感染性疾病病原體快速診斷-wenkub.com
2025-01-02 12:19 本頁(yè)面
【正文】 2023年 1月 21日星期六 10時(shí) 31分 28秒 10:31:2821 January 2023 1一個(gè)人即使已登上頂峰，也仍要自強(qiáng)不息。勝人者有力，自勝者強(qiáng)。 , January 21, 2023 閱讀一切好書如同和過去最杰出的人談話。 2023年 1月 21日星期六 上午 10時(shí) 31分 28秒 10:31: 1楚塞三湘接，荊門九派通。 10:31:2810:31:2810:311/21/2023 10:31:28 AM 1成功就是日復(fù)一日那一點(diǎn)點(diǎn)小小努力的積累。 2023年 1月 上午 10時(shí) 31分 :31January 21, 2023 1行動(dòng)出成果，工作出財(cái)富。 :31:2810:31Jan2321Jan23 1故人江海別，幾度隔山川。為臨床提供快速服務(wù)。 73 Wenen LIU ? 甘露聚糖 (Mannan):念珠菌表面抗原 ? 熱不穩(wěn)定蛋白 ? 用 LA方法 74 Wenen LIU ? 新生隱球菌 循環(huán)夾膜抗原 是新生隱球菌病 ,尤其是新生隱球菌腦膜炎的診斷手段 . ? 乳膠法 : 5min即可出結(jié)果 ,特異性達(dá) 90100%,可檢測(cè) 35ng/ul的抗原 ? ELISA:敏感性高于 LA(乳膠凝集 ),可檢測(cè) 6ng/ul 75 Wenen LIU 分子生物學(xué)技術(shù) ? PNAFISH[ fluorescent in situ hybridization (FISH) using a set of peptide nucleic acid probes (PNA) ]： 用來快速檢測(cè)和鑒定血培養(yǎng)陽(yáng)性的白念珠菌 / 近平滑念珠菌、熱帶念珠菌及光滑念珠菌 / 克柔念珠菌， 將可能對(duì)氟康唑敏感或耐藥的菌種區(qū)分開來。解凍標(biāo)本檢測(cè)之前要充分混勻 ? 20mg/L膽紅素，或 2g/L甘油三酯的脂血，或 165mg/L血紅蛋白的溶血標(biāo)本不影響檢測(cè)結(jié)果 71 Wenen LIU GM試驗(yàn) 臨床意義 GM檢測(cè)能區(qū)分侵襲性肺曲霉感染與白色假絲酵母菌、毛霉、肺炎鏈球菌感染和煙曲霉口咽定植。 ? 實(shí)驗(yàn)前未打開標(biāo)本在 28℃ 可保存 5天。 ? 一般在曲霉感染者出現(xiàn)臨床癥狀和影像學(xué)檢查異常前數(shù)天，其體內(nèi)循環(huán)中 GM 即可呈陽(yáng)性表達(dá)，其靈敏度和特異度均可達(dá)到80% 以上。如需長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存，存儲(chǔ)溫度應(yīng)為 70℃ 。 ? 國(guó)內(nèi)已經(jīng)使用微生物快速動(dòng)態(tài)檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)。多數(shù)放大系統(tǒng)基于雜交系統(tǒng)，其另一部分是 PCR 擴(kuò)增技術(shù)。 ? 直接重復(fù)片段及寡核苷酸多態(tài)性分型 ? 可變數(shù)目串聯(lián)重復(fù)序列及 MLVA分型 ? 單核苷酸多態(tài)性和 MLST分型 64 Wenen LIU 多重耐藥結(jié)核分枝桿菌檢測(cè) ? 結(jié)核桿菌產(chǎn)生耐藥性主要是由不合理用藥引起的結(jié)核桿菌內(nèi)抗結(jié)核藥物作用靶基因突變所致。 ： IS6110和 IS1081。 ? 基于 IGRA原理的檢測(cè)項(xiàng)目目前已被美國(guó)、加拿大、英國(guó)、德國(guó)、意大利、瑞士、法國(guó)、荷蘭、日本等二十余個(gè)國(guó)家寫入本國(guó)的結(jié)核診療指南中 γ 干擾素釋放實(shí)驗(yàn)（ IGRA） 51 Wenen LIU 酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)（ ELISPOT） 52 Wenen LIU 酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)（ ELISPOT） ? 近二十多年來，隨著技術(shù)改良， ELISPOT 分析技術(shù)已經(jīng)是當(dāng)世公認(rèn)的 最靈敏 的抗原特定T細(xì)胞的體外檢測(cè)技術(shù) ? 結(jié)合了細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)與酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)（即 ELISA 技術(shù)），能夠在單細(xì)胞水平檢測(cè)細(xì)胞因子的分泌情況， 靈敏度高 。 ? 結(jié)核桿菌感染者外周血單核細(xì)胞中存在結(jié)核特異的活化 T淋巴細(xì)胞，這些淋巴細(xì)胞在體外再次受到結(jié)核桿菌特異抗原刺激后分泌 γ 干擾素， 通過 檢測(cè) 體外分泌的 IFNγ 來診斷是否存在結(jié)核感染 。 35 Wenen LIU 結(jié)核感染現(xiàn)狀 全球范圍內(nèi)結(jié)核病疫情急劇惡化 ? 結(jié)核病與艾滋病同時(shí)流行 ? 結(jié)核菌耐藥現(xiàn)象益發(fā)嚴(yán)重 ? 人口大規(guī)模流動(dòng) 我國(guó)是世界上僅低于印度的第二結(jié)核病大國(guó) ? 結(jié)核菌感染率 % ? 新發(fā)活動(dòng)性結(jié)核患者 130萬(wàn) /年 ? 死亡 13萬(wàn) /年 早期快速診斷與治療成為制約結(jié)核病控制的關(guān)鍵 ? 常規(guī)實(shí)驗(yàn)室診斷結(jié)核病方法陽(yáng)性率不到60% 36 Wenen LIU 全球結(jié)核疫情 37 Wenen LIU 結(jié)核檢測(cè)方法 一、現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢測(cè)技術(shù) 細(xì)菌學(xué)診斷 ─ 涂片、培養(yǎng) 免疫學(xué)診斷 ─ 抗原、抗體膠體金 分子生物學(xué)診斷 ─ PCR 二、其它檢測(cè)技術(shù) PPD（ TST）實(shí)驗(yàn) 影像學(xué)檢查 38 Wenen LIU 結(jié)核夾層杯技術(shù) 結(jié)核感染 T細(xì)胞檢測(cè)技術(shù) 分子生物學(xué)技術(shù) 結(jié)核分枝桿菌的快速診斷 39 Wenen LIU 結(jié)核夾層杯技術(shù) ? 原理 ：通過專用消化滅活液消化組織細(xì)胞和粘蛋白等，將結(jié)核桿菌裸露出來，并結(jié)合高速震蕩，使痰標(biāo)本充分液化而有利于其中的抗酸桿菌沉淀于特制彭氏杯底部的菌膜上，在夾層杯中直接抗酸染色、干燥，并用取片針頂出內(nèi)底，經(jīng)封片等步驟后，鏡下檢測(cè)抗酸桿菌。 ? 結(jié)核病至今仍為重要的傳染病。其中前者主要包括 MOX、 CMY、 DHA、 ACC、 ACT、 FOX等亞型，后者主要包括： ADC。 ? 血漿中的 PCT非常穩(wěn)定，收集標(biāo)本 24h后， PCT濃度在室溫下大約下降 12％，在 4℃ 大約下降 6％ 17 Wenen LIU PCT用于細(xì)菌感染和膿毒癥診斷是一種非常有價(jià)值的標(biāo)志物 細(xì)菌感染 /膿毒癥診斷及嚴(yán)重程度判斷 膿毒癥治療效果監(jiān)測(cè)及預(yù)后評(píng)估 抗生素的有效管理 18 Wenen LIU 細(xì)菌感染診斷及嚴(yán)重程度判斷 膿毒性休克 嚴(yán)重膿毒癥 系統(tǒng)性感染 (膿毒癥 ) 局部感染 正常值 PCT的濃度隨感染的擴(kuò)散和感染嚴(yán)重程度的加重而升高 19 Wenen LIU 膿毒癥患者治療效果及預(yù)后監(jiān)測(cè) (n=109) F. St252。 144: 557884 05。 ? PCT含量的變化穩(wěn)定，并出現(xiàn)在疾病的早期（ 34h）。感染性疾病病原體快速診斷 1 Wenen LIU 概 述 感染性疾病：由某種病原體所致，通過不同方式引起人體發(fā)生感染并出現(xiàn)臨床
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