛離，以致不能致死。,2. 抗藥性形成(x237。 總之，代謝抗性的化學(xué)(hu224。,DDT脫氯化氫酶及硝基還原酶 昆蟲體內(nèi)的DDT在DDT脫氯化氫酶的作用下，將DDT轉(zhuǎn)化為無毒的DDE。此外，谷胱甘肽（GSH）是GSTs催化結(jié)合反應(yīng)的輔助因子，GSH的含量對GSTs的催化有很大影響。依所轉(zhuǎn)移的基團(tuán)種類將GSTs分為5類：烷基轉(zhuǎn)移酶、芳基轉(zhuǎn)移酶、芳烷基轉(zhuǎn)移酶、鏈烯轉(zhuǎn)移酶和環(huán)氧化物轉(zhuǎn)移酶。,酯酶與昆蟲(kūnch243。,酯酶活力增強(qiáng)主要有兩個(gè)方面的原因：一是質(zhì)的改變，即某一個(gè)(yī ɡ232。nɡ)的。,酯酶與昆蟲抗藥性 酯酶是能夠水解酯鍵的一類水解代謝酶。 MFO解毒能力增強(qiáng)：P450量的增加，P450質(zhì)的改變。利用pbo的增效作用(zu242。ng)發(fā)現(xiàn)的。 研究結(jié)果表明，抗性的發(fā)展普遍與微粒體氧化作用增強(qiáng)有關(guān)。)P450單加氧酶作用機(jī)制,第三十頁，共八十頁。 s249。,細(xì)胞色素P450單加氧酶的功能(gōngn233。)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，它不是一種蛋白而是分子質(zhì)量在4660Kda（黃俊勇和冷欣夫，1991）的結(jié)構(gòu)類似而又不盡相同，性質(zhì)類似而又有差異的一族蛋白質(zhì)（唐振華，1990a）。ng),2.1 生理(shēnglǐ)生化抗性,三、害蟲抗藥性的形成,2. 抗藥性形成的機(jī)制,第二十七頁，共八十頁。,第二十六頁，共八十頁。 環(huán)戊二烯抗藥性是由GABAA受體氯離子通道(tōngd224。 在擬除蟲菊酯抗性煙草夜蛾體內(nèi)是單個(gè)堿基發(fā)生了突變（T到A），而該突變基因能將亮氨酸改變?yōu)榻M氨酸，從而引起鈉通道蛋白改變造成擊倒抗性。o),第二十四頁，共八十頁。,Kdr型的分子機(jī)理(jī lǐ)： 神經(jīng)膜磷脂雙分子層的變異；鈉通道數(shù)量的改變；鈉通道質(zhì)的改變。,第二十二頁，共八十頁。從果蠅的田間品系中發(fā)現(xiàn)了4種突變型：苯丙氨酸（115）變?yōu)榻z氨酸；異亮氨酸（199）變?yōu)槔i氨酸或蘇氨酸；甘氨酸（303）變?yōu)楸彼帷?AChE AChE的不敏感性主要由AchE變構(gòu)引起，而AchE的變構(gòu)則是結(jié)構(gòu)基因的點(diǎn)突變造成的。o)靶標(biāo)鈉通道 環(huán)戊二烯類殺蟲劑的靶標(biāo)GABA受體。 實(shí)際上由于研究方法的限制可能低估了穿透抗性的作用，從滲透劑的增效作用可以推測穿透抗性在某些情況下可能扮演更為重要的角色。,2.1.1 穿透作用降低(ji224。在這一時(shí)期內(nèi)使抗性昆蟲有更多的機(jī)會來降解這這些化合物。并命名為ORGANOTIN r，其突變基因命名為tin(或pen)。ngch233。u)作用降低； （2）代謝抗性：涉及到的酶有，細(xì)胞色素P450酶系、水解酶（主要是酯酶）、谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶、DDT脫氯化氫酶等； （3）靶標(biāo)部位敏感度降低等。,簡單地說，昆蟲對各類殺蟲劑涉及的主要生理生化抗性機(jī)理有以下幾個(gè)方面： （1）穿透(chuān t242。ich243。,2.1 生理生化抗性 生理抗性：包括表皮和神經(jīng)膜穿透作用降低(ji224。ich243。產(chǎn)生抗性的原因有多種，按其由遺傳引起的種群特征的變化，或形態(tài)、生理生化(shēnɡ hu224。,抗性的形成實(shí)際上是一種進(jìn)化現(xiàn)象，至少包括(bāoku242。ich243。它與一般的選擇學(xué)說(xu233。,第十二頁，共八十頁。i)不存在抗性基因。ng)抗藥性的