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正文內(nèi)容

hiv抗體初篩實驗室sop文件-wenkub.com

2025-08-13 23:30 本頁面
   

【正文】 發(fā)現(xiàn)問題應及時處理,若無法處理則及時上報解決。維護與保養(yǎng)1) 每天對儀器外表面進行清潔。溫度要求:37℃177。使用方法1) 使用時應平放在固定臺面上,將蒸餾水加至屜板50mm以上。 實驗室工作人員應該嚴格按照本SOP進行操作。 如果儀器表面有生物危險物質(zhì)污染,用中性消毒液清潔。 按下【運行】鍵前,需確認:已裝上正確清洗頭;酶標板已正確放置;已選擇適當?shù)某绦蚣皡?shù)值。處理危險樣品時,參考實驗室操作手冊進行操作。 在儀器上貼上注有消毒日期的已消毒標識。 把清洗頭和酶標板架從戊二醛溶液中取出并用蒸餾水漂洗,把它們重新安裝在儀器上。 用中性清洗液清潔儀器。 儀器消毒 傾倒液體瓶。 用清洗頭抽干托盤預洗槽,再用蒸餾水注滿托盤預洗槽,抽干。 消毒試劑:甲醛溶液10%;酒精70%;戊二醛溶液4%。 平常不用時,拔掉電源插頭。 浸泡時間,一般清洗過程中,清洗頭在酶標板最后一行中注滿水后,即啟動浸泡功能。 清洗次數(shù),清洗次數(shù)可在1~10范圍內(nèi)設定。 清洗容量,可在50UL、100UL、150UL、200UL、250UL、300UL、350UL、400UL、450UL中選擇設定。 【預洗/返回】:處于待機狀態(tài)時,此鍵用來使儀器執(zhí)行預洗程序;處于編程狀態(tài)時,此鍵可使顯示面板界面回到待機狀態(tài)【↓】:處于待機狀態(tài)時,此鍵用來順次遞減程序號;處于編程狀態(tài)時,用來使光標“→”下移。用來設定儀器的運行方式及各項參數(shù)。 將長時間不使用洗板機時,先用蒸餾水沖洗一遍整個系統(tǒng),再進行日常關機;并且傾倒、清洗廢液瓶,保持液體干燥,以免清洗液中的緩沖鹽類結晶而堵塞清洗頭。 最后一次洗板結束后,將電源開關置于【OFF】位;并將酶標板托盤上的預洗槽用蒸餾水裝滿,使清洗頭浸入預洗槽。進入編程菜單界面。 預洗在待機狀態(tài)下,使預洗槽處于清洗頭下方,按下【預洗/返回】鍵,清洗頭抬起,電磁閥打開,洗液進入預洗槽。 開機插上電源,打開電源開關(按后面板【POWER】鍵),儀器顯示“儀器復位中,請稍候”儀器初始化結束后。擰緊蓋子,注意不要讓洗液管擰緊,以保證洗液管的通暢。 拔掉廢液瓶口的塞子(接有與洗板機相連的廢液管),倒掉廢液瓶的廢液,再把塞子安緊在廢液瓶口上。 操作步驟 適用范圍本實驗室KHB ST36W洗板機的操作。3) 液晶顯示器請用柔軟的布清潔4) 勿讓任何溶劑,油脂類,腐蝕性物質(zhì)接觸儀器。走板結束,系統(tǒng)自動進入吸光度顯示。舊空白的保存和使用:空白孔的測試結果將自動保存,如果在同一項目的后續(xù)測試中不重新設定空白,則系統(tǒng)自動用舊空白進行計算。4.4布板4.4.1樣本任意點擊欲設置為樣本的孔位,樣本號從1起自動遞增并顯示在該孔位上。所有參數(shù)設置完畢,按[完成]鍵。9)陰陽性判定設置窗口 在此窗口中輸入判定陰性和陽性的臨界值,吸光度模式下,臨界值為吸光度值:Cutoff方式 下,臨界值為樣本與Cutoff值的比值,定量計算方式下,臨界值為濃度值。05按0。d) 標準品吸光度:雙擊標準品濃度列表項,可以在彈出窗口中輸入濃度值,注意標準品濃度順序必須為由小到大。6) 空白上限:,則空白應設為,測試時如果空白孔吸光度值超過設定的上限,系統(tǒng)會提示用戶“空白也吸光度值過高”。1) 項目名稱:該項必須輸入,注意不要與已經(jīng)存在的項目名重復。開機結束后,進行主菜單窗口。每次檢測完畢需填寫血清加樣表,由審核者簽字復核,存檔,以備查。e) 樣本的加樣應使用微量加樣器準確加入。有效期16個月。對初篩試驗呈陽性反應者不能出陽性報告,可出具“HIV抗體待復查”報告。 value=+陰性對照均值(),小于臨界值為陰性。、B各50ul,輕拍混勻,覆上封板膜,置37℃暗置20min。,置37℃溫育30min.(每次應保持30~60秒浸泡時間),扣干。2. 換隔離衣,戴好帽子、口罩、雙層手套。失效:對照區(qū)未出現(xiàn)紫紅色條帶。30分鐘后觀察結果將造成影響。 戴好帽子、口罩、雙層手套。三、英科新創(chuàng)【方法】膠體金法【原理】本試劑盒采用膠體金免疫技術和層析原理,定性測定血清樣本中的HIV1/2型抗體。2℃孵育10min。每孔加酶結合物100ul,取新粘膠紙覆蓋反應板,37177。覆蓋粘膠紙,37177?;蛞后w內(nèi)有結晶,應放置在37℃直至溶解。二、上??迫A生物【方法】雙抗原夾心酶聯(lián)免疫法【原理】本試劑盒采用HIV特異性抗原gp160和gp36等包被微孔反應板,用gp3gp41標記辣根過氧化物酶、采用雙抗原夾心法捕獲人血清、血漿標本中的HIV(1+2)抗體。2℃孵育10min。每孔加酶結合物100ul,取新粘膠紙覆蓋反應板,37177。每檢測孔加入樣品稀釋液50ul,待檢樣品50ul,可振搖5~10S。或液體內(nèi)有結晶,應放置在37℃直至溶解。第二章 標準操作程序一、北京金豪【方法】雙抗原夾心酶聯(lián)免疫法【原理】本試劑盒采用HIV特異性抗原gp160和gp36等包被微孔反應板,用gp3gp41標記辣根過氧化物酶、采用雙抗原夾心法捕獲人血清、血漿標本中的HIV(1+2)抗體。四、 樣本運送 樣本運送一般為血清或血漿,不運送全血。 用帶分離膠的負壓管采集一定量的靜脈血,顛倒混勻5~6次,室溫下自然放置半小時,待血液凝固、血塊收縮后再用3000r/min離心15min。均使用常規(guī)治療劑量,連續(xù)服用28天。mg/次,每日2次,用藥時間為連續(xù)服用28天。 預防性用藥應當在發(fā)生艾滋病病毒職業(yè)暴露后盡早開始,最好在4小時內(nèi)實施,最遲不得超過24小時;即使超過24小時,也應當實施預防性用藥。凡涉及暴露者個人的相關資料,不得向無關單位和人員泄露。醫(yī)務人員發(fā)生艾滋病病毒職業(yè)暴露后,區(qū)疾控中心應當會同相關醫(yī)療衛(wèi)生單位對其進行隨訪和咨詢。如有傷口,應當在傷口旁端輕輕擠壓,盡可能擠出損傷處的血液,用再肥皂液和流動清水沖洗;禁止進行傷口的局部擠壓。使用后的銳器應當直接放入耐刺、防滲漏的利器盒,或者利用針頭處理設備進行安全處置,也可以使用具有安全性能的注射器、輸液器等醫(yī)用銳器,以防刺傷。在診療、護理操作過程中,有可能發(fā)生病人血液、體液飛濺到醫(yī)務人員的面部時,醫(yī)務人員應當戴手套、具有防滲透性能的口罩、防護眼鏡;有可能發(fā)生血液、體液大面積飛濺或者有可能污染醫(yī)務人員的身體時,還應當穿戴具有防滲性能的隔離衣或者圍裙。(二)數(shù)據(jù)分析表明,醫(yī)護和預防保健等人員對艾滋病病毒和艾滋病患者從事醫(yī)療和實驗檢測活動是比較安全的。1遇有意外事故,應立即口頭和書面報告上級部門,并進行局部處理,如含氯消毒劑浸泡傷口,洗眼,漱口等,如遇高危意外事故,除進行局部處理外,同時應立即采取預防措施,包括對其隨訪,HIV檢測,休息并暫離崗位二個月,按醫(yī)囑服用HIV藥物等。不得在實驗室中吃食物,化妝打扮等,不得在實驗室會客。進入實驗室應穿隔離衣,戴手套,傳染性危險大時應戴雙層手套,戴防護鏡,口罩,如防護用具破損應及時更換,不用戴手套的手觸摸暴露的皮膚等部位。7. 冰箱內(nèi)不能貯存乙醚、異戊烷或類似的易燃、可燃性液體。4. 所用的試劑必須符合質(zhì)量要求,必須有三證。試劑管理制度1. 為了更好地管理檢驗科試劑,由主管對檢驗科試劑申購、品牌、質(zhì)量、價格、使用及管理情況進行督查。6. 當班者在使用中應嚴格遵守操作規(guī)程,遇到問題應作及時處理,并詳細記錄。2. 各科應對本科室儀器設備建立臺賬明細。二、 沒有上崗證人員不得單獨簽發(fā)檢驗結果報告單。 (3) 因責任心不強、管理不善導致陽性標本丟失者。(2)項目漏查、做錯項目,且標本已處理,需再次采取標本檢驗者。一級差錯:(1) 違反操作規(guī)程,導致標本損壞,需重新采集標本或由于接收標本未認真查對,違反查對制度,影響檢驗者。差錯事故處理制度1. 艾滋病檢測工作人員必須要有高度的責任心和嚴肅的法制觀念,嚴防差錯事故的發(fā)生。全部實驗工作結束后,應對實驗臺、儀器、設備(接觸部位)地面進行徹底消毒處理。實驗室用的吸頭及時打入消毒器皿中。實驗室的有關檢驗資料,檔案、結果記錄其他人不得翻錄查閱,修改和銷毀。 采集后,應將HIV樣本單獨分裝,勿與其它項目共用。9. 實驗室內(nèi)禁止吸煙、用餐和進食。6. 對不同屬性、品種和含量水平的試樣,應有足夠的試驗區(qū)域,予以分離檢驗,尤其是已知具有生物危害的試樣必須分離檢驗。2. 實驗室工作人員工作時一律穿制服,保持衣帽整潔,試驗過程中應專心致志、認真負責,堅守工作崗位,不得隨意串崗、閑談,保持實驗室安靜,下班離開實驗室前要檢查并關好水、電、門、窗等,注意實驗室安全。
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