瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)侯云鵬-wenkub.com
2025-08-01 22:45 本頁面
【正文】 ④凝膠中加入 EB 進行電泳，便于隨時紫外線下觀察電泳狀態(tài)，但 EB會導致線性 DNA遷移率下降 15%。將電壓調(diào)到零，關機，再取出凝膠， EB染色 1020分鐘，紫外燈下觀察，照相。 ③ 制樣 ：根據(jù)上樣緩沖液的濃度加樣，如 6 loading buffer,則 1ul loading buffer +5 ul DNA sample，類推。 SDS主要是促使聚合酶變性，因為沒有除盡的聚合酶會結(jié)合在 DNA雙鏈上影響它的遷移速率。 loading buffer loading buffer 的中文名字是上樣緩沖液 ,6的緩沖液中可以顯示兩條帶，前面的藍色的條帶是溴酚藍，代表的片段大小是 300bp，后面的有點綠色的條帶是二甲苯青，代表的片段大小在 4000bp左右。 配制方法 : 50 TAE Buffer() 配制方法： 1. 稱量 Tris 242g， Na2EDTA TAE的缺點是緩沖容量小，長時間電泳（如過夜）不可選用，除非有循環(huán)裝置使兩極的緩沖液得到交換。 ②電泳緩沖液的另一個作用是使溶液具有一定的導電性，以利于 DNA分子的遷移，例如，一般電泳緩沖液中應含有，鈉離子的濃度太低時電泳
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