食品質(zhì)量與安全實驗技術-6食品安全現(xiàn)代生物檢測技術武漢工業(yè)學院(完整版)
【正文】 性對照品（定性測定中），參考標準品和控制血清（定量測定中）；結合物及標本的稀釋液；洗滌液；酶反應終止液。 ? ? ? ? ? （四）常見的 PCR種類 ? PCR ? PCR ? PCR ? PCR的 DNA指紋圖譜技術 ? ? ? DNA多態(tài)性（ RAPD） ? DNA介導的 PCR技術 ? （ REP）和基因內(nèi)重復性一致序列（ ERIC）的擴增 ? （ AFLP） ? （ RFLP） ? RNA病毒檢測的核酸擴增技術 ? （五） PCR技術用于檢測的主要步驟 ? （ 1）運用化學手段對目標 DNA進行提取。目的主要通過導入外源基因或?qū)ψ陨砘蚣右孕揎梺硎故荏w動物降低結締組織交聯(lián)度、改善肉質(zhì)．或使受體生物個體肥大，或生產(chǎn)營養(yǎng)價值高的蛋、肉、乳等。 ? (二） PCR技術與轉(zhuǎn)基因食品的檢測 ? ? （ 1） PCR基本原理 PCR技術由美國 Centus公司Kary Mullis發(fā)明， 20世紀 90年代逐漸成熟應用。例如，一般700mg的玉米粉可提取 lμg DNA。依據(jù)核酸雜交的原理檢測樣品中的特定基因序列；蛋白質(zhì)芯片以蛋白質(zhì)為探針，依據(jù)抗原抗體反應的免疫學原理檢測樣品中的特定蛋白質(zhì)。 ? DNA的質(zhì)量分析 ? ? CaMV35S啟動子的定量 PCR反應 ? （ 2）定量競爭 PCR法 PCR反應實質(zhì)是對特定模板 DNA的指數(shù)擴增放大，而在相同的條件下，獲得 DNA的量與最初模板DNA的濃度成正相關，競爭定量 PCR就是依據(jù)這種擴增 DNA與模板 DNA之間的濃度相關性設計的。 PCR擴增待檢樣品中的靶標 DNA； ? ③觀測 PCR產(chǎn)物：通過凝膠電泳分析將PCR產(chǎn)物展現(xiàn)； ? ④確定結果：有時為了避免假阻性，還需要對 PCR產(chǎn)物進行限制性酶切分析進行質(zhì)量控制。后兩類轉(zhuǎn)基因食品目前在市場上還很少。 ? （ 3）進行 PCR擴增。應用該方法可使極微
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