【正文】 　　疾病診斷 　　生物技術的開發(fā)應用，提供了新的診斷技術，特別是單克隆抗體診斷試劑和DNA診斷技術的應用，使許多疾病特別是腫瘤、傳染病在早期就能得到準確診斷。 　　20世紀70年代以后，人們開始利用基因工程技術來生產(chǎn)疫苗?，F(xiàn)代生物技術的定義主要內容及在新藥研究開發(fā)中的應用生物技術（biotechnology）也譯成生物工程，生物學研究與應用的技術方面，包括，基因工程、細胞工程、發(fā)酵工程和酶工程，現(xiàn)代生物技術發(fā)展到高通量組學（omics）芯片技術、基因與基因組人工設計與合成生物學等系統(tǒng)生物技術。青霉素的結構與細胞壁的成分粘肽結構中的D丙氨酰D丙氨酸近似，可與后者競爭轉肽酶，阻礙粘肽的形成，造成細胞壁的缺損，使細菌失去細胞壁的滲透屏障，對細菌起到殺滅作用。肝是最主要的合成場所,其次為小腸、腎上腺皮質等等。是三羧酸循環(huán)的起始底物，不僅是糖代謝的中間產(chǎn)物，也是脂肪和某些氨基酸的代謝產(chǎn)物。物理法固定酶的優(yōu)點在于酶不參加化學反應,整體結構保持不變,酶的催化活性得到很好保留。酶固定化后一般穩(wěn)定性增加，易從反應系統(tǒng)中分離，且易于控制，能反復多次使用。固定化酶的概念制備方法及優(yōu)點　固定化酶：水溶性酶經(jīng)物理或化學方法處理后，成為不溶于水的但仍具有酶活性的一種酶的衍生物。小溝位于雙螺旋的互補鏈之間,而大溝位于相毗鄰的雙股之間。并不影響雙螺旋的對稱性。DNA結構中的堿基對與Chatgaff的發(fā)現(xiàn)正好相符。 (2)堿基對(base pair)　　堿基位于螺旋的內則,它們以垂直于螺旋軸的取向通過糖苷鍵與主鏈糖基相連。DNA雙螺旋結構的特點：(1)主鏈(backbone)　　由脫氧核糖和磷酸基通過酯鍵交替連接而成。一種利用帶孔凝膠珠作基質，按照分子大小分離蛋白質或其它分子混合物的層析技術。在生物化學和分子生物學領域此法常用于分離蛋白質、核酸等生物大分子。那些沒有親和力的蛋白質由于不被吸附，直接流出，從而與被分離的蛋白質分開，然后選用適當?shù)南疵撘海?改變結合條件將被結合的蛋白質洗脫下來，這種分離純化蛋白質的方法稱為親和層析。利用分子與其配體間特殊的、可逆性的親和結合作用而進行分離的一種層析技術。用來檢測在不均一的蛋白質樣品中是否存在目標蛋白的一種方法。DNA樣品的性質與復性速度有關。這一現(xiàn)象稱為增色效應。C～80176?！　。ㄒ唬?變性　　核酸在變性因子作用下，雙螺旋結構解開，氫鍵斷裂，成為無規(guī)則的線團樣，此種由螺旋向線團轉化的作用稱為核酸的變性。由于常用計算機硅芯片作為固相支持物，所以稱為DNA芯片?；蚯度胗址Q基因置換，它是利用內源基因序列兩側或外面的斷裂點，用同源序列的目的基因整個置換內源基因?！≡摷夹g是上個世紀90年代出現(xiàn)的最新外源DNA導入技術。去除原核生物細胞、真核生物的生殖細胞、體細胞或干細胞基因組中的基因等。如果DNA分子的堿基種類或順序發(fā)生變化，那么由它所編碼的蛋白質分子的結構就發(fā)生相應的變化，嚴重的蛋白質分子異常可導致疾病的發(fā)生。探針以放射核素或非放射性核素標記，以利于雜交信號的檢測?！『怂犭s交（ Hybridization）：　互補的核苷酸序列（DNA與DNA、DNA與RNA、RNA與RNA等）通過WatsonCrick堿基配對形成非共價鍵，從而形成穩(wěn)定的同源或異源雙鏈分子的過程，成為核酸分子雜交技術，又稱核酸雜交。如果能選出一個制造一種專一抗體的漿細胞進行培養(yǎng)，就可得到由單細胞經(jīng)分裂增殖而形成細胞群，即單克隆。單克隆抗體生物藥物抗代謝物抗代謝物：在微生物生長過程中常常需要一些生長因子才能正常生長，可以利用生長因子的結構類似物干擾集體的正常代謝，以達到抑制微生物生長的目的。其過程先以經(jīng)剪切作用除去內含子的成熟mRNA為模板，合成RNA/DNA雜化雙鏈，然后水解RNA鏈，再以剩下的DNA單鏈為模板合成DNA雙鏈。作為蛋白質生物合成的第一步，轉錄是mRNA以及非編碼RNA（tRNA、rRNA等）的合成步驟。岡崎片段：相對比較短的DNA鏈（大約1000核苷酸殘基），是在DNA的滯后鏈的不連續(xù)合成期間生成的片段，這是ReijiOkazaki在DNA合成實驗中添加放射性的脫氧核苷酸前體觀察到的。遺傳密碼包含在脫氧核糖核酸或核糖核酸核苷酸序列中的遺傳信息。遺傳中心法則中心法則(genetic central dogma)，是指遺傳信息從DNA傳遞給RNA，再從RNA傳遞給蛋白質，即完成遺傳信息的轉錄和翻譯的過程。兩個子代DNA都和親代DNA堿基序列一致?！?一碳單位的主要生理功能是作為嘌呤和嘧啶的合成原料，是氨基酸和核苷酸聯(lián)系的紐帶。一碳單位 　?。╬urine nucleotide cycle）：骨骼肌和心肌組織中L谷氨酸脫氫酶的活性很低，因而不能通過上述形式的聯(lián)合脫氨反應脫氨。聯(lián)合脫氨基作用是體內主要的脫氨方式。轉氨基作用是氨基酸脫氨基作用的一種途徑。尿素循環(huán)對嬰兒來說，組氨酸和精氨酸也是必需氨基酸?；ㄉ南┧釓膩営退嵘?。進食糖類物質也不會導致酮體增多。在哺乳動物中，肝與腎是糖異生的主要器官。乳酸循環(huán)在激烈運動時，糖酵解的速度超過通過呼吸鏈再形成NAD+的速度，這時肌肉中酵解形成的丙酮酸由乳酸脫氫酶轉變?yōu)槿樗?，使NAD+再生，使酵解過程繼續(xù)進行，肌肉中的乳酸擴散到血液并隨著血液進入肝臟細胞，在肝細胞內通過葡萄糖異生途徑轉變?yōu)槠咸烟?，又回到血液隨血液供應肌肉和腦對葡萄糖的需要?；瘜W組成為糖醛酸和酪氨基己糖交替出現(xiàn)，有時含硫鍵。在真核細胞的線粒體或細菌中，物質在體內氧化時釋放的能量供給ADP與無機磷合成ATP的偶聯(lián)反應。實際上呼吸鏈的作用代表著線粒體最基本的功能，呼吸鏈中的遞氫體(hydrogen carrier)和遞電子體(electron carrier)就是能傳遞氫原子或電子的載體，由于氫原子可以看作是由質子和核外電子組成的，所以遞氫體也是遞電子體，遞氫體和遞電子體的本質是酶、輔酶、輔基或輔因子。也指物質在生物體內的一系列氧化過程。這種抑制使Km增大而υmax不變。其中一些與酶的活性密切相關的化學基團稱作酶的必需基團（essential group）酶的活性中心酶的活性中心：酶分子中氨基酸殘基的側鏈有不同的化學組成。同工酶來源于同一種系、機體或細胞的同一種酶具有不同的形式。 酶活力　　酶活力單位的量度。 米氏方程（MichaelisMentent equation）:表示一個酶促反應的起始速度（υ）與底物濃度([s])關系的速度方程：υ=υmax[s]/(Km+[s])變構酶 （allosteric enzyme） 具有變構效應的酶?！〕壗Y構：是指在多肽鏈內順序上相互鄰近的二級機構常常在空間折疊中靠近，彼此相互作用，形成規(guī)則的二級結構聚集體。在較大的蛋白質分子中，由于多肽鏈上相鄰的超二級結構緊密聯(lián)系，進一步折疊形成一個或多個相對獨立的致密的三維實體，即結構域?！≡贒NA分子結構中，由于堿基之間的氫鍵具有固定的數(shù)目和DNA兩條鏈之間的距離保持不變，使得堿基配對必須遵循一定的規(guī)律，這就是Adenine（A，腺嘌呤）一定與Thymine（T，胸腺嘧啶）配對，Guanine（G，鳥嘌呤）一定與Cytosine（C，胞嘧啶）配對，反之亦然。 在這條鏈的中央形成了L形臂，如圖下方所示，露出了形成反密碼子的三個核苷酸。tRNA的三葉草結構轉運RNA分子由一條長70~90個核苷酸并折疊成三葉草形的短鏈組成的。這是由于連接于兩條主鏈糖基上的配對堿基并非直接相對, 從而使得在主鏈間沿螺旋形成空隙不等的大溝和小溝。 也就是說雙螺旋結構在滿足二條鏈堿基互補的前提下，DNA的一級結構產(chǎn)并不受限制。從立體化學的角度看,只有嘌呤與嘧啶間配對才能滿足螺旋對于堿基對空間的要求, 而這二種堿基對的幾何大小又十分相近,具備了形成氫鍵的適宜鍵長和鍵角條件。同一平面的堿基在二條主鏈間形成堿基對。主鏈有二條,它們似“麻花狀”繞一共同軸心以右手方向盤旋, 相互平行而走向相反形成雙螺旋構型。需要注意的是在折疊片上的側鏈都垂直于折疊片的平面,并交替的從平面上下二側伸出。β折疊特定核酸分子的Tm值與其G＋C所占總堿基數(shù)的百分比成正相關，兩者的關系可表示為：?Tm=＋*(G+C)%一定條件下(相對較短的核酸分子)，Tm值大小還與核酸分子的長度有關，核酸分子越長，Tm值越大；另外，溶液的離子強度較低時，Tm值較低，融點范圍也較寬，反之亦然，因此DNA制劑不應保存在離子強度過低的溶液中。若以溫度對DNA溶液的紫外吸光率作圖，得到的典型DNA變性曲線呈S型(如下圖)。 )核酸的增/減色效應3）增色效應(hyperchromic effect)。蛋白質變性（denaturation）:生物大分子的天然構象遭到破壞導致其生物活性喪失的現(xiàn)象。名詞解釋蛋白質等電點 　　（3） 低密度脂蛋白(LDL，)，把膽固醇運輸?shù)浇M織，經(jīng)過一系列復雜的過程，LDL與LDL受體結合并被細胞吞食。）（ω氧化：動物體內上而碳以下的短鏈脂肪酸，在肝微粒體氧化酶系催化下，通過末端碳原子（稱為ω位）上的氫被氧化成羧基，生成ω羥基酸，再進一步氧化成二羧酸）血漿脂蛋白種類作用血槳脂蛋白：指哺乳動物血漿(尤其是人)中的脂蛋白質復合物。（脂肪酸的β氧化，基本過程： 丁酰CoA經(jīng)最后一次β氧化：生成2分子乙酰CoA 。尿素循環(huán)肝臟是動物生成尿素的主要器官，由于精氨酸酶的作用使精氨酸水解為鳥氨酸及尿素。反應發(fā)生于細胞質中。限速酶：它是指整條代謝通路中催化反應速度最慢的酶,它不但可以影響整條代謝途徑的總速度,還可以改變代謝方向. 　　在代謝過程中的一系列反應中，如果其中一個反應進行的很慢，便成為整個過程的限速步驟，催化此限速步驟的酶稱為限速酶或者標兵酶。細胞色素aa3以復合物形式存在，又稱細胞色素氧化酶，是最后一個載體，將電子直接傳遞給氧。 細胞色素類 都以血紅素為輔基，紅色或褐色。 Ⅱ 由琥珀酸脫氫酶（一種以FAD為輔基的黃素蛋白）和一種鐵硫蛋白組成，將從琥珀酸得到的電子傳遞給輔酶Q。 Ⅰ 即NADH：輔酶Q氧化還原酶復合體，由NADH脫氫酶（一種以FMN為輔基的黃素蛋白）和一系列鐵硫蛋白（鐵—硫中心）組成。呼吸鏈使這些能量逐步釋放，有利于形成ATP和維持跨膜電勢。放出的能量則使ADP和磷酸生成ATP。酶的抑制劑有重金屬離子、一氧化碳、硫化氫、氫氰酸、氟化物、碘化乙酸、生物堿、染料、對氯汞苯甲酸、二異丙基氟磷酸、乙二胺四乙酸、表面活性劑等。入侵機體細胞的細菌、病毒、死亡的細菌、組織碎片、鐵蛋白、偶氮色素都可通過吞噬作用被細胞清除。前者是將細胞表面的顆粒物轉運入細胞的過程。葡萄糖、某些氨基酸、甘油、嘌呤堿等親水化合物，由于不溶于脂肪，不能借助簡單擴散進轉運，所以可在具有特定載體和順濃度梯度的情況下進行轉運。能量來自細胞代謝活動所產(chǎn)生的代謝能（ATP）的釋放。一般細胞孔道直徑在4nm以下，所以除水分子可以通過外，有些無機離子和有機離子等外源化學物，亦可濾過。凡分子大小和電荷與膜上孔狀結構相適應的溶質皆可濾過轉運，轉運的動力為生物膜兩側的流體靜壓梯度差和滲透壓差。離子型的化合物不易透過生物膜的脂質結構區(qū)。（2）外源化學物在脂質中的溶解度：溶解度可用脂/水分配系數(shù)表示，即一種物質在脂相和水相的分配已達到平衡狀態(tài)時的分配率比值稱為脂/水分配系數(shù)。被動轉運中最主要的方式是簡單擴散和濾過。酶的激活劑大多數(shù)是金屬離子，如K+、Mg2+、Mn2+等，唾液淀粉酶的激活劑為Cl。其特點為：；，抑制劑才能對酶產(chǎn)生抑制作用；：Km減小，Vm降低。 　　① 競爭性抑制：抑制劑與底物競爭與酶的同一活性中心結合，從而干擾了酶與底物的結合，使酶的催化活性降低，這種作用就稱為競爭性抑制作用。酶的不可逆抑制作用包括專一性抑制（如有機磷農(nóng)藥對膽堿酯酶的抑制）和非專一性抑制（如路易斯氣對巰基酶的抑制）兩種。 抑制劑對反應速度的影響　　凡是能降低酶促反應速度，但不引起酶分子變性失活的物質統(tǒng)稱為酶的抑制劑。 pH對反應速度的影響　　觀察pH對酶促反應速度的影響，通常為一鐘形曲線，即pH過高或過低均可導致酶催化活性的下降。 溫度對反應速度的影響　　一般來說，酶促反應速度隨溫度的增高而加快，但當溫度增加達到某一點后，由于酶蛋白的熱變性作用，反應速度迅速下降。 　?、轐m可用來確定酶活性測定時所需的底物濃度：當[S]=10Km時，ν=91%Vmax，為最合適的測定酶活性所需的底物濃度。因此，Km可以反映酶與底物親和力的大小，即Km值越小，則酶與底物的親和力越大；反之，則越小。其中，Vmax為最大反應速度，Km為米氏常數(shù)。這種抑制使Km和υmax都變小但υmax/Km不變。這種抑制使Km增大而υmax不變。比活是酶純度的測量。導致血紅蛋白的組成成分改變，本組疾病的臨床癥狀輕重不一，大多表現(xiàn)為慢性進行性溶血性貧血。經(jīng)過適當?shù)闹委?，這些巨幼細胞都能很快變成正常的幼稚紅細胞。當細胞逐漸成熟，染色質保持其顆粒狀結構，不易形成深染的固縮塊狀物。粒系細胞和巨核細胞也都有形態(tài)上的改變和成熟細胞數(shù)量的減少。 溶血性貧血　　紅細胞過度破壞所引起的貧血，但較少見；常伴有黃疸，稱為“溶血性黃疸”； 巨幼紅細胞性貧血　　缺乏紅細胞成熟因素而引起的貧血，缺乏葉酸或維生素B12引起的巨幼紅細胞性貧血，多見于嬰兒和孕婦長期營養(yǎng)不良；巨幼細胞貧血是指骨髓中出現(xiàn)大量巨幼細胞的一類貧血。多糖類一般不溶于水，無甜味，不能形成結晶，無還原性和變旋現(xiàn)象。單克隆細胞將合成針對一種抗原決定簇的抗體，稱為單克隆抗體。 單抗，多糖，疾病原因單克隆抗體：動物脾臟有上百萬種不同的B淋巴細胞系，重排后具有不同基因不同的B淋巴細胞合成不同的抗體。當含有大小不同的蛋白質樣品加到凝膠柱上時，比凝膠珠平均孔徑小的蛋白質就要連續(xù)不斷地穿入珠子的內部，這樣的小分子不但其運動路程長，而且受到來自凝膠珠內部的阻力也很大，所以越小的蛋白質，把它們從柱子上洗脫下來所花費的時間越長。凝膠層析　　凝膠層析是按照蛋白質分子量大小進行分離的技術，又稱之凝膠過濾，分子篩層析或排阻層析。