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蛋白質(zhì)的分離純化和表征(2)-wenkub.com

2025-05-09 11:44 本頁面
   

【正文】 因?yàn)槌两迪禂?shù) S大體上和分子量成正比關(guān)系 , 故可應(yīng)用超速離心法測(cè)定蛋白質(zhì)分子量 , 但對(duì)分子形狀的高度不對(duì)稱的大多數(shù)纖維狀蛋白質(zhì)不適用 。 蛋白質(zhì)分離常用的層析方法 * 離子交換層析: 利用各蛋白質(zhì)的電荷量及性質(zhì)不同進(jìn)行分離。 *重金屬鹽沉淀法析 金屬離子 *生物堿試劑和某些酸類沉淀法析 生物堿 *加熱變性沉淀法析 加熱 ? 前處理 ? 組分級(jí)處理 ? 細(xì)分級(jí)處理 四 蛋白質(zhì)分離純化的一般原則 ? 根據(jù)分子大小不同 透析、超過濾、梯度離心、凝膠過濾 ? 根據(jù)溶解度差別 等電點(diǎn)沉淀、 PH控制、蛋白質(zhì)鹽溶和鹽析、有機(jī)溶劑、溫度 ? 根據(jù)電荷不同 電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、毛細(xì)管電泳、等電聚焦、層析聚焦、離子交換層析 五 蛋白質(zhì)分離純化的方法 ? 選擇性吸附的純化方法 羥磷灰石層析、疏水作用層析 ? 對(duì)配體的特異生物學(xué)親和力的純化方法 ? 高效液相層析和快速蛋白質(zhì)液相層析 1 幾種重要的蛋白質(zhì)電泳 *SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳 ,常用于蛋白質(zhì)分子量的測(cè)定。 * 蛋白質(zhì)膠體穩(wěn)
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