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正文內(nèi)容

微生物學(xué)目的與要求內(nèi)容-wenkub.com

2025-04-04 03:30 本頁(yè)面
   

【正文】 能干的人,不在情緒上計(jì)較,只在做事上認(rèn)真;無(wú)能的人!不在做事上認(rèn)真,只在情緒上計(jì)較。H2O() H2O 50ml鄰苯二胺(臨用時(shí)加) 60mg30%H2O2(臨用時(shí)加) 15ml⑤終止液(2M硫酸) 濃硫酸 22ml 蒸餾水 188ml寧可累死在路上,也不能閑死在家里!寧可去碰壁,也不能面壁。 3.ELISA試劑:①包被液和稀釋液, Na2CO3-NaHCO3緩沖液Na2CO3 NaHCO3 加蒸餾水至1000ml 該液應(yīng)保存于4℃,一次配制應(yīng)用期不宜超過(guò)10天。②將尿囊液與已知各型血清進(jìn)行補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)。⑤自冰箱取出雞胚,放在蛋架上(一般是大頭朝上),用碘酒消毒氣室端卵殼,然后持鑷子小心擊破氣室端卵殼并打開(kāi)之。 【方法】 病人急性期的漱口液 (抗生素處理) 活雞胚培養(yǎng)(羊膜腔接種) 孵育35℃ 72小時(shí) 收獲羊水進(jìn)行血凝滴定 (+) (-) 血凝抑制試驗(yàn)與 盲傳雞胚,方法同上,如又為 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)定型 陰性則須再盲傳一次,一共三次 ,仍為陰性則報(bào)告陰性 (一)分離①標(biāo)本處理:采集之標(biāo)本保存于冰壺內(nèi),及時(shí)進(jìn)行分離,如不能進(jìn)行分離則需保存于-20℃以下,漱口液經(jīng)低速沉淀后,吸取上清液1毫升,~。 原液甲 1份 原液乙 1份 雙蒸水 18份以9磅10分鐘滅菌,此溶液存于4℃冰箱,可使用1個(gè)月。7H2O 2克 MgCl2 羊膜為胚胎最內(nèi)層包被,系由外胚層組成,羊膜腔盛有羊水,胎體浸泡于其中,羊水在起初是單純的生理鹽水,后來(lái)則蛋白質(zhì)含量增加,羊水量平均為1毫升左右。因此殼和殼膜不是簡(jiǎn)單的覆蓋,而是本身具有維持內(nèi)部生命的功能。未受精之雞蛋于4日后僅見(jiàn)模糊卵黃黑影,無(wú)雞胚跡象。血凝抑制效價(jià):呈完全血凝抑制時(shí)的最高血清稀釋度。第8孔為血清對(duì)照。若1個(gè)血凝單位為1∶640,則4個(gè)血凝單位為1∶孔 號(hào)12345678910生 理 鹽 水(ml)尿 囊 液(ml)+ *++++++++病 毒 稀 釋 度1∶1 01∶2 01∶4 01∶8 01∶1601∶3201∶6401∶12801∶2560對(duì) 照補(bǔ) 充 液(ml)(生 理 鹽 水)各 % 雞 紅 細(xì) 胞懸 液(ml )各 *為1∶5稀釋尿囊液 結(jié)果觀(guān)察:凡出現(xiàn)凝集者,紅細(xì)胞平鋪孔底,呈倒張的傘狀,邊緣有卷起的趨向。然后吸取1∶ ml加入到第1孔,混勻后(吹吸3次), ml移入第2孔,如此對(duì)倍稀釋直至第9孔, ml,棄入消毒缸內(nèi)。 血凝抑制試驗(yàn)適用于具有血凝素的病毒,試驗(yàn)必須預(yù)先滴定病毒的血凝效價(jià),然后采用一定量的病毒,通常是加入4個(gè)血凝單位的病毒,在與血凝滴定試驗(yàn)相同的反應(yīng)條件下來(lái)進(jìn)行測(cè)定。3.取出單層細(xì)胞瓶,蓋緊后置37℃孵箱中培養(yǎng)1~2天。5.用生長(zhǎng)液按原量3~4倍稀釋?zhuān)匆黄考?xì)胞能傳3~4瓶。【方法】1.將成片細(xì)胞的生長(zhǎng)液倒掉,用Hanks液洗一次。Hep-2細(xì)胞也曾用來(lái)分離脊髓灰質(zhì)炎病毒、柯薩奇A組病毒、腺病毒、RS病毒。這種細(xì)胞能無(wú)限地傳代,但并不是所有的組織細(xì)胞都能建立傳代細(xì)胞。經(jīng)四層紗布過(guò)濾后的細(xì)胞懸液,低速離心沉淀(1000轉(zhuǎn)/分以?xún)?nèi))5分鐘,吸取上清液,沉淀物加入適量營(yíng)養(yǎng)液,用白細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法進(jìn)行計(jì)數(shù),使成每毫升含50~80萬(wàn)細(xì)胞懸液以作單層細(xì)胞培養(yǎng)。2.用小剪在培養(yǎng)皿內(nèi)將胚胎剪成小塊(4~5毫米3),加Hanks氏溶液(約10毫升)沖洗,靜置1~2分鐘后,用毛細(xì)吸管吸取液體。能引起病變的組織細(xì)胞,往往取自病毒的自然宿主,特別是引起疾病的宿主的某些臟器組織細(xì)胞。 卵黃囊氣室卵白羊水尿囊液圖 103羊膜腔接種法四、病毒細(xì)胞培養(yǎng)法及病變觀(guān)察(錄像)細(xì)胞培養(yǎng)法是目前培養(yǎng)病毒應(yīng)用最廣的一種培養(yǎng)方法,其優(yōu)點(diǎn)是(1)經(jīng)濟(jì)適用,結(jié)果正確且敏感;(2)較實(shí)驗(yàn)動(dòng)物易于控制。收獲病毒之前將雞胚移入普通冰箱18~24小時(shí),將雞胚凍死,以減少收獲時(shí)的出血。 5.注射完畢后,用膠布封口(膠布先經(jīng)碘酒消毒和通過(guò)火焰燒去余碘處理)。【方法】1.所用雞胚在使用前一天,將雞胚直立卵盤(pán)培養(yǎng),使其胚胎向上,便于操作。7.將感染病毒的雞胚自冰箱中取出,用碘酒消毒人工氣室面,然后用鑷子撕去膠布并將卵殼的三角形窗口擴(kuò)大,以便剪取絨毛膜,此時(shí)在明亮處可清楚地看到
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