植物組織培養(yǎng)中的褐變現(xiàn)象及其防止措施-wenkub.com
2025-06-21 03:34 本頁(yè)面
【正文】 [4] Bonga J M,Durzan D [M].北京:中國(guó)林業(yè)出版社1988.因此，可著手于測(cè)定分析引起褐變的多酚類物質(zhì)的種類，分析其危害細(xì)胞的生化原理，從根本上找出合理的解決方法，以形成完整體系。部分研究開始對(duì)總酚含量、多酚氧化酶活性、過氧化物酶活性、可溶糖含量、可溶蛋白含量進(jìn)行測(cè)定。如采用濾紙橋培養(yǎng)可使外植體溢出的有毒物質(zhì)很快擴(kuò)散到液體培養(yǎng)基中，對(duì)外植體危害較輕；或采用液體培養(yǎng)、半固體培養(yǎng)、液體培養(yǎng)與固體培養(yǎng)交替進(jìn)行培養(yǎng)等也能減輕褐變的危害。但隨著 PVP用量的增加，大部分組織培養(yǎng)物之增殖率也隨之下降，這可能是由于PVP在吸附培養(yǎng)基中引起褐變的物質(zhì)之外，還吸附了部分植物激素。抗氧化物質(zhì)對(duì)外植體的培養(yǎng)會(huì)起到一定的副作用，培養(yǎng)基添加濃度不宜過高，一般在200mg/L以下,且多用于初期培養(yǎng)而不宜長(zhǎng)期培養(yǎng)。 組織培養(yǎng)時(shí)，在培養(yǎng)基中加入抗氧化劑、增效劑培養(yǎng)或預(yù)培養(yǎng)，使用抗氧化劑和增效劑對(duì)材料進(jìn)行預(yù)處理，可抑制外植體的酶促褐變。 適宜的溫度及在黑暗條件下進(jìn)行培養(yǎng)也可減輕材料的褐變。另外對(duì)于某個(gè)種的植物進(jìn)行培養(yǎng)前，在不影響培樣目的的情況下，應(yīng)篩選褐變低的基因型個(gè)體。3防止褐變的措施 成功的經(jīng)驗(yàn)表明，選擇適當(dāng)?shù)耐庵搀w并建立最佳的培養(yǎng)條件是克服材料褐變的最主要手段[10]。例如曼地亞紅豆杉以珍珠巖基質(zhì)上覆蓋濾紙條培養(yǎng)效果最好；而核桃采用液態(tài)培養(yǎng)基可減輕外植體的褐變。Vc和硫代硫酸鈉對(duì)褐變抑制作用強(qiáng),同時(shí)也抑制外植體生長(zhǎng)分化。例如，隨著6BA使用濃度增加，可增加牡丹培養(yǎng)中腋芽外植體的褐變和死亡數(shù)。這是由于Fe3+、Cu2+可作為催化劑加速多酚與活性氧(ROS)作用而被氧化為醌類物質(zhì)。例如小佛肚竹在暗培養(yǎng)和弱光(800Lx)下培養(yǎng)的莖尖和莖段的褐變率比在強(qiáng)光(200Lx)下培養(yǎng)有所下降。 材料在接種前經(jīng)過一定預(yù)處理可減輕外植體在培養(yǎng)中的褐變。 一般認(rèn)為，木本植物較草本植物的外植體在培養(yǎng)過程中更容易發(fā)生褐變。 植物體內(nèi)酚類化合物的含量受到取材時(shí)間的影響。例如在相同的培養(yǎng)基上誘導(dǎo)培養(yǎng)，孝順竹比小佛肚竹和風(fēng)尾竹更易褐變[2]。因此,探討褐化發(fā)生的機(jī)制及其影響因素,采取有效的防止褐化的措施,是保證植物組織培養(yǎng)成功 的關(guān)鍵所在。而酚氧化酶及其底物分布在正常組織的不同部位，酚類物質(zhì)分布在細(xì)胞的液泡內(nèi)，酶則分布在各種質(zhì)體或細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，這種區(qū)域性分布致使底物與酶被質(zhì)膜分隔開來；但當(dāng)外植體或培養(yǎng)材料
物理相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1