食品質(zhì)量與安全實(shí)驗(yàn)技術(shù)-6食品安全現(xiàn)代生物檢測(cè)技術(shù)武漢工業(yè)學(xué)院-wenkub.com
2025-01-05 13:03 本頁(yè)面
【正文】 生物芯片根據(jù)所載探針?lè)N類分為基因芯片和蛋白質(zhì)芯片兩大類：基因芯片以 DNA為探針?；驹硎窍葮?gòu)建含有修飾過(guò)的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn) DNA片段 (競(jìng)爭(zhēng) DNA)，競(jìng)爭(zhēng) DNA由質(zhì)粒組成，帶有一個(gè)改造 PCR擴(kuò)增子，改造部分可以是 DNA插人序列、缺失序列或者點(diǎn)突變，競(jìng)爭(zhēng) DNA與待測(cè)目標(biāo) DNA在同一反應(yīng)管中進(jìn)行 PCR共擴(kuò)增，因競(jìng)爭(zhēng) DNA片段和待測(cè) DNA的大小不同，經(jīng)瓊脂糖凝膠可將兩者分開，通過(guò)比較兩種條帶的量可進(jìn)行定量分析。 ? 按常規(guī)方法提取 DNA后，取部分樣品 DNA在 ％瓊脂糖凝膠中電泳，與已知古量的 Marker比較，用計(jì)算機(jī)凝腔成像分析系統(tǒng)處理結(jié)果，以確定所提取的 DNA量。 ? ? 目前基于 GMO特異 DNA片段的定性 PCR篩選方法已廣泛應(yīng)用于 GMO食品檢測(cè)．但是隨著各國(guó)有關(guān) GMO標(biāo)簽法的建立和不斷完善，對(duì)食品中的 GMO含量的下限已有所規(guī)定。免卻了對(duì)樣品進(jìn)行核酸提取的麻煩，同時(shí)可降低檢測(cè)的成本，由于酶既有很高的催化效率，可極大的放大反應(yīng)效果，從而使測(cè)定達(dá)到很高的靈敏度和穩(wěn)定性。 ? （ 一） ELISA技術(shù)與轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè) ? ? 建立在抗體抗原免疫學(xué)反應(yīng)的基礎(chǔ)上。 ? （ 2）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物食品 如轉(zhuǎn)基因的魚、雞、牛、羊等。 ? （ 4）克隆并篩選鑒定 PCR產(chǎn)物，將擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳、染色，在紫外光照射下可見擴(kuò)增特異區(qū)段的 DNA帶．根據(jù)該帶的不同即可鑒定不同的 DNA。下面介紹 PCR反應(yīng)中的一些具體參數(shù)。這些技術(shù)顯示出了巨大的潛力，發(fā)揮著越來(lái)越大的作用，也正因?yàn)槿绱怂鼈儽蛔u(yù)為 20世紀(jì) 80年代分子生物學(xué)革命和生物技術(shù)的飛躍。用于臨床檢驗(yàn)的 ELISA主要有以下幾種類型。 ? 目前最常用的免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)如下： ? （ 1）放射免疫測(cè)定技術(shù) ? （ 2）酶免疫測(cè)定技術(shù) ? （ 3）熒光免疫測(cè)定技術(shù) ? （ 4）發(fā)光免疫測(cè)定技術(shù) ? （ 5）膠體金免疫測(cè)定技術(shù) ? 二、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (ELISA) ? （一） ELISA的基本原理 ? ELISA(EnzymeLinked im
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