植物組織培養(yǎng)六-wenkub.com
2025-01-14 05:05 本頁面
【正文】 上午 03:19:45三月 21MOMODAMarch30,上午 03:19:45三月 211最具挑 戰(zhàn) 性的挑 戰(zhàn) 莫 過 于提升自我。20231意志 堅 強(qiáng) 的人能把世界放在手中像泥 塊 一 樣 任意揉捏。20231知人者智，自知者明。 三月 2103:19:4503:19Mar2130Mar211越是無能的人，越喜 歡 挑剔 別 人的 錯 兒。2023 閱讀 一切好 書 如同和 過 去最杰出的人 談話 。上午 03:19:45三月 21 楊 柳散和 風(fēng) ，青山澹吾 慮 。March30,上午 03:19:45三月 211楚塞三湘接， 荊門 九派通。20231意志 堅 強(qiáng) 的人能把世界放在手中像泥 塊 一 樣 任意揉捏。30,AM1成功就是日復(fù)一日那一點點小小努力的 積 累。30,上午 3:193:19:4503:19:4530上午 三月 2103:19March20233:19:4530,March3:19:45March因此目前植物細(xì)胞反應(yīng)器的 設(shè)計原則為提高混合程度和降低剪切力思考題名詞：植物細(xì)胞培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)、單細(xì)胞培養(yǎng)、植板率、固定化培養(yǎng)、激發(fā)子、次生產(chǎn)物2．一個好的懸浮細(xì)胞系有哪些特征？用于建立 懸浮細(xì)胞系的愈傷組織有何要求？3．建立懸浮細(xì)胞系的關(guān)鍵技術(shù)有哪些？4．懸浮細(xì)胞系在繼代培養(yǎng)中其群體生長規(guī)律。其優(yōu)點是勿需在培養(yǎng)液中加入其它物質(zhì)，從而減少了由于消泡劑所引起的污染和對后續(xù)分離工藝的影響。 ? 常用的化學(xué)消泡劑包括天然油脂類、高級醇類、聚醚類和硅酮類。 n 控制泡沫的方式目前通常采用化學(xué)和機(jī)械兩種方法。 ? 溶氧濃度 ：曾在不同氧濃度下對毛地黃細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)行培養(yǎng)，結(jié)果顯示，當(dāng)培養(yǎng)基氧濃度從 10%飽和度上升至 30%時，細(xì)胞的生長速率從 ，如果溶氧濃度繼續(xù)上升至 40%飽和度時，細(xì)胞生長速率反而下降至 。 長春花細(xì)胞培養(yǎng)，當(dāng)細(xì)胞密度在 10 gL1時，培養(yǎng)液屬于假塑性流體，此時，培養(yǎng)液的粘度依賴于細(xì)胞年齡、形態(tài)和細(xì)胞團(tuán)的大小。包括對反應(yīng)器的選擇和對培養(yǎng)方式的選擇，就目前的技術(shù)基礎(chǔ)來講，固定化培養(yǎng)是植物細(xì)胞規(guī)?；a(chǎn)較為理想的系統(tǒng)為了同時滿足細(xì)胞生長和產(chǎn)物合成的需要，通常需要在不同階段使用不同的培養(yǎng)基，即兩階段培養(yǎng) 為了解決產(chǎn)物對合成的反饋抑制可以采用兩相培養(yǎng)技術(shù)， 液 液系統(tǒng) ：分離相常用的有液體石蠟、烷類化合物、甘油等 液 固系統(tǒng) ：常用的有活性炭、硅酸鎂載體、沸石、蠶絲、樹脂等。激發(fā)子也稱誘導(dǎo)子 ，是指能夠誘導(dǎo)植物細(xì)胞中一個反應(yīng)，并形成細(xì)胞特征性自身防御反應(yīng)的分子。因此可在 培養(yǎng)基中加入適當(dāng)?shù)倪M(jìn)行上述化學(xué)反應(yīng)的前體，便有可能為我們得到需要的化學(xué)轉(zhuǎn)達(dá)化目的產(chǎn)物 。同時要篩選高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)的細(xì)胞株系。蒽醌類物質(zhì)合成的植物細(xì)胞，托品類生物堿類合成的植物細(xì)胞等屬于此類型； n 非生長偶聯(lián)型 產(chǎn)物合成在細(xì)胞生長停止以后。先在細(xì)胞生長培養(yǎng)基中培養(yǎng)大批量細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞生長至合成產(chǎn)物的階段后，再將其轉(zhuǎn)入到產(chǎn)物合成培養(yǎng)基中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞系 n n n 單細(xì)胞養(yǎng)與篩選 n n n n 種細(xì)胞增殖有效成分分析n n 由于細(xì)胞固定在支持物上，培養(yǎng)基可以不斷更換，可以從培養(yǎng)基中提取產(chǎn)物，免除了培養(yǎng)基中因含有過多的初生產(chǎn)物對細(xì)胞代謝的反饋抑制，也由于細(xì)胞留在反應(yīng)器中，新的培養(yǎng)基可以再次利用這些細(xì)胞生產(chǎn)初生產(chǎn)物，從而節(jié)省了生產(chǎn)細(xì)胞所付出的時間和費用；（ 2）立柱培養(yǎng)系統(tǒng)本方法將植物細(xì)胞與瓊脂或褐藻酸鈉混合，制成一個個 12 cm3的細(xì)胞團(tuán)塊，并將它們集中于無菌立柱中。新鮮的細(xì)胞被固定在床底部由聚屏烯等材料編織成的無菌平墊上。 旋轉(zhuǎn)式培養(yǎng)系統(tǒng)一般用于產(chǎn)品中試或某些必需裂解細(xì)胞才能獲得目的產(chǎn)物的培養(yǎng)，其優(yōu)點是控制精確，處理靈活，缺點是培養(yǎng)體積較小。機(jī)械攪拌式培養(yǎng)系統(tǒng) n 機(jī)械攪拌式生物反應(yīng)器通常是根據(jù)植物細(xì)胞的特性在微生物發(fā)酵罐的基礎(chǔ)上作如下改進(jìn)： n 攪拌裝置要減少剪切 ，一般改葉輪式為螺旋式。 3．規(guī)模化細(xì)胞培養(yǎng)是生產(chǎn)植物次生產(chǎn)物的理想途徑 產(chǎn)品成分 用途 年銷售額（億美元）長春花堿（長春花） 治療白血病 18～ 20（美國）阿嗎靈 循環(huán)系統(tǒng)障礙藥 5～ 25（全世界）奎寧（金雞納樹） 治療瘧疾 5～ 10（美國）致熱素 殺蟲劑 20（全世界）毛地黃 心臟病藥 20～ 55（美國） 許多植物次生代謝產(chǎn)物是優(yōu)良的食品添加劑和名貴化妝品原料。 n ? A、有特殊的類似發(fā)酵工業(yè)反應(yīng)器的生產(chǎn)系統(tǒng)和回收工藝。B雙層濾紙植板培養(yǎng)方法培養(yǎng)基飼養(yǎng)層細(xì)胞看護(hù)濾紙層轉(zhuǎn)移碟濾紙 培養(yǎng)細(xì)胞167。看護(hù)培養(yǎng)概念 ：用一塊愈傷組織或植物離體組織看護(hù)單細(xì)胞使其生長增殖的一種單細(xì)胞培養(yǎng)方法。待植板后的培養(yǎng)基完全凝固后，用石蠟或 parafilm封口膜將培養(yǎng)皿封嚴(yán)以防污染在 25℃ 黑暗條件下培養(yǎng) 3周即可長出肉眼可見的愈傷組織。主要技術(shù)要點 ： 167。 常用的抑制劑有 5氟脫氧尿苷， 5氨基尿嘧啶、羥基尿等。細(xì)胞同步化是指同一懸浮培養(yǎng)體系的所有細(xì)胞都同時通過細(xì)胞周期的某一特定時期。接種細(xì)胞密度 ：接種初期的細(xì)胞密度過低往往使延遲期加長，懸浮細(xì)胞的起始密度一般在 ～10 5個細(xì)胞 /毫升，低于這一密度則會使細(xì)胞生長延遲。 影響懸浮細(xì)胞生長的因素 ： n 一個成功的懸浮細(xì)胞培養(yǎng)體系必須滿足三個條件： n 懸浮培養(yǎng)物分散性良好，細(xì)胞團(tuán)較小，一般在 30～ 50個細(xì)胞以下，在實際培養(yǎng)中很少有完全由單細(xì)胞組成的植物細(xì)胞懸浮系。干重一般是將離心收集的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到預(yù)先稱重的濾紙片上，然后在 60℃ 烘 12h，在干燥器中冷卻后稱重。A、細(xì)胞記數(shù)注意：由于懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞并不會呈游離單細(xì)胞，因此 通過培養(yǎng)瓶中直接取樣很難進(jìn)行可靠的細(xì)胞記數(shù)。操作注意事項：對懸浮培養(yǎng)細(xì)胞繼代時，進(jìn)液口的孔徑要小，只能通過單細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)（ 2 4細(xì)胞），使用吸管或注射器。B、加入條件培養(yǎng)基可以縮短滯后期。
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