微生物的生長和純培養(yǎng)-wenkub.com
2025-01-11 00:10 本頁面
【正文】 混菌培養(yǎng) 兩種或兩種以上的微生物的培養(yǎng)。 連續(xù)發(fā)酵的生產(chǎn)時間受以上因素限制，一般只能維持數(shù)月 ~ 1年。 使用范圍：用于生產(chǎn)大量菌體、生產(chǎn)與菌體生長相平行的某些代謝產(chǎn)物，如乳酸、乙醇等。 恒化器 連續(xù)培養(yǎng)技術(shù) ——恒濁培養(yǎng) 概念：通過調(diào)節(jié)培養(yǎng)基流速，使培養(yǎng)液濁度保持恒定的連續(xù)培養(yǎng)方法。 原理：通過控制某一種營養(yǎng)物濃度（如碳、氮源、生長因子等） ，使其始終成為生長限制因子，而達到控制培養(yǎng)液流速保持不變，并使微生物始終在低于其最高生長速率條件下進行生長繁殖。 連續(xù)培養(yǎng)：在微生物培養(yǎng)的過程中，不斷地供給新鮮的營養(yǎng)物質(zhì)，同時排除含菌體及代謝產(chǎn)物的發(fā)酵液，讓培養(yǎng)的微生物長時間地處于對數(shù)生長期，以利于微生物的增殖速度和代謝活性處于某種穩(wěn)定狀態(tài)。 分批培養(yǎng)和連續(xù)培養(yǎng) 分批培養(yǎng)：將微生物置于一定容積的、定量的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)基一次性加入，不再補充和更換，最后一次性收獲。 利用選擇培養(yǎng)基進行直接分離 富集培養(yǎng) 三、微生物的培養(yǎng) 好氧培養(yǎng)和厭氧培養(yǎng) 好氧培養(yǎng)以空氣為氧的來源。 毛細管法：用毛細管提取微生物個體，適合于較大微生物。 （ 3）涂布平板法 將經(jīng)過稀釋的樣品滴加入已制好并滅好菌的培養(yǎng)皿表面，用滅好菌的涂布棒將菌液均勻 的涂抹在整個平板上，經(jīng)培養(yǎng)長出單一菌落。如果經(jīng)過稀釋后的大多數(shù)試管中沒有微生物生長 ,那么有微生物生長的試管得到的培養(yǎng)物可能就是由一個微生物個體繁殖而來的純培養(yǎng)物。菌落在劃線開始處較密集，在劃線的結(jié)束處少，當有單個孤立的菌落時，就達到分離的目的。 （ 2）在超凈工作臺、無菌室和無菌箱中進行操作。 產(chǎn)量常數(shù)：總生長量與消耗基質(zhì)總量之比。 lg 細胞數(shù)或產(chǎn)物濃度 時間 細胞 產(chǎn)物 I型 II型 主要的生長參數(shù) 遲緩時間：實際達到對數(shù)生長期所需時間與理想條件下達到對數(shù)期所需時間之差。 微生物生長與代謝產(chǎn)物形成的關(guān)系： 微生物發(fā)酵形成產(chǎn)物的過程與微生物細胞生長的過程并不總是一致的。 ②細胞內(nèi)顆粒更明顯，細胞出現(xiàn)多形態(tài)、畸形或衰退形，芽孢開始釋放。 對實踐的指導(dǎo)意義： （ 1）發(fā)酵生產(chǎn)形成的重要時期（抗生素、氨基酸等），生產(chǎn)上應(yīng)盡量延長此期，提高產(chǎn)量，措施如下： 補充營養(yǎng)物質(zhì)（補料即流加） 調(diào) pH 調(diào)整溫度 （ 2）穩(wěn)定期細胞數(shù)目及產(chǎn)物積累達到最高 。 只最大收 獲量受影響 生長速度和最大收獲量受影響 時間 穩(wěn)定期 又稱：恒定期或最高生長期 特點： ①新增殖的細胞數(shù)與老細胞的死亡數(shù)幾乎相等， 微生物的 生長速率處于動態(tài)平衡，培養(yǎng)物中的細胞數(shù)目達到最高值。 一些細菌的代時 菌名 培養(yǎng)基 培養(yǎng)溫度 代時 E. coli（大腸桿菌） 肉湯 37℃ 17min E. coli 牛奶 37 Enterobacter aerogenes（產(chǎn)氣腸細菌） 肉湯或牛奶 37 16~18 E. aerogenes 組合 37 29~44 B. Cereus（蠟狀芽孢桿菌） 肉湯 30 18 B. thermophilus（嗜熱芽孢桿菌） 肉湯 55 Lactobacillus acidophilus（嗜酸乳桿菌） 牛奶 37 66~87 Streptococcus lactis（乳酸鏈球菌） 牛奶 37 26 S. lactis 乳糖肉湯 37 48 Salmonella typhi（傷寒沙門氏菌） 肉湯 37 Azotobacter chroococcum（褐球固氮菌） 葡萄糖 25 344~46 Mycobacterium tuberculosis（結(jié)核分枝桿菌）組合 37 792~93 Nitrobacter agilis（活躍硝化桿菌） 組合 27 1200 不同溫度下的代時 溫度對微生物的代時有明顯影響： E. Coli 在不同溫度下的代時 溫度（ ℃ ） 代時（分） 溫度（ ℃ ） 代時（分） 10 860 35 22 15 120 37 17 20 90 40 25 40 45 20 30 29 77 現(xiàn)象：細胞數(shù)目以幾何級數(shù)增加，其對數(shù)與時間呈直線關(guān)系。在 4小時內(nèi)共繁殖了12代。 培養(yǎng)基成分：在營養(yǎng)成分豐富的天然培養(yǎng)基上生長的延滯期比在合成培養(yǎng)基上生長時短；接種后培養(yǎng)基成分有較大變化時，會使延滯期加長，所以發(fā)酵工業(yè)上盡量使發(fā)酵培養(yǎng)基的
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